收藏本站
《内蒙古农业大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用L-谷氨酰胺高产菌株产新型靛蓝色素的方法及条件优化

徐捷  
【摘要】:本研究首先通过分子克隆、大肠杆菌表达和蛋白纯化获得了BPSA蛋白,对BPSA蛋白进行动力学表征显示,测定其Km值和Kcat值。然后利用BPSA蛋白催化谷氨酰胺合成蓝色化合物indigoidine的特性构建了 L-谷氨酰胺高通量检测方法。以此为基础,成功构建了谷氨酰胺高产菌株的高通量筛选方法,为今后高产菌株的筛选和工业化生产提供理论基础。研究结果如下:动力学实验完成了BPSA蛋白的表征,其Km值为0.79±0.667mM,Kcat值为5.658mM。当发酵液中L-谷氨酰胺浓度在0.2mM至5mM时,可以通过该方法准确检测到L-谷氨酰胺的含量。本课题通过克隆及在谷氨酸棒杆菌中共表达bpsA和sfp基因,首次实现了在谷氨酸棒杆菌中生产新型靛蓝染料indigoidine。通过对L-谷氨酰胺的添加量(0、0.73、4.38、11.68)g/L、IPTG 添加量(0.1、0.2、0.4、0.8、1.5、2)mM、诱导时间(48、72)小时及诱导温度(18℃、25℃、30℃)的条件优化,最终确定,当L-谷氨酰胺添加为11.68g/L,IPTG浓度为0.8mM,18℃诱导48小时后indigoidine产量最高可达到 1.75g/L。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:Q78;Q936

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨斌;黄立新;何敏;刘斐;韦世录;;谷氨酰胺对运动员Th1/Th2细胞平衡影响的研究[J];现代预防医学;2012年03期
2 张艳;赵丽丽;仝其根;;辣椒红色素的提取与分离[J];北京工商大学学报(自然科学版);2011年06期
3 卢文彪;;运动应激后血浆谷氨酰胺的变化及机制分析[J];中国医药指南;2011年21期
4 王丽丽;张春晓;刘晓红;陈晓波;;青霉素高产菌株高通量检测和筛选方法的研究[J];中国抗生素杂志;2011年03期
5 钱帅伟;丁树哲;;补充谷氨酰胺对运动机体的生理功效研究[J];四川体育科学;2011年01期
6 柳欣欣;于健春;;免疫营养素应用于肿瘤治疗的研究进展[J];肠外与肠内营养;2010年03期
7 罗莉斯;李能威;李丽;郭伟群;郁建平;张晓琳;;96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的研究[J];中国农业科技导报;2010年02期
8 蒋宗勇;郑卫川;林映才;郑春田;黄琳;陈芳;;谷氨酰胺对新生仔猪生长性能、血清激素水平及小肠黏膜酶活性的影响[J];动物营养学报;2010年01期
9 崔艳华;张兰威;;谷氨酰胺转氨酶研究进展[J];生物技术通报;2009年01期
10 丁邦琴;邱鑫;周烽;;L-谷氨酰胺生化性质、用途及生产方法概述[J];氨基酸和生物资源;2008年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 陈群英;基因工程酶法结合酵母能量耦联高效合成L-谷氨酰胺的研究[D];南京师范大学;2004年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王兴吉;刘文龙;郭庆亮;张杰;;谷氨酰胺转氨酶发酵工艺优化及其酶学性质[J];安徽农业科学;2017年32期
2 陆怡;濮丽英;周利群;余齐鸣;;免疫营养在恶性肿瘤治疗中的研究现状及进展[J];现代肿瘤医学;2017年22期
3 原伟伟;王井亮;代兵;周圻;;小麦水解蛋白对早期断奶仔猪生产性能及肠道健康的影响[J];畜牧与兽医;2017年07期
4 李洪波;张君颜;李卿;张晶晶;史丽倩;赵琳;韩冉;于景华;;谷氨酰胺转氨酶在酸奶中的应用研究[J];安徽农业科学;2017年18期
5 敖翔;李元凤;范明东;何健;;谷氨酰胺在断奶仔猪上的应用及其机理的研究[J];养猪;2017年03期
6 李文华;黄永春;杨少彬;陈璐;;核糖体工程技术选育卡伍尔链霉菌高产菌株[J];中国农学通报;2017年07期
7 刘广宣;赵茜;隋月;关丁越;孙博;朱丹彤;齐先福;;5-氟尿嘧啶与肠外营养液配伍制剂的体外稳定性和体内抗肿瘤活性[J];山东医药;2016年44期
8 张雪喜;王存芳;王建民;;转谷氨酰胺酶对乳蛋白的作用机理及其应用进展[J];乳业科学与技术;2016年03期
9 金玮玥;宋明凯;矫文豪;江凌;李霜;徐娴;;常压室温等离子体诱变选育类胡萝卜素高产菌株及其性质研究[J];生物技术通报;2015年12期
10 王艳;熊毅敏;陈慧敏;袁方;徐维田;;三种免疫营养制剂在老年压疮防治中的应用比较[J];华南国防医学杂志;2015年09期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 徐捷;利用L-谷氨酰胺高产菌株产新型靛蓝色素的方法及条件优化[D];内蒙古农业大学;2017年
2 王霞;L-谷氨酰胺高产菌株的选育和发酵条件优化[D];江南大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张玲;高飞虎;尹旭敏;刁源;;辣椒红色素的提取及纯化技术研究进展[J];南方农业;2009年06期
2 刘慧娟;王丽丽;邓凯顺;仪宏;;青霉素酶在青霉素菌渣无害化处理中的应用[J];生物加工过程;2009年05期
3 俞璐;丁树哲;;运动中补充支链氨基酸对生理机能的有利效用[J];南京体育学院学报(自然科学版);2009年03期
4 徐唯;;运动导致IFN-γ/IL-4失衡与上呼吸道感染(URTI)[J];现代预防医学;2009年16期
5 王书平;刘俊华;;谷氨酰胺生理功能与应用研究进展[J];安徽农业科学;2009年22期
6 邵景景;赵桂红;钟乃良;;辣椒红色素的提取及除辣研究[J];食品研究与开发;2009年06期
7 李春;马维宁;;谷氨酰胺在肝硬化营养支持中的作用及应用[J];中国实用医药;2009年11期
8 陈瑾;周小秋;冯琳;;谷氨酰胺对动物肠道抗氧化能力的影响[J];饲料工业;2009年02期
9 唐智明;邓玉强;金其贯;;补充谷氨酰胺对过度训练大鼠肾脏滤过屏障形态结构和尿液成分的影响[J];西安体育学院学报;2009年01期
10 金其贯;王海军;李涛;单承湘;;过度训练对大鼠肠道细胞免疫功能的影响以及谷氨酰胺的干预作用[J];体育科学;2008年10期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026