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转化生长因子β_1在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的表达研究

吴静  
【摘要】: 目的:利用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)动物模型,观察HIBD后不同时间点脑细胞形态的变化,以及转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达变化,从而探讨TGF-β_1与HIBD之间可能存在的关系,为儿科临床新生儿缺氧缺血性脑病的相关预防和治疗提供实验和理论的依据。 方法:7日龄Wistar大鼠48只,雌雄不限,体重12-18g,随机分为2组:对照组(8只),实行假手术,只游离右侧颈总动脉不结扎,不作缺氧处理;HIBD模型组(40只,采用Rice法制备HIBD模型),根据处死动物的时间不同,又随机分为HIBD后12h组,24 h组,72 h组,5d组,7 d组,共5个亚组,每组8只。各组在其相应的时间点断头处死并取脑组织,用于常规病理分析及免疫组化染色检测大脑皮层TGF-β_1表达。采用BI-2000医学图象分析系统进行图象采集与分析,在相同的光亮强度和放大倍数(10×40)条件下统计阳性细胞平均灰度值,数据以(?)±s表示。用SPSS13.0统计软件进行分析。 结果:①实验前各组新生大鼠行为能力正常,模型制做过程中全部发生了不同程度的异常改变。对照组未出现上述行为异常。②HE染色:光镜下,对照组脑组织各部位的结构及细胞层次清楚、形态正常,无神经细胞缺失;HIBD组术后12小时可见神经元胞体肿胀,72小时肿胀明显,细胞排列紊乱,5-7天细胞坏死明显,神经元数量明显减少,正常排列结构消失,有空泡形成。③免疫组化染色:对照组,未出现明显的TGF-β_1免疫组化阳性细胞;HIBD模型组,TGF-β_1的表达先上升后下降,高峰在72h组。HIBD模型组各时间点分别与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);HIBD模型组各时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。 结论:大量文献已证实,TGF-β_1是一种具有多功能的细胞因子,可以通过多种途径减轻HIBD,从而发挥对脑组织的保护及修复作用。本实验结果提示HIBD后,所测目标TGF-β_1的表达随着病变的进展有明显上调而后又下降,提示TGF-β_1参于了HIBD的过程,可能为机体对缺氧缺血性脑损伤的一种保护性反应,也可能是脑组织病理损伤严重程度的又一标志。


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