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《内蒙古大学》 2011年
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月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究

杨佳  
【摘要】:多数高等植物和动物中由于缺乏脱氢酶等相关酶系而不能合成C18以及超过C18的多不饱和脂肪酸,必须从特殊植物或微生物中获得。利用生物技术将外源编码相关脱氢酶的基因在油料作物中表达,在控制种子中脂质组成方面具有很好的发展前景。 本研究以子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜品种秦油3号的遗传转化体系,分别探讨预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、抗生素浓度及硝酸银添加与否对转化率的影响。在此基础上,首次将来自月见草的A6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ6-fatty acid desaturase gene, D6D)通过农杆菌介导法导入油菜中,经PCR检测获得了转基因植株。主要结果如下: 1)子叶节的最佳预培养条件:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,培养2d。 2)侵染菌液的适宜浓度为OD600=0.4,侵染时间为5 mmin,共培养时间为2d。 3)侵染后的外植体在含有庆大霉素的分化选择培养基上培养,初期筛选浓度为5 mg/L,一周后增加到10 mg/L。分化期间选择头孢米诺钠作为抑菌剂,浓度为200 mg/L,同时加入硝酸银以促进植物分化。 4)抗性芽移至含IBA的生根培养基中,获得了再生植株,经PCR检测共得到12株阳性转基因植株,转化率为35.3%,阳性小植株移栽花盆。
【学位授予单位】:内蒙古大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S565.4;Q943.2

【参考文献】
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