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《山西医科大学》 2003年
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兴奋性氨基酸在1,2-二氯乙烷急性中毒性脑病发生过程中的作用研究

郭晓丽  
【摘要】: 【目的】探讨兴奋性氨基酸(EAA)在1,2二氯乙烷(1,2-DCE)急性中毒性脑病发生过程中的作用,为阐明1,2-DCE急性中毒性脑病的发病机制提供科学依据。【方法】SD大鼠随机分组,静式吸入染毒。之后采用(1)干湿重法测定大鼠脑皮质和髓质含水量,HE染色观察病理形态学改变;(2)硝酸镧示踪法检测血脑屏障(BBB)通透性;(3)高效液相色谱法(HPLC)检测脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)及γ-氨基丁酸(GABA)含量的变化;(4)免疫组织化学法观察N-甲基-D-天冬氨酸Ⅰ型受体(NMDAR1)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、c-fos以及抑凋亡基因bcl-2的表达情况;(5)末端脱氧核甘酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。【结果】1.(1)脑组织主要表现为细胞外水肿,镧示踪法检测到BBB通透性在5.0g/m~3组即有镧颗粒的大量渗漏。(2)中高剂量染毒组大鼠大脑皮质含水量与对照组比较,升高有统计学意义。染毒后不同观察时间组大鼠,大脑皮质含水量分别高于对照组和观察0h组,差异具有统计学意义;大脑髓质含水量仅在染毒后观察6h组具有统计学意义上的升高。(3)与对照组比较,各剂量染毒组Glu含量都有升高,差异具有统计学意义。与中剂量组比较,最高剂量组Glu含量的下降未见统计学意义;各剂量染毒组Asp含量的升高具有剂量-效应关系;Gly含量在各剂量 山西医科大学2003届硕士研究土学位论文 组的升高具有统计学意义。染毒后各观察组大鼠脑组织(;1tl和Asp含 量均显著高于对照组。但与观察0h组比较,(il。含量仅在观察伯组的 升高具有统计学意义;ASp含量随观察时间延长而不断增加;Gly含量 则在不断一F降,最终至对照组水平;G胡A含量同时也在下降,但尚未 见统计学意义。(4)免疫组织化学法可以清楚地看到,NMI)A Rl阳性神经 元主要分布于大脑皮质和海马。 nNOS阳性神经元仅分布在脑卜和小脑 蒲肯野细胞。Fos蛋白在大脑皮质和海马星形胶质细胞表达,脑干和小 脑蒲肯野细胞层呈阴性反应,而Bd一2蛋白的分布部位与它正好相反, 位于脑干和小脑蒲肯野细胞层。(5)阳性细胞百分比公!算结果:中高剂 量组大鼠NMDARI和nNOS表达数量明显增加,差异具有统计学意义。 染毒后不同时间观察组大鼠NMDARI和nNOS表达数量比对照组和观察 Oh组都有明显增加,差异具有统计学意义。染毒后观察6h组脑组织 nNOS以及大脑皮质NMDARI表达数量均比观察如组有明显一卜降,差异 具有统计学意义;C一fos基因在染毒3Omin时即有阳性表达,在lh时 达到高峰,,3h时下降至对照组水平。bel一2基因在染毒6h时开始表达, 脱离接触后表达数量仍继续增加,在染毒后观察4h时达到峰值,6h时 下降至对照组水平。(6)未见凋亡阳性细胞。【结论】1.EAA可能通过 过度激活NMDARI参与1,2一 DCE急性中毒艇L脑病继发性损杏过程; 2.NO在1,2一DCE急性中毒性脑病中一可能发挥保护作用:3.脑水肿为 血管源性为先的混合性水肿;4.脑组织未见细胞凋亡可能是}〕cl一2基 因抑制的结果。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R747.9

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【参考文献】
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