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《山西医科大学》 2010年
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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP-4表达及依达拉奉治疗效果的研究

夏莉  
【摘要】: 目的:新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)是指各种围生期窒息而导致脑的缺氧缺血性损害,而脑水肿是其病理生理改变中的重要环节之一,因此了解脑水肿产生机理并给予及时处理十分重要。本实验通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察依达拉奉对新生大鼠HIBD后脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)的表达变化及依达拉奉对其治疗效果的影响,进一步探讨其对新生大鼠HIBD的保护作用及其可能的保护机制,为其在新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encepha-lopathy, HIE)的临床运用提供理论依据。 方法:新生7日龄Wistar大鼠120只随机分为假手术组、HIBD模型组及依达拉奉干预组,每组各40只。HIBD模型组和依达拉奉干预组均先制备HIBD模型,各组再根据处死时间不同又分为5个亚组:6h组、12h组、24h组、3d组及5d组,每亚组各8只。模型采用阻断左侧颈总动脉后置于含8%02的低氧环境中2小时制备而成。干预组在HIBD后即刻给予腹腔注射依达拉奉(2mg/kg),每日一次,连续五天,假手术组给予颈正中切口游离左侧颈总动脉,不进行缺血缺氧。各组分别于不同时间点处死动物,肉眼观察脑组织大体形态变化,测脑组织含水量,光镜下观察各组大鼠左侧脑组织HE染色的病理改变,并采用免疫组织化学方法检测AQP-4的表达。 结果:(1)缺氧缺血后新生大鼠出现不同程度的行为异常。(2)缺氧缺血后各时间点可见脑组织大体有不同程度的异常改变,依达拉奉干预后上述改变减轻.(3)脑组织含水量:HIBD组6h即可出现脑水肿,于3d时达高峰,之后开始下降,各时间点与假手术组比较差异有显著性(P0.01)。依达拉奉干预组含水量较HIBD组明显下降,同一时间点与HIBD模型组比较差异有显著性(P0.01)。(4)HE染色:假手术组脑组织结构及细胞层次清晰,神经元排列整齐紧密;HIBD模型组各时间点出现不同程度的神经细胞肿胀、变性、坏死,细胞核碎裂、溶解,神经元数目减少,胶质细胞增生。依达拉奉干预组各时间点损伤程度较HIBD组明显减轻,神经细胞存活数量多,细胞排列尚规则,仅见少量神经细胞变性坏死。(5)免疫组织化学染色:AQP-4阳性染色呈棕黄色的细颗粒沉积,阳性表达主要见于室管膜、软脑膜及血管周围的星形胶质细胞膜上。假手术组AQP-4呈低水平表达,各时间点无明显变化;HIBD模型组各时间点均可见AQP-4阳性表达,同一时间点与假手术组相比,AQP-4表达明显增加,差异均有统计学意义(P0.01)。AQP-4在HIBD后6h即增强,3d达高峰,之后逐渐降低;干预组各时间点AQP-4表达水平较HIBD组明显降低,差异有统计学意义(P0.01) 结论:(1)缺氧缺血后AQP-4表达上调,且与脑组织含水量的变化呈正相关,证实了AOP-4参与了HIBD后脑水肿的发生发展过程。(2)新生大鼠HIBD后给予依达拉奉治疗可减轻脑组织的病理改变,降低脑组织含水量及AQP-4的表达,提示依达拉奉可以通过抑制AQP-4的表达,减轻缺氧缺血后引起的脑水肿,这可能是依达拉奉发挥神经保护作用的机制之一。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R722.1

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