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《内蒙古工业大学》 2010年
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血根碱对细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用研究

张鸿  
【摘要】:目前肝癌和胃癌病发率在亚洲较为突出。治疗手段主要是手术辅助化疗,但是化疗的耐药性成为治疗过程中新的难题。因此,从中药中寻找抗癌药物成为当前研究的热点。血根碱(Sanguinarine,SA)是提取自博落回等植物中的一种苯菲啶类生物碱,具有抗癌活性。 为了能进一步探讨血根碱抗癌作用,本课题选择人胃癌细胞株BGC-823细胞和人肝癌细胞株SMMC-7221细胞作为研究对象,通过光学倒置显微镜观察药物作用前后的细胞形态变化,直观的看出SA对肿瘤细胞具有明显的增殖抑制作用;台盼蓝拒染试验和二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)实验,结果表明血根碱对细胞具有明显的抑制作用。在一定范围内,随着药物浓度的增大,作用时间的延长和细胞浓度的减小,细胞增殖抑制作用增强,最高抑制率最高超过90%;Hochest 33258染色实验,结果表明随着药物浓度的增大,细胞的早期凋亡率增大,同时,细胞体积变小,细胞染色质浓缩;在流式细胞仪(FCM)检测对血根碱作用肿瘤细胞的细胞周期和细胞凋亡情况,结果表明随着药物浓度的增大,作用时间的延长,细胞早期凋亡率升高,细胞各个时期的DNA含量变化明显,血根碱使BGC-823细胞阻滞于G1/G0期,而将SMMC-7221细胞阻滞于G2/M期。为了进一步佐证血根碱抑制细胞增殖,改变细胞周期和诱导细胞凋亡与相应的凋亡蛋白有关,我们通过Western Blot试验对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达进行检测,试验结果表明随着血根碱浓度逐渐增大,SMMC-7221细胞和BGC-823细胞的Bcl-2/Bax都逐渐降低。血根碱和谷胱甘肽(GSH)的相互作用紫外光谱和荧光光谱研究,结果表明随着谷胱甘肽浓度的增大,血根碱的紫外吸光光度和荧光吸光光度逐渐减少,血根碱与谷胱甘肽存在相互作用。
【学位授予单位】:内蒙古工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735

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【参考文献】
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