收藏本站
《山西医科大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

雌激素对去卵巢EAE大鼠MMP-9、TGF-β及BBB影响的实验研究

刘金泉  
【摘要】: 目的:血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)完整性的破坏已成为实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)和人类多发性硬化(multiple sclerosis, MS)发病机制中的重要环节。本实验应用雌二醇(estradiol, E2)治疗Wistar大鼠去卵巢后EAE,观察临床疗效和潜在的免疫学机制,目的在于探讨EAE的发病机制和应用E2治疗EAE的作用机制,为今后临床应用雌激素辅助治疗MS等CNS自身免疫性疾病提供实验依据。 方法:制备去卵巢EAE动物模型,随机分为EAE组、E2治疗组和佐剂组。E2治疗组从免疫后(post-inoculation, p.i.)0~8天每日肌注E2(250μg/kg)一次。按照国际通用的五分法评估临床症状,观察体重变化、发病率等临床指标。观察各组在不同时间点的血清E2浓度及血清和脑脊液中白蛋白含量比值(CSF to serum albumin quotient, QA),通过QA评定BBB的损害。在p.i.8、11、14、17天处死动物,采用Western blot和免疫荧光法检测各组基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达;利用免疫组化技术检测CNS中不同部位转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)的表达。采用SPSS13.0软件对所得数据进行分析处理。 结果: 1.大鼠去卵巢后血清E2水平迅速下降,经E2(250μg/kg.d)连续补充9天后其水平迅速升高,当停止补充E2后其又以较快的速度代谢至去卵巢后低水平状态。在p.i.8、11、14天,E2治疗组血清E2水平较EAE组显著升高(F=1532.63,P0.05)。在p.i.17天,E2治疗组血清E2代谢至去卵巢后低水平状态。 2.EAE组在p.i.11天开始出现明显的临床症状,起病突然,发病轻重不一,表现有尾麻痹、后肢无力、体重下降等。在p.i.14天左右发展为发病高峰期,进一步表现为后肢瘫痪、易激惹、体重迅速下降,个别处于濒死状态。在p.i.17天左右病情开始缓解,临床症状减轻,体重开始回升,相应的临床症状评分下降。E2治疗组的发病率、平均体重减轻、平均症状评分、平均病灶数、平均发病日期,这5项临床指标与EAE组比较均明显减少或延迟,均有统计学差异(P0.05)。 3.EAE组在p.i.8天时QA值已明显升高(0.36±0.04),BBB受损较重,之后随着免疫时间的延长,QA值逐渐下降,BBB的功能逐渐恢复。E2治疗组免疫后初期QA值仅有小幅度的增加,在p.i.14天时达到最大值(0.18±0.03),但增幅较小,出现峰值的时间较EAE组延迟,BBB受损较轻。经两因素多水平方差分析统计表明:在p.i.8~17天,EAE组与E2治疗组比较,QA值总的变化趋势有统计学差异(F=21.26,P0.05)。 4.EAE、E2治疗和佐剂组的脑和脊髓中均有MMP-9表达。Western blot显示一条谱带位于92KD处,代表MMP-9酶原形式,另一条位于83KD处,代表MMP-9活性形式。Western blot及荧光免疫组化检测表明:EAE组MMP-9表达较佐剂组高(P0.05),E2治疗组与EAE组相比显著减低(P0.05)。EAE组MMP-9的表达与症状评分呈显著正相关(r=0.87,P0.05)。 5.TGF-β主要由进入CNS的淋巴细胞产生,免疫组化染色阳性表达表现为由血管渗出的淋巴细胞周围有不同程度着色。结果显示:EAE组、E2治疗组TGF-p的表达程度与病情轻重相反。经图像分析显示,E2治疗组TGF-β平均积分光密度在炎症活动高峰期p.i.14天时达到最大值3259.16±541.62,与EAE组(1086.59±214.49)比较有统计学差异(F=17.36,P0.05),表明E2治疗组TGF-β表达高于EAE组。经两因素多水平方差分析统计表明:在p.i.8~17天,EAE组与E2治疗组TGF-β平均积分光密度值比较有统计学差异(F=23.35,P0.05),表明E2治疗组TGF-p表达明显高于EAE组。 结论: 1.去卵巢后EAE血清E2水平降低,经补充E2后明显升高,当停止补充E2后又以较快的速度代谢至去卵巢后低水平状态。 2.继早期BBB损伤高峰之后,EAE临床症状开始出现并逐渐加重。 3.EAE发病高峰期脊髓MMP-9表达明显上调。下调MMP-9的表达进而恢复BBB的正常功能是E2抑制EAE的可能机制之一 4.EAE中TGF-β的表达程度与病情轻重相反,E2有效抑制EAE与其能够上调TGF-β的表达,促使Th细胞发生转分化有关。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R744

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 纪宁;尉杰忠;马存根;米亚英;;雌激素在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的保护作用[J];中华神经医学杂志;2006年12期
2 尉杰忠;孙永胜;;细胞因子在实验性自身免疫性脑脊髓炎耐受中的作用[J];国际免疫学杂志;2006年03期
3 张文雁;刘春云;孟健;纪宁;尉杰忠;孙永胜;梁丽云;马存根;;雌二醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠炎性细胞凋亡的研究[J];临床医药实践杂志;2008年05期
4 纪宁;马存根;尉杰忠;孙永胜;梁丽云;;雌激素抑制多发性硬化和实验性自身免疫性脑脊髓炎作用机制的研究进展[J];中国免疫学杂志;2008年08期
5 纪宁;尉杰忠;孙永胜;刘颖;梁丽云;马存根;;雌二醇抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎与其下调细胞间粘附分子1和干扰素γ的表达有关[J];中国免疫学杂志;2008年11期
6 林艾羽,慕容慎行,林嘉友,许国英;多发性硬化外周血单个核细胞IL-2及TGF-βmRNA表达研究[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;1999年04期
7 辛晋敏,马存根,梁丽云;实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血-脑脊液屏障功能及动态变化[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2004年05期
8 马存根,岳炫烨,Helen Tremlette,Joel Oger;Glatiramer acetate治疗多发性硬化作用机制的研究进展(综述)[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2005年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈后勤;;多发性硬化的治疗进展[J];安徽医学;2010年10期
2 李家伦;毕贵平;戴宇;;多发性硬化症药物治疗进展[J];重庆医学;2011年04期
3 孔武明;龚均;董蕾;徐俊荣;;肠易激综合征患者肠粘膜紧密连接蛋白claudin-1,-3,-4表达改变的意义[J];南方医科大学学报;2007年09期
4 吴波,游潮;血-脑肿瘤屏障的开放与脑胶质瘤化疗[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2004年03期
5 桑洁;刘萍;赵宝全;;血脑屏障分子组成研究进展[J];国际药学研究杂志;2011年03期
6 刘金泉;马存根;武永明;王建宾;;雌激素对去卵巢EAE大鼠IFN-γ影响的相关性研究[J];中外医疗;2010年07期
7 刘华,刘颖,武慧丽,辛晋敏,马太花,梁丽云,马存根;实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达与临床评分的相关性[J];解剖学杂志;2005年05期
8 孔武明;龚均;董蕾;鲁晓岚;徐俊荣;;Expression of intestinal mucosa tight junctions claudin proteins and mRNA in patients with irritable bowel syndrome[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2007年03期
9 刘举珍;李润今;;多发性硬化症与可溶性白细胞介素-2受体的关系[J];实用临床医学;2011年03期
10 万怡;黄燕兴;;多发性硬化的中西医诊治[J];中国民族民间医药;2012年21期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 姜新义;陈亮岑;王霄;沙先谊;方晓玲;;基于整合素受体介导的长循环碳酸酯纳米粒对恶性脑胶质瘤靶向递药研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 尚晓玲;益肾达络饮治疗多发性硬化的神经免疫机制研究[D];北京中医药大学;2006年
2 贾怡;一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
3 吕梅励;mMIP-1α-DT390重组免疫毒素治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
4 陈文捷;DT390-IP10新型重组免疫毒素及其治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究[D];四川大学;2006年
5 王晓龙;中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin酵母工程菌构建及其生物活性研究[D];重庆医科大学;2007年
6 张震;低频超声与小剂量缓激肽联合应用开放血肿瘤屏障机制的研究[D];中国医科大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 夏天;紧密连接蛋白CLAUDIN-1在大肠杆菌性腹泻仔猪胃肠组织中的表达及意义[D];华中农业大学;2010年
2 刘洋;基于大型蚤急性毒性实验的水质监测技术构建[D];山东师范大学;2011年
3 李雁翔;Fasudil对EAE小鼠脊髓内细胞Rock-Ⅱ表达的影响[D];山西医科大学;2011年
4 马丽;降纤酶对实验性变态反应性脑脊髓炎保护作用的研究[D];泸州医学院;2011年
5 吴旭丽;针刺对EAE大鼠IL-23、sICAM-1影响的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
6 蔺辉前;小剂量复合抗原诱导多病程EAE大鼠长病程中髓鞘损伤及α-硫辛酸的保护作用[D];河北医科大学;2011年
7 魏伟;赖诺普利对EAE大鼠干预作用及Ngb、C-jun蛋白表达变化[D];南华大学;2011年
8 余平;大鼠全脑缺血再灌注对脑组织紧密连接蛋白occludin的影响[D];华中科技大学;2011年
9 周宇倩;中药干预与多发性硬化T细胞免疫功能的相关性分析[D];北京中医药大学;2011年
10 郑铁铮;EAN脑保护与脑损伤修复三细胞模型系统中的内皮细胞及神经元形态特征[D];大连医科大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 纪宁;尉杰忠;马存根;米亚英;;雌激素在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的保护作用[J];中华神经医学杂志;2006年12期
2 尉杰忠;孙永胜;;细胞因子在实验性自身免疫性脑脊髓炎耐受中的作用[J];国际免疫学杂志;2006年03期
3 宋向凤,孙翔,王辉;雌孕激素对T淋巴细胞生长的调节作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年02期
4 马太花,武慧丽,辛晋敏,马存根,梁丽云;雷公藤甲素对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠细胞凋亡的影响[J];中国临床康复;2005年29期
5 林嘉友;赵武述;;细胞因子及其在临床诊断和治疗中的应用[J];中华医学检验杂志;1996年03期
6 吕雪莹,张凤蕴,王丽群,于伟玲,张莉;实验性变态反应性脑脊髓炎的病理研究[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2000年01期
7 辛晋敏,马存根,梁丽云;实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血-脑脊液屏障功能及动态变化[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2004年05期
8 辛晋敏;马存根;梁丽云;马太花;尉杰忠;;细胞间黏附分子-1在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠中表达的动态变化及作用[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2006年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 凌艺辉,黄忆明;大豆异黄酮对去势大鼠血脂及动脉内皮舒张功能的影响(英文)[J];中国现代医学杂志;2004年12期
2 黄芳,汪家梨,姜小鹰,吴小南,曾毅丹;补肾中药组方对去卵巢大鼠骨微结构的影响[J];中国老年学杂志;2005年07期
3 李颖,薛存宽,何学兵,曾伶,沈凯,蒋鹏;红车轴草异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松防治作用的实验研究[J];中国骨质疏松杂志;2005年04期
4 唐瑛;唐忠志;王晓昆;杨李;;骨肽注射液对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1及Fas的影响[J];中国中医骨伤科杂志;2005年06期
5 蔡波;张兆强;刘浩宇;刘锡仪;;利骨素预防去卵巢大鼠骨矿盐丢失的实验研究[J];微量元素与健康研究;2006年04期
6 王文蔚;朱红叶;余清;李安乐;刘存丽;王一龙;;染色木黄酮对去卵巢大鼠血脂代谢的影响及抗氧化作用研究[J];浙江医学;2006年09期
7 蔡波;张兆强;刘浩宇;刘锡仪;;利骨素对去卵巢大鼠矿物骨元素代谢的影响[J];微量元素与健康研究;2007年01期
8 顾蓓;杨欣;商敏;李亚珍;廖秦平;;替勃龙对去势大鼠骨强度的影响研究[J];中国骨质疏松杂志;2007年01期
9 佟晓晶;郑建华;黄延刚;;雷洛昔芬对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体亚型表达的影响[J];哈尔滨医科大学学报;2007年01期
10 詹强;倪克锋;邵雪英;;足部反射区推拿疗法对去卵巢大鼠骨生物力学的影响[J];中国中医药科技;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 常小霞;吴洁;;中西医结合治疗对去卵巢大鼠子宫的影响[A];中华医学会第三次全国绝经学术会议暨绝经相关问题学习班论文汇编[C];2011年
2 邵增务;兰观华;祝素萍;杨述华;;番茄红素对去卵巢大鼠骨质保护作用的研究[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
3 李淑玲;李育竹;巩丽;李辉;;不忘散对去卵巢大鼠雌激素水平和海马组织炎症反应的影响[A];第十一次全国中医妇科学术大会论文集[C];2011年
4 卜淑敏;王颖捷;杨少峰;段玉双;阎守扶;;中等强度跑台运动预防去卵巢大鼠骨质疏松机制的研究[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
5 伍海昭;陈海啸;林鹏;洪盾;;骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠I型胶原的表达及代谢产物的影响[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
6 卞琴;刘书芬;黄建华;杨铸;宁友;赵永见;王拥军;沈自尹;;3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用[A];第十次全国中医药传承创新与发展学术交流会暨第二届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议论文集[C];2011年
7 王守辉;卜淑敏;阎守扶;;PPARγ蛋白在去卵巢大鼠不同组织中表达的差异及运动的干预效应[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
8 黎晓;李良东;曾靖;黄志华;肖海;;3′-大豆苷元磺酸钠对去卵巢大鼠脂代谢的影响[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
9 韩为华;乔黎焱;马静;;二仙汤加味对去卵巢大鼠主动脉雌激素受体β表达的影响[A];2011年中华中医药学会心病分会学术年会暨北京中医药学会心血管病专业委员会年会论文集[C];2011年
10 常小霞;吴洁;;中西医结合治疗对去卵巢大鼠骨形态学影响的研究[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 陈听雨;惠誉下调爱尔兰评级至BBB+[N];中国证券报;2010年
2 ;染料木素对去卵巢大鼠颌骨代谢的改善作用[N];中国医药报;2003年
3 杨永革;桶装水质量信用风险评级为BBB[N];中华工商时报;2011年
4 董秘;中国石化获标准普尔“BBB”信用评级[N];中国石化报;2001年
5 梁熙玲;国际惠誉评级机构确认莫斯科信誉等级为“BBB”级[N];远东经贸导报;2010年
6 张巧艳;蛇床子抗骨质疏松症研究进展[N];中国医药报;2004年
7 英娉文;电信准入杀手粉墨登场[N];中华工商时报;2000年
8 ;东莞 严格评定信用等级[N];经济日报;2001年
9 ;城市硬件 DIY情报站[N];电脑报;2002年
10 中国疾病预防控制中心 营养与食品安全所 刘兆平 卢承前;大豆异黄酮与女性慢性疾病[N];科技日报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜迎;情志因素对去卵巢大鼠脑神经递质、内分泌的影响及中药的干预作用[D];广州中医药大学;2011年
2 戴哲浩;去卵巢、糖皮质激素、降钙素对雌性大鼠骨强度影响的实验研究[D];中南大学;2011年
3 张颖;左归丸对去卵巢所致骨质疏松症大鼠股骨骨髓中相关蛋白质的影响[D];中国中医科学院;2012年
4 田淑君;电针对去卵巢大鼠脑认知功能影响机制的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
5 马淑兰;电针干预“围绝经期综合征”大鼠模型效应的机制[D];复旦大学;2011年
6 黄宏兴;去卵巢大鼠肌骨线粒体活性变化及骨康方干预的实验研究[D];湖南中医药大学;2011年
7 李爽;运动加中药骨康对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用的研究[D];广州中医药大学;2005年
8 郑雨;加味左归饮治疗更年期综合征临床疗效与机理研究[D];广州中医药大学;2005年
9 张葳;雌激素对去卵巢大鼠中枢神经系统保护机制的研究[D];吉林大学;2005年
10 年华;二仙汤抗骨质疏松的物质基础研究[D];第二军医大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘金泉;雌激素对去卵巢EAE大鼠MMP-9、TGF-β及BBB影响的实验研究[D];山西医科大学;2010年
2 杜丹丹;乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨代谢和相关细胞因子的影响[D];福建医科大学;2011年
3 张莉莉;IGF-1、IRS-1、IRS-2在2型糖尿病骨质疏松大鼠骨组织中表达[D];河北医科大学;2011年
4 田素领;逆针关元、三阴交对去卵巢大鼠HPO轴的影响及抗氧化作用的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
5 陈默然;吉林野生山核桃油对去卵巢大鼠海马细胞凋亡的影响[D];延边大学;2010年
6 何冀川;活血补肾复方对去卵巢大鼠早期干预的实验研究[D];中国中医科学院;2010年
7 刘显庆;罗格列酮调节脂肪和主动脉中脂联素及其受体的表达改善去卵巢大鼠的胰岛素抵抗[D];南华大学;2005年
8 张陈彦;阿司匹林对去卵巢大鼠骨丢失的影响[D];河北医科大学;2010年
9 董丽;玫参胶囊治疗围绝经期综合征的实验研究[D];兰州大学;2009年
10 曹译;鹿茸对去卵巢大鼠所致骨质疏松症治疗作用的研究及鹿茸中硫酸软骨素的提取[D];吉林大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026