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《内蒙古农业大学》 2007年
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内蒙古地区牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定

张鹏飞  
【摘要】: 本试验从内蒙古自治区6个地区的奶牛场和奶牛养殖户采集了429份牛血清,并对这些血清利用酶联免疫吸附试验试剂盒进行牛传染性鼻气管炎(IBR)检测。结果显示,在所调查地区的奶牛群中存在着不同程度的牛传染性鼻气管炎病毒感染(IBRV),最高感染率达92.00%,最低的仅为2.78%,平均感染率为46.62%。 从呼和浩特地区采集了14份疑似IBR的病料,将这些病料利用PCR法进行IBRV检测,有4份病料扩增出了IBRV的特异性片段(339bp)。将4份病料处理后接种犊牛睾丸细胞传代培养,分离病毒,在盲传到第7代时,接种采自疑似IBR流产胎牛实质脏器病料的细胞出现圆缩、聚集成葡萄样群落、在单层细胞上形成空洞、有时会发现有数个细胞核的巨大细胞、在48~72h即完全出现病变并脱落等病变,且随着传代次数的增加,CPE更加规律。而其余三份病料接种细胞后均未分离到病毒。将病毒一直传代到第11代,然后对所分离病毒进行TCID50测定、理化特性鉴定、血清中和试验以及PCR鉴定。结果为:分离株病毒在接种量为100μl/孔时,测定的TCID50值为10-6.75/100μl,而在接种量为20μl/孔时,测定的TCID50值为10-3.375/20μl;分离病毒对乙醚、氯仿和胰蛋白酶敏感,不耐酸碱;所分离病毒可被IBRV阳性血清中和,中和抗体滴度为2-8.1;分离株用IBRV特异性引物经PCR扩增出了其gB基因的高保守区(339bp)。以上试验证实本试验所分离到的病毒IBRV。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 董华兴;检测牛传染性鼻气管炎抗体间接ELISA方法的建立及应用[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
2 白春艳;牛传染性鼻气管炎病毒内蒙古分离株gE、gI、gG及gN基因的克隆和序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 唐泰山;王凯民;邓碧华;张常印;雷治海;;1株牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定[J];动物医学进展;2006年06期
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4 张俊育,王秀建,王宏,贾延明;某农场受体牛血清中牛传染性鼻气管炎抗体检测[J];黑龙江畜牧兽医;1995年11期
5 李继昌,于少军,刘忠贵;牛传染性鼻气管炎病的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2002年04期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李继昌;牛传染性鼻气管炎重组疫苗的基础研究[D];东北农业大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 张灵君;牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定与巢式-PCR诊断方法的建立[D];山东农业大学;2005年
2 罗云;羊传染性脓疱病毒生物学特性及PCR检测方法的研究[D];内蒙古农业大学;2006年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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6 张小飞,潘孝成,汪秀娟,赵瑞宏,蒋书东;绩溪县浩寨兔病毒性出血症的诊断[J];安徽农业科学;2002年02期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 庄金秋;梅建国;沈志强;;犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
6 程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
7 赵东升;盖新娜;孙栋;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎灭活疫苗的制备及小鼠免疫研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
8 方忠意;崔保安;;动物基因工程疫苗研究进展[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
9 曾政;任远志;叶昭辉;凌洪权;杨泽林;熊仲良;;重庆市2009年犬狂犬病检测及流行病学调查[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
10 薛传华;何林;赵志模;;朱砂叶螨β-actin基因cDNA片段的克隆及实时荧光定量PCR方法的建立[A];庆祝重庆市植物保护学会成立10周年暨植保科技论坛论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
3 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
4 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
5 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
7 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
9 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
10 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 定明;牛传染性鼻气管炎TK/gE基因缺失重组病毒的研究[D];华中农业大学;2010年
2 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
3 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
4 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
5 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
6 许莹;H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究[D];南京医科大学;2010年
7 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
8 史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
9 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
10 裴兰英;HSP_(70)与MDV肿瘤的发生发展相关性研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李继昌,鲁成武,殷会成;Ⅰ型牛疱疹病毒活载体疫苗的构建及研究进展[J];东北农业大学学报;2004年03期
2 徐守振,崔言顺,张俊龙;牛传染性鼻气管炎病原及其疫苗的研究进展[J];山东畜牧兽医;2001年04期
3 阎高峰,李健强,张君;牛疱疹病毒型gE基因缺失株的构建和特性研究[J];动物医学进展;2000年01期
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6 唐泰山;邓碧华;王凯民;张常印;雷治海;;牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];动物医学进展;2009年04期
7 程国富,陈毓川,苏雄,徐珊;间接血凝试验检测抗传染性牛鼻气管炎病毒的单克隆抗体[J];湖北农业科学;1996年02期
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9 李继昌,于少军,刘忠贵;牛传染性鼻气管炎病的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2002年04期
10 吴胜耀,鲁哲,丁亚军,苗红,罗长松;河南省首例牛传染性鼻气管炎防治体会[J];河南畜牧兽医;2004年11期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 李继昌;牛传染性鼻气管炎重组疫苗的基础研究[D];东北农业大学;2002年
2 王海燕;IBR间接ELISA的建立及重组gE糖蛋白与单抗的研制[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 张灵君;牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定与巢式-PCR诊断方法的建立[D];山东农业大学;2005年
2 吴春涛;牛疱疹病毒Ⅰ型重组抗原的制备及间接ELISA方法的建立[D];山东农业大学;2006年
3 李兆利;牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白的分段表达与间接ELISA诊断方法的建立及应用[D];中国农业科学院;2006年
4 李伟;IBRV截短gB基因的表达及ELISA诊断方法的建立[D];吉林大学;2009年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 谢飞;牛疱疹病毒5型糖蛋白基因gG功能研究[D];华中农业大学;2011年
【二级参考文献】
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1 徐守振,崔言顺,张俊龙;牛传染性鼻气管炎病原及其疫苗的研究进展[J];山东畜牧兽医;2001年04期
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5 王志军;羊传染性脓疱病的诊断和防治[J];河南畜牧兽医;1999年01期
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8 高其栋;;牛传染性鼻气管炎[J];青海畜牧兽医杂志;1988年02期
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【相似文献】
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1 范能全;;刺五加注射液致敏物质检测及去除方法[J];重庆师范大学学报(自然科学版);2011年01期
2 H.Samak’e,喻启桂;抗癌胚抗原单克隆抗体的产生及其在酶联免疫吸附试验中的应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1987年02期
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5 张荣波,王克霞,王健,张宁;ELISA和PCR法在研究乙肝病毒传播途径中的应用[J];淮南工业学院学报(自然科学版);1998年02期
6 刘翔;;测定甲胎蛋白含量的酶联免疫吸附试验[J];暨南大学学报;1984年01期
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4 邓永福;;4种梅毒检测方法比较[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
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10 王志伟;王菊英;李义德;;酶免之星的安装与调试[A];第九届西北五省(区)检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
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1 记者  吴天飞;哈市开展乙肝血清学调查[N];哈尔滨日报;2006年
2 蒲昭和;艾滋病是如何传播到美国的[N];四川科技报;2000年
3 记者 张淑会;全省启动乙肝血清学入户调查[N];河北日报;2006年
4 胡文华;我国内地现有慢性乙肝病人2000万例[N];中国医药报;2006年
5 高彦生;OIE疫情专递[N];中国畜牧兽医报;2005年
6 副主任医师 李泽华;甲肝病——即使曾经拥有 免疫力——仍难天长地久[N];大众卫生报;2000年
7 本报见习记者  张宇;北京万泰生物药业:为生命护航[N];经理日报;2006年
8 俞渊;宠物与人相通的寄生虫病[N];大众科技报;2008年
9 本报记者 宋菁;广州墨西哥客商流感样本已经递送中国CDC[N];21世纪经济报道;2009年
10 北京兽药研究所 中青;水泡性口炎诊断技术[N];中国畜牧水产报;2001年
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1 王海燕;IBR间接ELISA的建立及重组gE糖蛋白与单抗的研制[D];吉林大学;2006年
2 杨增岐;断奶仔猪多系统衰竭综合征的研究[D];西北农林科技大学;2007年
3 李继昌;牛传染性鼻气管炎重组疫苗的基础研究[D];东北农业大学;2002年
4 盖新娜;猪脑心肌炎病毒VP1基因的原核表达、血清学调查及分离毒株的鉴定[D];中国农业大学;2005年
5 余晓波;新生血管性青光眼虹膜新生血管膜的病理微环境研究[D];复旦大学;2005年
6 杨力;腹腔镜辅助小切口次全子宫切除手术的临床研究[D];第二军医大学;2007年
7 杨泽晓;醋酸甲羟孕酮的单克隆抗体及ELISA检测技术研究[D];西北农林科技大学;2008年
8 陈友岱;垂体腺苷酸环化酶激活肽在急性胰腺炎发病机制中的作用[D];四川大学;2004年
9 郑玉姝;免疫抑制性病毒感染对SPF鸡脾细胞IFN-γ产生的影响[D];山东农业大学;2006年
10 周祖涛;鸭疫里氏杆菌免疫诊断方法及在感染鸭肝脏差异表达基因的研究[D];华中农业大学;2009年
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1 张鹏飞;内蒙古地区牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定[D];内蒙古农业大学;2007年
2 向大育;武陵山区猪圆环病毒病流行病学调查[D];华中农业大学;2006年
3 石云杰;鼠抗人B7-1功能性单克隆抗体的研制及应用研究[D];苏州大学;2006年
4 王敏;YKL-40在上皮性卵巢癌患者血清和组织中的表达及临床意义[D];中南大学;2009年
5 王志宇;轮状病毒检测技术研究[D];山东大学;2005年
6 胡蕾;颞下颌关节紊乱病关节液中尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的检测[D];四川大学;2007年
7 武思俊;血清S-100B蛋白诊断颅内恶性肿瘤放疗引起放射性脑损伤的应用研究[D];山西医科大学;2009年
8 宁丽;人类肠易激综合征粪便钙卫蛋白与双歧杆菌关联性的研究[D];大连医科大学;2009年
9 韩放;人类肠易激综合征粪便钙卫蛋白与乳酸杆菌关联性的研究[D];大连医科大学;2009年
10 马伟;庆大霉素免疫分析新方法的研究[D];江南大学;2009年
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