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《山西医科大学》 2005年
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枯否细胞封闭对肝缺血再灌注损伤发生的影响

赵二保  
【摘要】:目的:肝缺血再灌注可活化枯否细胞,同时合并肠源性内毒素血症发生,导致枯否细胞进一步活化,通过氧化应激,分泌细胞因子诱发再灌注肝损伤发生。本实验采用三氯化钆封闭枯否细胞,探讨枯否细胞封闭对肝缺血再灌注损伤发生影响。 方法:Ⅰ雄性Wistar大鼠随机分为三组:1、对照(Control)组:只开腹,不做其它任何处理;2、缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组:3、氯化钆+缺血再灌注(GdCl_3+I/R)组:2、3组动物于手术前24、48小时经尾静脉分别注射等量0.9%氯化钠或0.5%氯化钆溶液(10mg/kg)。第三日进行肝脏部份缺血再灌注手术(约70%肝血流)。缺血45min后,再灌注3h,6h,乙醚麻醉后,开腹进行无菌无热源腹主动脉采血,肝左叶用10%甲醛溶液固定,肝中叶及脾脏分别包裹后置-70℃冰箱保存,制备匀浆用于丙二醛、谷胱甘肽、TNF-α含量的测定;Ⅱ实验分组同实验Ⅰ,在缺血45min后,再灌注3h分别进行体外分离枯否细胞,检查KCs总数、KCs吞噬活性及分泌功能。Ⅲ实验分四组,Control组:只开腹,不做其它任何处理;Control+LPS组于开腹1小时后腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(200μg/kg),其它组在缺血45min再灌注1h,腹腔注射等量脂多糖1h后,在乙醚麻醉下腹主动脉取血,余检查方法及测定指标同Ⅰ。 结果:缺血45min,再灌注3h,6h后,GdCl_3+I/R组血浆谷-丙转氨酶活性、肝脏丙二醛及TNF-α含量均显著低于肝I/R组,而GSH含量增高;在缺血45min,再灌注3h后所分离枯否细胞,氯化钆+缺血再灌注组KCs总数、KCs吞噬活性和吞噬功能及TNF-α水平均显著低于肝I/R组;缺血45min再灌注1h腹腔注射内毒素1h后,GdCl_3+I/R组血浆谷-丙转氨酶活性、肝脏丙二醛及TNF-α含量也均显著低于I/R组。而谷胱甘肽含量则明显高于肝损伤组。 结论:GdCl_3可能通过抑制LPS诱导KCs活化,降低其分泌功能,保护肝缺血再灌注损伤。肝缺血再灌注损伤可增强枯否细胞对内毒素的敏感性。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R363

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