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一株乳杆菌烈性噬菌体的分离鉴定及其生物学特性的研究

习羽  
【摘要】:烈性噬菌体污染可导致发酵缓慢甚至失败,造成巨大的经济损失,是食品发酵行业存在的主要风险之一。本实验以分离自异常发酵液中乳杆菌烈性噬菌体P1为研究对象,对其生长特性、耐受能力、吸附特性、全基因组及灭活条件进行了研究分析。结果表明,噬菌体P1属于长尾科的B1型。该噬菌体的潜伏期为45min,裂解期为90min,裂解量平均为132.88±2.37 PFU。18株植物乳杆菌与噬菌体P1的菌株敏感性实验结果显示2株较敏感,5株明显敏感,该噬菌体显示出较强的特异性。不同的pH值(2-11)对宿主菌株Lactobacillus plantarum IMAU10120的生长增殖影响不显著,但对噬菌体P1的存活率有明显影响(P0.05),其在pH2.0时存活率为0,在pH6.0-10.0时可达95%以上。不同温度(0℃-50℃)对宿主菌株有明显影响(P0.05),其在30℃-50℃生长良好,而在0℃-20℃生长受到抑制。而温度变化对于噬菌体无明显影响(P0.05)。在0-50℃培养条件下,其存活率均为95%以上。理化因素对于噬菌体P1吸附能力的影响结果显示,不同pH值对噬菌体P1吸附能力有明显影响(P0.05),其在pH4-8表现出高吸附能力(吸附率90%),pH7.0时达到最高(吸附率96%)。随pH值的增加,其吸附能力下降,pH11.0时仅为8.33%。噬菌体P1的吸附能力受温度影响较小,除50℃外,其余温度下均可达到正常的吸附效果。此外,该噬菌体的吸附能力受二价阳离子影响较大(P0.05),Ca2+的存在可大幅提高其吸附率。细胞蛋白质合成抑制剂对其吸附能力无明显影响(P0.05)。传统商业杀菌剂对噬菌体P1的灭活效果显示,乙醇对噬菌体P1的灭活效果受浓度和处理时间的影响,其中100%的乙醇可达到最好的瞬时灭活效果,可使其减少4.7个对数级。但从灭活效果和经济效益出发,50%是最好的选择,可使噬菌体P1降低4.2个对数级。100%的异丙醇使其减少5个对数级的减少量,优于100%乙醇。用800ppm次氯酸钠处理60 min,可使噬菌体P1完全失活。过氧乙酸不能使P1迅速失活,0.45%对其处理60min,可使其下降3个对数级。本实验对乳杆菌烈性噬菌体P1进行了研究,丰富了乳酸菌噬菌体的资源,可为解释其相关侵染机制、培育抗性菌株,建立相关防御体系,减少经济损失提供一定的数据和理论支持。


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