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《山西医科大学》 2010年
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叶酸诱导骨髓间充质干细胞的体内外实验研究

薛芳  
【摘要】: 目的:本实验旨在研究叶酸对骨髓基质干细胞(Human Bone Marrow Stromal Cells, HBMSCs)诱导分化为神经细胞的影响及其移植治疗大鼠脑缺血模型神经细胞的增值分化作用,探讨HBMSCs的移植机制,主要包括以下两个方面:①研究叶酸对HBMSCs向神经细胞诱导的影响;探讨HBMSCs在传代培养和向神经细胞分化过程中的分泌作用及其机制。②观察叶酸诱导后HBMSCs经尾静脉注射治疗大鼠脑缺血后七天原位神经前体细胞的增殖、分化情况,评价HBMSCs治疗价值并探讨其移植入大鼠体内作用机制。 方法:HBMSCs由正常成年人骨髓经密度梯度离心加贴壁离心获得,取第5代HBMSCs以1mM二巯基乙醇(BME)预诱导24h后,用羟基茴香醚(BHA)、2%二甲基亚砜(DMSO)、和3种不同浓度的叶酸(4mg/L、40 mg/L、400mg/L)诱导分化,采用免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志神经元特异性烯醇化酶NSE、胶原纤维酸性蛋白GFAP的表达,MTT(四唑盐比色)法检测不同时间段对HBMSCs增殖的影响。选取16只健康Wistar大鼠分为假手术组、缺血对照组、低浓度HBMSCs组、高浓度HBMSCs组,后三组采用接扎双侧颈总动脉法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO),模型制作24h后将叶酸诱导后不同浓度HBMSCs经尾静脉注射入大鼠体内。各组腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶(bromodeoxyuridine, BrdU)用以标记处于增殖状态的神经前体细胞,应用免疫组织化学染色检测缺血后7d脑组织BrdU、BrdU+NSE、BrdU+GFAP阳性细胞数,结果进行统计学分析。 结果:叶酸诱导后3h细胞胞体成圆形,折光性强,多级细长的突起,随着时间的延长突起变的更多更长,并相互连接交织成网。诱导后8h细胞免疫化学显示,对照组约70%细胞呈阳性染色,GFAP阳性为主,叶酸低剂量组阳性细胞数与对照组相近,叶酸中高剂量组阳性细胞数占90%,以NSE为主,统计学显示,对照组,叶酸低剂量组与叶酸中高剂量组比较差异有显著性(P0.01)。使用40 mg/L叶酸诱导HBMSCs后干预治疗大鼠脑缺血,脑梗死后7d侧脑室室管膜下区、海马齿状回区BrdU、BrdU+NSE、BrdU+GFAP阳性细胞数开始增多,且高浓度组的上述阳性细胞数明显多于对照组(P0.05)和低浓度组(P0.05)。 结论:①不同剂量的叶酸均能促进HBMSCs向神经细胞增值分化,以40 mg/L中等剂量的叶酸诱导HBMSCs向神经细胞增值分化最为理想。②叶酸诱导HBMSCs干预治疗后,可以促进脑梗死大鼠损伤原位内源性神经前体细胞的增殖、分化,具有潜在的治疗价值。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R329

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 薛云;;叶酸与神经管缺陷[J];国外医学情报;2005年12期
2 姬长珍;黄国伟;张文治;苏心;;叶酸对体外胎鼠神经干细胞增殖分化的影响[J];卫生研究;2007年05期
3 连霞;李光来;;依达拉奉对骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响[J];中西医结合心脑血管病杂志;2006年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 刘云峰;神经干细胞的分离培养及移植治疗大鼠脑出血的实验研究[D];山西医科大学;2004年
2 冯鹏;骨髓间充质干细胞上清液的体内外实验研究[D];山西医科大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵莹;常红;黄国伟;张绪梅;杜文平;杨云霞;;叶酸对局灶性脑梗死大鼠神经干细胞增殖作用的影响[J];天津医科大学学报;2009年03期
2 尤清菊;张绪梅;刘欢;杨阳;赵琳;刘佳杰;黄国伟;;叶酸对缺氧新生鼠神经干细胞体外增殖的影响[J];天津医科大学学报;2009年04期
3 赵莹;黄国伟;常红;张绪梅;;叶酸对脑梗死大鼠星形胶质细胞GFAP表达的影响[J];天津医药;2008年10期
4 姬长珍;黄国伟;张文治;苏心;;叶酸对体外胎鼠神经干细胞增殖分化的影响[J];卫生研究;2007年05期
5 杨阳;黄国伟;张绪梅;赵琳;尤清菊;刘佳杰;;体外缺氧条件下新生鼠神经干细胞pERK1/2表达与叶酸的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年06期
6 张莹;常红;黄国伟;张绪梅;;SELDI蛋白芯片技术检测叶酸对胎鼠神经干细胞作用的蛋白表达谱[J];营养学报;2011年02期
7 冯鹏;李光来;王飞;;骨髓间充质干细胞上清液治疗大鼠脑缺血的作用机制[J];中西医结合心脑血管病杂志;2008年03期
8 王飞;冯鹏;李光来;;不同时间诱导后上清液在骨髓间充质细胞向神经元样细胞分化中的作用[J];中西医结合心脑血管病杂志;2008年03期
9 刘韶英;吴红金;;骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的可塑性及临床应用研究进展[J];中西医结合心脑血管病杂志;2009年01期
10 薛芳;李光来;赵永旺;;叶酸诱导骨髓基质干细胞分化为神经细胞的浓度探索[J];中西医结合心脑血管病杂志;2009年08期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 黄国伟;;叶酸、VB_6、VB_(12)与中枢神经系统疾病[A];中国营养学会第十九期“营养知识更新学习班”资料汇编[C];2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 刘瑞玲;tPNS对hBMSCs诱导分化后神经元样细胞生长状态及凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
2 陈文超;大鼠脑组织匀浆对其BMSCs向神经元样细胞分化的影响[D];山西医科大学;2011年
3 冯鹏;骨髓间充质干细胞上清液的体内外实验研究[D];山西医科大学;2008年
4 赵永旺;单唾液酸四己糖神经节苷脂在骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化中的作用[D];山西医科大学;2009年
5 赵艳梅;体外不同诱导条件对骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的实验研究[D];广西医科大学;2010年
6 徐隋意;葡萄籽原花青素对骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2010年
7 尤清菊;同型半胱氨酸对体外神经干细胞增殖与凋亡的影响及其机制的探讨[D];天津医科大学;2010年
8 赵琳;叶酸对体外缺氧新生大鼠神经干细胞Notch信号通路作用的研究[D];天津医科大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 顾平,娄淑杰,王铭维,王彦永,鲍璇,何成,路长林;骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响[J];第二军医大学学报;2003年03期
2 薛云;;叶酸与神经管缺陷[J];国外医学情报;2005年12期
3 邓志锋;汪泱;邓丽影;赖贤良;宋书欣;徐丽君;涂伟;郭华;汤爱萍;;自体骨髓间充质干细胞移植治疗中枢神经系统损伤性疾病(附五例报告)[J];实用临床医学;2007年06期
4 安彩霞;金玉;;骨髓间充质干细胞条件培养基对缺氧大鼠神经元凋亡的影响[J];实用儿科临床杂志;2007年14期
5 张蒙夏,谢富康;成年SD鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化与凋亡关系的研究[J];中国病理生理杂志;2003年01期
6 吴永超;郑启新;胡东;郝杰;王运涛;刘晓帆;;骨髓间充质干细胞神经营养因子的表达及对脊髓神经元的保护作用[J];中国康复医学杂志;2006年10期
7 方利君,付小兵,孙同柱,李建福,程飚,杨银辉,王玉新,王通;在体诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮细胞的初步观察[J];中华创伤杂志;2003年04期
8 安沂华,王红云,张相彤,刘暌,张亚卓,王忠诚;大鼠胚胎神经干细胞移植治疗脑出血的实验研究[J];中华神经外科杂志;2002年01期
9 娄晓辉,张亚卓,孙梅珍,厉俊华;应用人骨髓基质细胞治疗大鼠缺血性脑梗塞的实验研究[J];中华神经外科杂志;2002年05期
10 吴永超;郑启新;胡东;郝杰;王运涛;刘晓帆;;骨髓间充质干细胞表达神经营养因子及对神经干细胞的保护作用[J];中国康复理论与实践;2006年09期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘云峰;神经干细胞的分离培养及移植治疗大鼠脑出血的实验研究[D];山西医科大学;2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张楠;;叶酸缺乏可加促酗酒者的肝损伤[J];国外医学情报;2003年04期
2 李艳华;妇女围受孕期增补叶酸预防胎儿神经管缺陷[J];中国妇幼保健;2005年14期
3 向建军,许榕仙;叶酸及同型半胱氨酸与心血管疾病研究进展[J];海峡预防医学杂志;2005年05期
4 张新华;樊春红;;抑郁症患者血清叶酸和维生素B12浓度研究[J];临床精神医学杂志;2006年01期
5 杨慧敏,孙轶,廖国仪,周冬,余灵,黄云祖,周天鸿;叶酸缺乏孕鼠子代血细胞形态学改变及脑额区皮层超微结构表现[J];中国小儿血液;2003年03期
6 刘芬;武文惠;;叶酸与胚胎停止发育的关系[J];中国优生与遗传杂志;2007年07期
7 任大军;;浅谈叶酸对身体的重要性[J];实用医技杂志;2008年02期
8 陈冬妹;张满芬;肖文;;血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平与结直肠腺瘤性息肉相关性研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;2011年01期
9 孙淑芝;;不可忽视的维生素——叶酸[J];科学养生;2002年06期
10 朱文丽,刀京晶,成君,李书琴,李勇;血清同型半胱氨酸及叶酸水平与先天性心脏病的关系[J];卫生研究;2005年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郝玲;;第七节 叶酸[A];中国营养学会DRIs修订专家委员会第二次会议样板稿汇编[C];2011年
2 郝玲;;第七节 叶酸[A];中国营养学会第二次膳食营养素参考摄入量研讨会汇编[C];2011年
3 张继军;石晓丽;王南平;;叶酸功能研究进展[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年
4 杨慧敏;孙轶;周天鸿;廖国仪;周冬;余灵;;叶酸缺乏孕鼠子代脑组织DNA甲基化变化[A];中国营养学会第九次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2004年
5 杨慧敏;林茹珠;廖国仪;周冬;孙轶;黄云祖;陈觉凝;;叶酸缺乏的离乳大鼠空间学习记忆能力的检测及意义[A];新世纪全国首届小儿综合研究学术会议论文汇编[C];2001年
6 孙淑娜;宋后燕;钟涛;王跃祥;桂永浩;;叶酸缺乏导致先天性心血管疾病的实验动物研究[A];2006(第三届)江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年
7 孙淑娜;桂永浩;宋后燕;王跃祥;钟涛;;叶酸缺乏导致先天性心血管疾病的实验动物研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年
8 孙淑娜;桂永浩;蒋璎;宋后燕;钟涛;;叶酸对斑马鱼胚胎心脏发育影响的实验研究[A];中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会论文汇编(上册)[C];2008年
9 杨慧敏;廖国仪;周冬;孙轶;黄云祖;陈觉凝;林茹珠;;叶酸缺乏的离乳大鼠空间学习记忆能力的检测及意义[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
10 杨慧敏;林茹珠;瘳国仪;周冬;孙轶;黄云祖;陈觉凝;;叶酸缺乏的离乳大鼠空间学习记忆能力的检测及意义[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;叶酸缺乏危及母子[N];保健时报;2004年
2 王敏;叶酸缺乏影响优生[N];江苏科技报;2001年
3 郑州大学一附院 王志铭;防痴呆多吃绿叶菜[N];健康时报;2010年
4 公共营养师 李靖婷;叶酸功能新发现[N];医药养生保健报;2006年
5 中南大学湘雅二医院老年外科 刘栋才;补叶酸防肠癌 时机仍是谜[N];健康报;2008年
6 靳晓方;体内缺乏叶酸可能得“怪病”[N];中国妇女报;2006年
7 王玉林;叶酸缺乏易致宫颈癌[N];大众卫生报;2007年
8 ;孕妇不要过量服用叶酸[N];农村医药报(汉);2008年
9 记者 田雅婷;北京为孕妇免费增补叶酸[N];光明日报;2011年
10 本报记者 黄 丹;叶酸缺乏和神经管畸形[N];中国中医药报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高茹菲;叶酸缺乏对子宫内膜容受性相关基因表达的甲基化调控及其对胚胎着床的影响[D];重庆医科大学;2012年
2 宋京翔;叶酸缺乏介导的肿瘤相关基因启动子区CpG岛甲基化状态异常与散发性结直肠癌发生的相关性研究[D];第二军医大学;2010年
3 孙淑娜;叶酸缺乏对斑马鱼心血管系统发育影响的实验研究[D];复旦大学;2007年
4 徐望红;叶酸及其代谢酶基因多态与子宫内膜癌发生和预后[D];复旦大学;2008年
5 王丽;中国人群胰腺癌死亡率叶酸代谢基因MTHFR、MS、TS多态性与胰腺癌的关联研究[D];中国协和医科大学;2004年
6 操州虹;细胞凋亡与巨幼细胞贫血、骨髓增生异常综合征骨髓无效造血的关系及其影响因素[D];中国协和医科大学;1997年
7 袁绍辉;重组BMP-4/7融合基因及其表达蛋白对骨髓基质干细胞生物学行为的影响[D];吉林大学;2005年
8 张晖;bFGF/PLGA缓释微球对兔膝关节软骨不同面积缺损修复的实验研究[D];四川大学;2005年
9 戚超;骨髓基质干细胞与生物衍生骨复合修复山羊胫骨缺损的实验研究[D];四川大学;2005年
10 郜元军;骨髓基质干细胞向肠神经元细胞分化的研究[D];华中科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 薛芳;叶酸诱导骨髓间充质干细胞的体内外实验研究[D];山西医科大学;2010年
2 丛革新;叶酸对神经干细胞增殖分化相关信号中mRNA及蛋白表达的影响[D];天津医科大学;2007年
3 杨阳;叶酸通过MAPK通路对体外缺氧神经干细胞增殖作用的研究[D];天津医科大学;2010年
4 林学科;高剂量叶酸补充孕小鼠与子代结肠EDNRB表达关系在先天性巨结肠症发病机制作用初步探索[D];华中科技大学;2010年
5 唐银科;MTHFR基因多态性及补充叶酸与非综合征性唇腭裂的相关性研究[D];郑州大学;2011年
6 孙轶;叶酸缺乏孕鼠子代脑组织DNA甲基化及超微结构的变化[D];暨南大学;2001年
7 林茹珠;叶酸缺乏对离乳大鼠学习记忆的影响[D];暨南大学;2000年
8 敖新宇;叶酸缺乏对人类淋巴细胞遗传毒性与细胞毒性的探索[D];云南师范大学;2004年
9 周政华;血清叶酸微生物测定方法改进及其在食管癌研究中的应用[D];四川大学;2007年
10 雷玉洁;叶酸缺乏与乳腺癌患者淋巴细胞毒性的关系研究[D];昆明医学院;2005年
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