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《内蒙古农业大学》 2003年
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J亚群禽白血病病毒内蒙株的分离鉴定及其部分分子生物学特性的研究

杨玉莹  
【摘要】: 本研究从曾见典型ML病例的内蒙古某肉种鸡场淘汰肉种鸡和山东一例骨髓性白血病(Myeloid Leukosis,ML)肉种鸡病例中,分离出两株J亚群禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus Subgroup J,ALV-J)。利用PCR和间接免疫荧光反应进行鉴定,两株J亚群禽白血病病毒可以被两对ALV-J特异性引物扩增(特异条带约2.2kb和545bp),且在特异性单克隆抗体JE9的间接免疫荧光检测中呈现强阳性荧光反应。负染色电子显微镜和免疫电子显微镜观察显示,两株ALV-J具有禽白血病病毒的典型形态特征,分别命名为J亚群禽白血病病毒IMC_(10200)株和SDC_(2000)株。将分离毒株回归感染肉鸡,21周龄时特异性引物PCR抽查检测,抽查感染鸡全部为阳性;42周龄后出现典型ML病例。 分离毒株囊膜基因和3′端非编码区测序分析表明,ALV-J IMC_(10200)株和SDC_(2000)株此段DNA的同源性为97.1%。将囊膜基因翻译为氨基酸序列,两株病毒囊膜前体蛋白氨基酸序列达99%,分子量分别为56658.60 dalton、56704.58 dalton;与国内ALV-JSD_(9901)和YZ9901株同源性达93.7%~96.2%,与原型株HPRS-103有89.9%/91.2%的同源性。生物进化树分析显示,在已发表ALV-J毒株中IMC_(10200)株和SDC_(2000)株的变异幅度位于ADOL-R5-4株和1696株之间。IMC_(10200)株和SDC_(2000)株env变异主要发生在gp85的hr1和hr2区,并在囊膜前体蛋白氨基酸序列169位Jameson-Worlf抗原表位优势显著升高,有可能产生新的潜在抗原位点。3′端非编码区内,两株病毒rTM和E组分不同程度缺失。 对ALV-J IMC_(10200)株囊膜基因和3′端非编码区进行克隆,并以克隆的重组质粒pGEM-IMC2.2为模板进一步扩增克隆IMC_(10200)株gp85基因。研究中采用Bac-to-Bac杆状病毒真核表达系统(非融合蛋白性表达载体pFastBacl)在Sf9细胞中表达了IMC_(10200)株gp85基因。表达物拥有ALV-J病毒的抗原特异性,与ALV-J JE9单克隆抗体有强的间接免疫荧光反应。Western blotting结果分析表明,表达物分子量约54kD。 为深入探讨ALV-J的亚群特性,本研究利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引,物从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。肉鸡和DF1细胞内源性类ALV-J gp85基因同源性达99.9%;SPF蛋鸡内源性类ALV-J gp85基因与肉鸡和DF1细胞的内源性类ALV-J gp85基因之间同源性达95.6%、95.3%。三种不同来源的内源性类ALV-J gp85基因DNA与IMC_(10200)株ALV-J的gp85基因的同源性分别为91.8%、94.1%、94.0%;与ALV-J原型株HPRS-103 gp85基因的同源性分别为95.6%、98.3%、99.9%。内源性类ALV-J gp85序列与外源性ALV-J gp85基因具有相似或一致的ORF和Jameson-Worlf抗原表位优势。这一结果显示了J 亚群ALV与宿主内源性反录病毒的密切关系。 J亚群禽白血病病毒IMC1020。株和 SDC20*株的分离鉴定、IMC1020。株gP8)基因 表达以及内源性类 ALVJ gp8)基因的研究与分析,为深入了解 ALVJ的生物学特性、 致病机理等奠定了基础,也对开展我国ALVJ的诊断和预防有着重要的现实意义。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 顾玉芳,杨玉莹,赵振华,王金铃;IMC_(10200)株ALV-J实验诱发禽骨髓性白血病的研究[J];中国预防兽医学报;2004年04期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
2 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
3 陈浩;致急性纤维肉瘤的缺陷型J亚群禽白血病病毒肿瘤基因的鉴定[D];山东农业大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 朱美真;山东某地方品系鸡鸡胚中禽白血病病毒的分离及序列分析[D];山东农业大学;2010年
2 王金玲;J亚型禽白血病病毒内蒙株IMC_(10200)的致病性研究[D];内蒙古农业大学;2004年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 秦爱建,崔冶中,Lucy Lee,Aly Fadly;禽白血病病毒J亚群囊膜蛋白env基因的克隆和表达[J];病毒学报;2001年01期
2 赵振华,顾玉芳,王凤龙,郝永清,佟程浩,王海燕,曹鸿国,赵满达;禽骨髓细胞瘤病的病理学研究(初报)[J];动物医学进展;1999年03期
3 秦爱建,崔治中;应用亲和层析法提纯鸡马立克氏病病毒pp38基因重组产物[J];生物工程学报;1994年03期
4 杨玉莹,叶建强,赵振华,秦爱建,顾玉芳;禽白血病病毒J亚群内蒙株的分离与鉴定[J];中国病毒学;2003年05期
5 赵振华,成子强,顾玉芳,郝永清,杨玉莹,王海燕,高娃,张二芹;禽骨髓细胞瘤病自然病例的病理学研究[J];中国兽医科技;2002年10期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
3 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
4 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
5 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
6 毕玉平,廖俊杰,单雷,王兴军,徐平丽;番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究[J];山东农业科学;1997年06期
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8 葛宏华,孙莉宁,张其瑞;家蚕血淋巴蛋白的发育变化和BmLSP的纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2001年03期
9 张任娜;覃志初;帅领;刘晓燕;王豪举;;鸭瘟病毒的分离与鉴定[J];安徽农学通报;2007年20期
10 王北艳;曹宁;汤晖;;苜蓿中华根瘤菌电转条件的优化[J];安徽农学通报;2008年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
2 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
3 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
4 商庆龙;谷鸿喜;;HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
5 陈振文;赵太云;孙贺娟;路静;王迎;孟霞;曹争和;王钜;;微卫星DNA与生化标记分析对长爪沙鼠群体遗传分析的比较[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
6 王革;王妍;何凌冰;乔刚;朱一松;王君艳;;酵母分泌表达重组人神经生长因子[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
7 刘欣晏;冯卫国;吴春涛;;牛传染性鼻气管炎病的研究进展[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
8 彭军;李顺成;王树明;牛钟相;;孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
9 沈美艳;崔宝玉;牛钟相;朱瑞良;张广斌;;ELISA双抗体夹心法检测鸡传染性腺胃炎[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
10 任华;顾建华;孙竹筠;沈万赟;吴鹰;周忠良;;RT-PCR法检测斑马鱼(Danio rerio)卵黄蛋白原mRNA表达[A];2005年上海市动物学会学术会议论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
3 姚美玲;H9N2亚型禽流感病毒气溶胶发生与传染机制及其感染SPF鸡的特点[D];山东农业大学;2010年
4 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
5 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
6 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
7 任艳;牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D];石河子大学;2010年
8 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
9 魏朝明;中国螽(虫斯)总科昆虫的RAPD分析研究[D];陕西师范大学;2000年
10 贾永清;表达禽流感病毒HA基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究[D];东北农业大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘功振;禽白血病病毒J亚群、B亚群的分离鉴定及核酸探针的制备[D];山东农业大学;2010年
2 孙洪磊;整合禽网状内皮组织增生病病毒基因的鸡痘病毒分子生物学鉴定及致病机理研究[D];山东农业大学;2010年
3 邱波;血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2010年
4 朱美真;山东某地方品系鸡鸡胚中禽白血病病毒的分离及序列分析[D];山东农业大学;2010年
5 申卫红;犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其重组蛋白的抗原性研究[D];新疆农业大学;2010年
6 王若;口蹄疫病毒结构蛋白VP4基因的真核表达[D];河北农业大学;2010年
7 尹青;蛋用型鸡禽白血病的病毒感染动态及病理学研究[D];山东农业大学;2011年
8 张振杰;皖南黄肉种鸡ALV-J与REV的共感染及其分子变异分析[D];山东农业大学;2011年
9 陈洪博;DF-1细胞分泌的外源体(Exosomes)在ALV-J免疫抑制中的作用[D];山东农业大学;2011年
10 贾园;甲型H1N1流感病毒HA重组蛋白的表达及鉴定[D];吉林农业大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜岩,崔治中,秦爱建,RFSilva,LFLee;鸡的J亚群白血病病毒的分离及部分序列比较[J];病毒学报;2000年04期
2 徐镔蕊,董卫星,余春明,Lucy F.Lee;蛋鸡J亚群禽白血病的分子生物学诊断[J];病毒学报;2005年04期
3 李艳;崔治中;孙淑红;;黄羽肉鸡J亚群白血病病毒的分子生物学特性和致病性[J];病毒学报;2007年03期
4 孔义波;张兴晓;姜世金;赵钦;孙亚妮;;SPF鸡胚中内源性白血病病毒全基因序列鉴定与分析[J];病毒学报;2008年01期
5 王辉;崔治中;;蛋鸡J亚群白血病病毒的分离鉴定及序列分析[J];病毒学报;2008年05期
6 赵冬敏;张青婵;崔治中;;芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定[J];病毒学报;2010年01期
7 梁雄燕;杨玉莹;张莹;钟蓓;;内源性禽白血病病毒ev/J gp85基因的表达[J];长江大学学报(自然科学版)农学卷;2009年01期
8 柴家前;王贵强;孙淑红;郭慧君;崔治中;;J亚群禽白血病病毒分子流行病学研究进展[J];山东畜牧兽医;2009年01期
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10 赵振华,顾玉芳,王凤龙,郝永清,佟程浩,王海燕,曹鸿国,赵满达;禽骨髓细胞瘤病的病理学研究(初报)[J];动物医学进展;1999年03期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 曹丙蕾;山羊IL-18定量抗原捕获ELISA检测方法的建立及其免疫增强作用的研究[D];山东农业大学;2010年
2 成子强;禽白血病病毒J亚群(ALV-J)内蒙株的建立及致瘤机理的研究[D];内蒙古农业大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 童淑梅;鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及表达[D];内蒙古农业大学;2007年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨玉莹;顾玉芳;王金玲;;实验感染肉鸡组织中J亚群禽白血病病毒的抗原定位[J];长江大学学报(自科版)农学卷;2006年03期
2 顾玉芳,赵振华,杨玉莹;J亚群禽白血病骨髓组织与外周血病理学研究[J];动物医学进展;2005年03期
3 冯少珍;李娇;吴晓婵;曹伟胜;廖明;;不同亚群禽白血病病毒5′LTR序列及启动子活性分析[J];中国畜牧兽医;2011年08期
4 顾玉芳;杨玉莹;梁雄燕;吴岳;;J亚群禽白血病病毒引发蛋鸡多种肿瘤类型的病理分析[J];中国畜牧兽医;2011年10期
5 陈国强;刁富花;;J亚群禽白血病病毒套式PCR检测方法的建立[J];中国畜牧兽医;2012年12期
6 顾玉芳;杨玉莹;钟蓓;;蛋鸡J亚群禽白血病与马立克氏病混合感染的病理学诊断[J];湖北农业科学;2011年24期
7 杨玉莹;顾玉芳;王金玲;;实验感染肉鸡组织中J亚群禽白血病病毒的抗原定位[J];长江大学学报(自科版);2006年08期
8 张恒;李传龙;杨明;崔治中;;禽白血病A亚群病毒gp85的单因子血清制备及其特异性鉴定[J];微生物学报;2011年01期
9 尹念春;;J亚群禽白血病病毒的分子生物学研究进展[J];中国动物检疫;2012年04期
10 常维山;孙静;王秀玲;张万福;;近年来我国鸡肾脏疾病的流行现状与防治对策[J];中国家禽;2011年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张在平;荧光定量PCR检测禽白血病病毒与RNA干扰抑制J亚群禽白血病病毒复制的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 倪伟;山东部分地区祖代、父母代、商品代蛋鸡群禽白血病流行病学调查及病毒分离鉴定[D];山东农业大学;2011年
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4 童淑梅;鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及表达[D];内蒙古农业大学;2007年
5 孔义波;源自SPF鸡群内源性ALV/SD0501全基因序列鉴定分析及感染性分子克隆pSD0501的构建[D];山东农业大学;2008年
6 朱钰峰;地方品系蛋鸡群中禽白血病病毒的鉴定和J亚群禽白血病病毒受体蛋白的分离[D];扬州大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 赵振华,顾玉芳,王凤龙,郝永清,佟程浩,王海燕,曹鸿国,赵满达;禽骨髓细胞瘤病的病理学研究(初报)[J];动物医学进展;1999年03期
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7 赵振华,成子强,顾玉芳,郝永清,杨玉莹,王海燕,高娃,张二芹;禽骨髓细胞瘤病自然病例的病理学研究[J];中国兽医科技;2002年10期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 成子强;哈斯阿古拉;赵振华;;禽骨髓细胞瘤病病毒NM0138株gp85基因的分子克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十一次兽医病理学、第十次动物病理生理学学术研讨会论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张志,崔治中,赵宏坤;我国2000~2001年J亚群禽白血病病毒分离株gp85基因的序列比较[J];中国兽医学报;2003年01期
2 杜岩,崔治中;J亚群禽白血病病毒中国分离毒SD9902株env-gp85基因的克隆及表达[J];中国兽医学报;2002年01期
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4 DrkongSonchiu,周剑峰;禽白血病病毒J亚群[J];山东家禽;1999年05期
5 杨玉莹,叶建强,赵振华,秦爱建,顾玉芳;禽白血病病毒J亚群内蒙株的分离与鉴定[J];中国病毒学;2003年05期
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7 秦爱建,LEE LUCY;禽白血病病毒J亚群重组囊膜蛋白基因的表达效果[J];中国兽医学报;2001年05期
8 乔彦华;王永强;庞平;金铮;陈福勇;;A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析[J];中国兽医杂志;2008年12期
9 杨玉莹;J亚群禽白血病病毒研究进展[J];中国病毒学;2003年01期
10 付朝阳,宋素泉,高宏雷,王笑梅,王英,张厚双,郭燕,童光志;J亚群禽白血病病毒Hrb-1和JL-2株囊膜基因的克隆及遗传分析[J];中国兽医科技;2003年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张爱玲;韦平;李斌;李康然;;广西禽白血病病毒流行毒株的分子鉴定和分型研究[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
2 秦爱建;刘岳龙;金文杰;Lucy LEE;Aly FADLY;;禽白血病病毒J亚群env基因产物的抗原性分析[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
3 初芹;张剑;王改利;刘华贵;;鸡白血病研究进展及种群净化[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年
4 秦爱建;崔治中;LEE LUCY;FADLY ALY;;抗J亚群禽白血病病毒囊膜糖蛋白特异性单克隆抗体的研制及其特性[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
5 成子强;哈斯阿古拉;赵振华;;禽骨髓细胞瘤病病毒NM0138株gp85基因的分子克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十一次兽医病理学、第十次动物病理生理学学术研讨会论文集[C];2001年
6 潘伟;高玉龙;秦立廷;祁小乐;高宏雷;孙芬芬;王永强;邓晓芸;王笑梅;;蛋鸡J亚群禽白血病病毒HLJ09MDJ-1株的分离鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
7 秦爱建;刘岳龙;金文杰;;禽白血病病毒J亚群env基因产物的抗原性分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
8 宋素泉;付朝阳;高宏雷;王笑梅;王英;张厚双;;J亚群禽白血病病毒株Hrb-1 gp85基因杆状病毒表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨玉莹;J亚群禽白血病病毒内蒙株的分离鉴定及其部分分子生物学特性的研究[D];内蒙古农业大学;2003年
2 付朝阳;J亚群禽白血病病毒分离株变异分析及重组抗原ELISA检测方法的建立[D];中国农业科学院;2004年
3 成子强;禽白血病病毒J亚群(ALV-J)内蒙株的建立及致瘤机理的研究[D];内蒙古农业大学;2002年
4 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
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6 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
7 张在平;荧光定量PCR检测禽白血病病毒与RNA干扰抑制J亚群禽白血病病毒复制的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
8 吴晓平;商品蛋鸡源J亚群禽白血病病毒分离株生物学特性研究[D];扬州大学;2010年
9 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
10 邓小芸;网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立[D];东北农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋素泉;J亚型禽白血病JL-2株病毒的分离鉴定及gp85基因的克隆与表达[D];东北农业大学;2004年
2 余春明;蛋用型鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因克隆及表达载体的构建[D];中国农业大学;2004年
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4 吴永平;中国株J亚群禽白血病病毒全基因组序列的测定与分析[D];山东农业大学;2004年
5 赵力;禽白血病病毒重庆株的分子鉴定及其p27基因在原核细胞中的表达[D];西南大学;2008年
6 高娃;实验性禽骨髓细胞瘤病病理学及免疫状态的研究[D];内蒙古农业大学;2002年
7 朱美真;山东某地方品系鸡鸡胚中禽白血病病毒的分离及序列分析[D];山东农业大学;2010年
8 张悦;禽白血病病毒B、E和J亚群基因芯片检测方法的建立[D];河北农业大学;2012年
9 石文慧;禽B型白血病病毒生物学特性的分析及研究[D];河北农业大学;2010年
10 朱钰峰;地方品系蛋鸡群中禽白血病病毒的鉴定和J亚群禽白血病病毒受体蛋白的分离[D];扬州大学;2011年
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