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《内蒙古大学》 2017年
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拟南芥锌转运蛋白ZNE1的亚细胞定位及其功能研究

王耀辉  
【摘要】:拟南芥At3g08650被预测编码锌转运蛋白,但是没有直接的实验证据。我们将 At3g08650 命名为 ZINC NUTRITION ESSENTIAL 1(ZNE1)。为了确定 ZNE1蛋白的亚细胞定位,在烟草表皮细胞内瞬时表达ZNE1-GFP(绿色荧光蛋白)融合基因。在激光共聚焦显微镜下,通过对比发射红色荧光的细胞器标记蛋白位置,证明ZNE1定位在高尔基体。进一步将ZNE1在哺乳动物细胞HEK293T中表达,利用免疫荧光证明ZNE1存在于细胞质中。为了确定ZNE1在植物锌依赖生长中的生理功能,纯合鉴定到两个拟南芥T-DNA插入缺失突变体zne1。进一步在水培条件下,对比拟南芥野生型Co1和zne1锌依赖生长表型,发现zne1在高锌水培液中表现叶片发黄的敏感表型。将完整的ZNE1编码序列整合到zne1突变体基因组可以使zne1对高锌环境的反应恢复到野生型,证明ZNE1是拟南芥适应高锌环境的必需基因。为了探索质外体Zn2+在活体叶片中的分布,我们利用离体叶片叶柄浸泡法和膜不通透性Zn2+特异性荧光染料FluoZin-3,发现在高锌处理条件下,拟南zne1一、二级叶脉中Zn2+浓度显著高于野生型,证明ZNE1是调节拟南芥叶子内Zn2+分布的重要基因。
【学位授予单位】:内蒙古大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:Q943.2

【参考文献】
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【相似文献】
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2 苗瑞英;拟南芥编码锌转运蛋白ZNE1基因表达模式和生理功能研究[D];内蒙古大学;2017年
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