抗新疆出血热病毒核蛋白单克隆抗体的制备及诊断应用

【摘要】： 利用经纯化的新疆出血热（XHF）病毒基因工程抗原XHF-NP免疫BALB/C鼠，经免疫效果检测后收集免疫鼠脾细胞，然后用化学助融剂聚乙二醇（PEG）将其与骨髓瘤细胞SP2/0融合，经过阳性克隆筛选和单细胞克隆化培养，得到10株抗新疆出血热病毒核蛋白单克隆抗体（McAb）。然后利用鼠单抗纯化试剂盒（HiTrap affinity columns）纯化上述单抗获得高纯度的单克隆抗体，再对纯化过的上述单抗作免疫球蛋白型和亚型的鉴定、特异性的鉴定和滴度的测定。经检测，10株上述单抗中，4株属于IgG1型，6株属于IgM型单抗；IgG型单抗可全部用于捕捉XHF病毒抗原，IgM型单抗不能全部用于捕捉XHF病毒抗原。通过实验发现：用收集小鼠腹水的途径可获得大量单抗。鉴于2001年新疆巴楚县XHF的严重疫情，我们利用已建立的实验室诊断方法对疫区内病人血清、正常人血清和羊群血清进行了XHF特异性IgG抗体、IgM抗体、XHF病毒抗原以及XHF病毒核酸的检测。结果发现该疫区农牧民中XHF抗体（IgG、IgM）水平较高，并且在正常人群和羊群中普遍存在着XHF的隐性感染；利用自制的抗XHF-NP单抗建立的抗原捕获ELISA方法可以捕捉到急性期病人血液中的XHF病毒抗原。通过检索Genebank中XHFV核蛋白基因序列设计特异性引物，利用RT-PCR方法从急性期病人血液中检测到了XHFV核酸。通过比较发现上述几种方法用于血清流行病学调查，其结果具有高度一致性，进而说明上述方法具有较好的实用性，为下一步在更大范围内开展XHF流行病学调查做了方法上的有益探索。

【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：S852.4

下载全文更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

	【参考文献】
	【参考文献】

中国期刊全文数据库

前9条

1	冯崇慧，李凡，白旭华，刘振东，刘宏斌，张峰;伊犁河谷边境地区新疆出血热的调查[J];地方病通报;1994年03期
2	于心，叶瑞玉;新疆蜱类与疾病关系的研究（摘要）[J];地方病通报;1996年04期
3	马本江,唐青;克里米亚-刚果出血热的流行病学[J];国外医学(流行病学传染病学分册);1999年04期
4	邵锡如，拉雅，薛伟建，成鹰，汪孝元，王建青，张晶，覆春花;青海省查出新疆出血热自然疫源地[J];青海医药杂志;1995年03期
5	唐青,C.Prehaud,M.Bouloy,冯崇慧,赵秀芹,陈化新,杨为松;新疆出血热病毒S基因片段的测序和分析[J];中华微生物学和免疫学杂志;1999年06期
6	祁继深,陈玉本,吴纪经,王敏,陈文洲,冯崇慧,陈化新;海南省首次从牛血清检出克里米亚-刚果出血热病毒IgG抗体[J];中国媒介生物学及控制杂志;1995年02期
7	白旭华，张峰，;新疆出血热北疆株单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[J];中国媒介生物学及控制杂志;1996年02期
8	蔡增林，鲁志新，胡玲美，金显涛，何亦祥;东北部份地区人血清检出新疆出血热病毒抗体[J];中国人兽共患病杂志;1994年05期
9	赵春生，蒋廉华，陈维军，陆振豸;海南省部分地区人血清中新疆出血热病毒抗体的调查[J];中国人兽共患病杂志;1996年04期

	【共引文献】
	【共引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	朱启星;马泰;涂登云;沈彤;丁锐;;银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞NO合成的影响[J];癌变.畸变.突变;2006年06期
2	刘家仁,庞永珣,张尤恩,范春,王贤珍,朱振岗;用细胞转化实验检测S江有机污染致癌危险性[J];癌变.畸变.突变;1999年04期
3	连京华,秦卓明,黄波;鸡传染性支气管炎研究进展[J];山东农业科学;2000年01期
4	钱凤芹,刘长梅,任红梅,李爱芹,庄文忠;鸡新城疫病毒山东分离株F蛋白基因的克隆与鉴定[J];山东农业科学;2001年03期
5	东野传现;史玉颖;黄中利;刘玉山;亓丽红;傅剑;;“禽喘康颗粒冲剂”对鸡人工感染新城疫病毒临床效果的研究[J];山东农业科学;2007年02期
6	李子剑;李云龙;陈苏;艾武;宋敏训;李玉峰;;鸭肠炎病毒US2基因的序列测定与分析[J];山东农业科学;2008年03期
7	李祥辉;黄大鹏;黄玉兰;;鸡抗小鹅瘟病毒IgY提取方法的比较试验[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年23期
8	张小飞,潘孝成,汪秀娟,赵瑞宏,蒋书东;绩溪县浩寨兔病毒性出血症的诊断[J];安徽农业科学;2002年02期
9	沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡传染性法氏囊病病毒冻干保护剂热稳定性研究[J];安徽农业科学;2004年01期
10	沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡新城疫病毒耐热冻干保护剂的研究[J];安徽农业科学;2004年02期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	庄金秋;梅建国;沈志强;;赤羽病病毒检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2	庄金秋;梅建国;沈志强;;犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3	蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4	陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5	刘俊;赵荣祥;丛品;洪钱江;;哺乳动物内耳再生毛细胞前体细胞来源的研究[A];中华中医药学会耳鼻喉科分会第15届学术交流会论文集[C];2009年
6	王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集（下册）[C];2011年
7	冯婷;涂文伟;黄娟;李晋蓉;殷仲伟;范营营;李虹;;流感病毒H1N1在MDCK细胞的培养及纯化条件的优化[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
8	程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
9	赵东升;盖新娜;孙栋;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎灭活疫苗的制备及小鼠免疫研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
10	方忠意;崔保安;;动物基因工程疫苗研究进展[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2	赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
3	刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
4	张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
5	宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6	黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
7	张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
8	熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
9	莫雪安;同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠模型的实验研究[D];广西医科大学;2011年
10	孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2	李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
3	徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
4	胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
5	许莹;H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究[D];南京医科大学;2010年
6	费晶晶;两个家蚕FKBP12基因的研究[D];浙江理工大学;2010年
7	邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
8	张静;恩诺沙星化学发光酶免疫分析方法研究[D];郑州大学;2010年
9	史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
10	巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年

	【二级参考文献】
	【二级参考文献】

中国期刊全文数据库

前8条

1	刘尔翔;细胞融合——淋巴细胞杂交瘤[J];北京医学;1980年04期
2	冯崇慧,白旭华,王冬莉,钟克菲,顾媛,刘宏斌;分泌抗新疆出血热病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[J];地方病通报;1987年04期
3	冯崇慧,白旭华,刘宏斌,李凡,顾媛;新疆准噶尔盆地南缘地区新疆出血热病毒自然疫源地的发现[J];地方病通报;1991年01期
4	于心,叶瑞玉,张自建,陈欣如;新疆博尔塔拉和伊犁地区蜱类区系考察[J];地方病通报;1993年02期
5	刘金华，黄佳亮;海南岛小兽类寄生蜱的群落结构[J];动物学研究;1994年04期
6	陈化新,唐家权,刘蓉晖,任艺,王惠民,拉雅,陈孝忠,阿祥,赵丹生,毛兴海,马名录,王志刚,道尔吉,卫东,冯崇慧,刘宏斌,丘福禧;首次从青海省绵羊血清中检出新疆出血热病毒IgG抗体[J];中国媒介生物学及控制杂志;1991年04期
7	屠云人,张佳珂,阎侗有,张灵麟,金兆伟,刘学成,赖文红,张尚贵;四川省新疆出血热血清流行病学研究[J];中国媒介生物学及控制杂志;1992年06期
8	蔡增林，鲁志新，胡玲美，金显涛，何亦祥;东北部分地区人血清检出新疆出血热病毒抗体[J];中国公共卫生学报;1994年03期

	【相似文献】
	【相似文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	冯崇慧,王冬莉,顾媛,刘银;新疆出血热病毒的酶联免疫吸附试验[J];现代免疫学;1986年04期
2	曹温年;许磊;;一起鸭“暴死病”的病原及血清流行病学调查[J];家禽科学;1987年01期
3	马本江,杭长寿,赵云,王世文,解燕乡;新疆出血热病毒糖蛋白基因的克隆与表达[J];病毒学报;2002年03期
4	朱晓光;杨银辉;祝庆余;;新疆出血热病毒的研究进展[J];微生物学免疫学进展;2005年04期
5	唐青,C.Prehaud,M.Bouloy,冯崇慧,赵秀芹,陈化新,杨为松;新疆出血热病毒S基因片段的测序和分析[J];中华微生物学和免疫学杂志;1999年06期
6	孙柱臣,李文惠,王维新;新疆出血热精制提纯灭活鼠脑疫苗注射100名人体反应观察[J];地方病通报;2004年S1期
7	李文惠,孙柱臣,王维新;新疆出血热疫苗效果初步观察总结报告[J];地方病通报;2004年S1期
8	陈筱侠;;亚洲猴类中登革热和日本脑炎病毒的血清流行病学调查[J];实验动物与比较医学;1986年04期
9	冯崇慧;新疆出血热病毒灭活疫苗的试制与检定[J];地方病通报;2004年S1期
10	孙柱臣;新疆出血热病原体的生物学及免疫学特性的探讨[J];地方病通报;2004年S1期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	方新民;邓永芳;董晓薇;;宁夏回族自治区弓形虫感染的血清流行病学调查[A];中国动物学会第八次全国寄生虫学学术讨论会论文摘要汇编[C];2001年
2	王琼秋;刘伯庶;张荣华;张凤英;;云南省红河州猪繁殖障碍性疫病的血清流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（下册）[C];2009年
3	刘善超;刘群;张维;刘晶;;北京地区犬新孢子虫病和弓形虫病的血清流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
4	李林红;张彦平;唐青;赵秀芹;陶晓霞;西条政幸;;河南省新疆出血热血清流行病学调查[A];河南省预防医学会人兽共患病专业委员会首届学术研讨会论文汇编[C];2003年
5	尹爱红;傅继华;王玫;王少军;王玉露;苏生利;康殿民;;山东省乙肝疫苗接种率及HBVM血清流行病学调查[A];山东预防医学会首届学术年会资料汇编[C];2003年
6	杨莲茹;关平原;杨晓野;王建国;禹旺盛;王志;旭日干;;舍饲绒山羊布鲁氏菌病和蓝舌病血清流行病学调查[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
7	石玉玲;李林海;陈清;楚心唯;王云龙;马清钧;曹诚;俞守义;;不同地区人群SARS血清流行病学调查[A];第十届全军检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
8	屈勇刚;朱启;杨志军;王东;王远志;万康林;;新疆地区牛羊莱姆病血清流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
9	沈婷;周斌;;检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年
10	车骝强;;青海省少数民族输血相关传染病的流行病学调查[A];第九届西北五省（区）检验医学学术会议论文汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	记者楚燕通讯员陈敏苏成豪陈贇;厦门儿童乙肝携带率下降94.19%[N];厦门日报;2008年
2	嵇旭东魏林玲;应重视丙肝的防治[N];家庭医生报;2007年
3	王苏平;健康成人要重视接种乙肝疫苗[N];健康报;2008年
4	王振岭;中药预防治疗肝纤维化研究取得进展[N];保健时报;2005年
5	记者　于濛;保驾中西部乙肝免疫[N];中国财经报;2006年
6	记者　李星　胡苏;中国将全面调查乙肝流行现状[N];新华每日电讯;2006年
7	萧景丹;丙肝治疗必须规范化个体化[N];健康报;2008年
8	河北远征药业　秦建华;猪细小病毒病诊断与预防[N];中国畜牧兽医报;2006年
9	晓白;丙肝：“沉默的杀手”[N];人民日报;2007年
10	黄显斌;乙肝病毒携带率14年下降26.36%[N];大众卫生报;2008年

中国博士学位论文全文数据库

前6条

1	何方平;人类8型疱疹病毒组合抗原血清检测方法的建立及新疆地区流行病学调查[D];新疆医科大学;2006年
2	徐耀辉;我国部分地区鸡群沙门氏菌感染的血清流行病学调查和抑制性差减杂交法筛选鸡白痢沙门氏菌特异性核酸序列[D];扬州大学;2005年
3	宋彪;四种商品化HSV-2型特异性IgG抗体检测试剂盒的评价及其在流行病学中的应用[D];中国协和医科大学;2004年
4	马勋;新疆猪戊型肝炎的血清流行病学调查及病毒的基因型分析[D];南京农业大学;2004年
5	贾娜;人感染高致病性禽流感病毒A（H5N1）体液和细胞免疫状况调查研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
6	刘建华;复杂抽样小区域估计量的应用分析[D];中国疾病预防控制中心;2008年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	韩磊;抗新疆出血热病毒核蛋白单克隆抗体的制备及诊断应用[D];内蒙古农业大学;2002年
2	赵晓冬;新疆出血热病毒感染乳鼠的实验病理学研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3	邱蜜蜜;猪戊型肝炎血清流行病学调查及病原检测方法的建立[D];吉林大学;2009年
4	张嗣华;海南省规模化猪场主要呼吸道病原的血清流行病学调查及猪呼吸道综合征的防制[D];华中农业大学;2007年
5	何志强;苏州市居民乙型肝炎血清流行病学调查[D];苏州大学;2008年
6	杜国明;张家港市人群乙型肝炎血清流行病学调查[D];苏州大学;2008年
7	周丽鸿;安徽省皖江部分地区自然人群乙型肝炎流行现况[D];安徽医科大学;2009年
8	苏成豪;疫苗时代厦门市人群乙型肝炎流行特征及其影响因素研究[D];福建医科大学;2007年
9	何之恒;卡波氏肉瘤相关人类疱疹病毒的流行病学调查及抗潜伏性感染药物筛选模型的建立[D];中国科学院研究生院（武汉病毒研究所）;2007年
10	李春;猪流感病毒的分离鉴定和猪流感血清流行病学调查[D];华中农业大学;2007年

	快捷付款方式		订购知网充值卡	订购热线	帮助中心
	微信支付支付宝银行卡	知网卡神州行卡更多>>	免费送卡上门银行汇款购卡邮局汇款购卡	400-819-9993 010-62791813 010-62985026	常见问题在线咨询阅读器下载	充值中心知网卡新手指南