裸燕麦球蛋白及其酶解物的制备和抗氧化活性研究

【摘要】：以裸燕麦为原料,采用Osborne蛋白分级方法分离提取裸燕麦球蛋白,并利用盐析、Sephadex G-100凝胶过滤层析、SDS-PAGE电泳等方法对其纯化。研究结果表明:裸燕麦球蛋白提取的最佳条件为:NaCl浓度10%,料液比1:10,提取时间35min,提取5次,提取率可达90%以上。裸燕麦球蛋白的硫酸铵饱和度为60%。在柱层析分离条件下(洗脱速度为3～7mL/10min,缓冲溶液为蒸馏水),得到的组分I分子量范围分布在25kDa、34～29kDa、44kDa,组分II分子量范围分布在19kDa、23kDa、25kDa。 采用蛋白酶水解裸燕麦球蛋白,筛选最佳水解蛋白酶,获得最佳酶解工艺,并利用Sephadex G-25凝胶层析进行纯化及其分子量测定。结果表明:采用碱性蛋白酶水解,酶用量10000U/g,底物浓度5%,温度60℃,pH值9.0,水解3h后水解度达75%以上,清除率达60%以上。酶解液经分离纯化得到图谱为2个峰,分别为组分I (分子量范围:10738Da～133929Da)和组分I(I分子量范围:114Da～861Da)。 分别对裸燕麦球蛋白、酶解物、分离组分I、分离组分II清除·OH、O2ˉ·、DPPH·能力进行研究,并对球蛋白及其酶解物的溶解性、乳化性、粘度、起泡性等功能特性进行测定。研究结果表明:测得组分II清除·OH ( IC500.589mg/mL )、O2ˉ·(IC501.783mg/mL)、DPPH·(IC500.095mg/mL)能力高于其他三个组分。pH值在3.0～9.0时酶解物溶解性较球蛋白显著提高,达93%以上;当pH7.0时裸燕麦球蛋白的乳化性及乳化稳定性最小,为18.1㎡/g和13.0㎡/g,当pH5.0时酶解物的乳化性及乳化稳定性最小,为55.2㎡/g和32.8㎡/g,显示了酶解物较高的乳化性能力;裸燕麦球蛋白及其酶解物浓度在1.5%～10%时,粘度变化较为平缓,但当浓度高于10%时,粘度上升较快。其中球蛋白粘度较酶解物的高;在pH5.0时球蛋白及其酶解物的起泡性最低,其中酶解物显示了较高的起泡性。

【关键词】：裸燕麦 球蛋白 纯化 酶解物 抗氧化 功能特性
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：S512.6
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