内蒙古不同生态地区冷蒿居群遗传多样性的RAPD分析
【摘要】：
本文以分布于我区各种生境的冷蒿居群为研究对象,从地理分布、形态结构特征、花粉形态特征及RAPD多样性等几个方面对其进行研究,通过对现有分布区的调查和实验研究表明:
结合形态特征及解剖结构研究表明:不同居群的冷蒿在形态及结构上都具有高光效、高利用水分的结构特点,也体现了抗旱、抗寒和抗强烈太阳辐射的能力,其形态、结构与其所处的环境是相互协调统一的。
本实验建立的RAPD反应体系适用于冷蒿的研究,能够从基因组水平为冷蒿研究提供合理的依据。冷蒿的RAPD反应优化体系为:模板DNA0.1μg,随机引物1μl,10×Buffer(含Mg2+)2.5μl,2.5mM dNTP4μl,2.5U Taq聚合酶0.4μl,加无菌水至25μl。RAPD研究结果如下:11个随机引物共检测到不同分子量的93个RAPD标记,其中77条表现出多态性,占总数的82.8%;多态位点比例介于62.5%～100%之间,Nei's(h)基因多样度指数介于0.0206～0.0808之间,表现出较高的遗传多样性水平。
研究结果表明冷蒿各居群间的遗传距离和遗传相似性存在着较大的差异;地理上距离较近的居群多聚在一起,表现出比较明显的地域性,说明各居群的亲缘关系与地理分布有着密切的关系。
【关键词】：冷蒿 居群 遗传多样性 RAPD 【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：S543.9
【目录】：
- 摘要2-3
- Abstract3-8
- 前言8
- 1 植物遗传多样性研究概述8-22
- 1.1 遗传多样性的含义及研究意义8-9
- 1.2 遗传多样性的检测方法9-16
- 1.2.1 形态学水平的遗传多样性检测10-11
- 1.2.2 染色体水平的遗传多样性检测11
- 1.2.3 等位酶水平的遗传多样性检测11-12
- 1.2.4 DNA 水平的遗传多样性检测12-16
- 1.3 RAPD 标记在植物遗传多样性研究中的应用16-17
- 1.4 冷蒿研究概述17-20
- 1.4.1 冷蒿生物学特征简述17-19
- 1.4.2 冷蒿的地位、作用及研究现状19-20
- 1.5 研究区域自然地理条件概况20-21
- 1.5.1 地貌20
- 1.5.2 气候20-21
- 1.5.3 植被与土壤21
- 1.6 本研究的目的及意义21-22
- 2 解剖学及孢粉学研究22-26
- 2.1 实验材料22-24
- 2.2 实验方法24
- 2.3 结果与分析24-25
- 2.3.1 冷蒿居群叶片形态解剖特征的观察与分析24-25
- 2.3.2 冷蒿的花粉形态特征分析25
- 2.4 讨论与小结25-26
- 2.4.1 冷蒿居群叶片形态解剖特征的讨论与结论25-26
- 2.4.2 花粉形态特征的讨论与结论26
- 3 RAPD 分析26-43
- 3.1 实验材料26
- 3.2 实验仪器与试剂26-27
- 3.2.1 主要仪器设备26-27
- 3.2.2 主要实验药品27
- 3.3 实验方法27-35
- 3.3.1 基因组DNA 的提取27
- 3.3.2 基因组 DNA 的检测27-28
- 3.3.3 引物的选择28-30
- 3.3.4 RAPD 反应条件的优化30-33
- 3.3.5 RAPD 扩增体系的建立33-34
- 3.3.6 PCR 扩增产物的检测34-35
- 3.4 结果与分析35-41
- 3.4.1 冷蒿基因组 DNA 的提取结果与分析35-36
- 3.4.2 RAPD 扩增产物的凝胶电泳分析36
- 3.4.3 数据统计36
- 3.4.4 内蒙古地区冷蒿居群内的遗传多样性分析36-38
- 3.4.5 内蒙古地区冷蒿居群间的遗传距离和聚类分析38-40
- 3.4.6 内蒙古地区冷蒿居群的遗传结构分析40-41
- 3.5 讨论与小结41-43
- 3.5.1 材料的野外保存41
- 3.5.2 基因组 DNA 的提取41-42
- 3.5.3 RAPD 分析的稳定性和条件优化42
- 3.5.4 RAPD 扩增反应的建立42-43
- 3.5.5 内蒙古地区冷蒿居群遗传多样性的探讨43
- 4 结论43-44
- 5 本研究存在的问题与进一步的工作方向44-45
- 致谢45-46
- 参考文献46-51
- 附录51-56
- 作者简介56
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