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《内蒙古农业大学》 2007年
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口蹄疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立与评价

孙晓智  
【摘要】: 口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物。由于FMDV是单股RNA病毒,有很高的变异能力,其抗原性的变异非常频繁,故给口蹄疫的防制带来了很大的困难。快速准确地诊断FMD对于及时控制扑灭疫情极其重要,因此,FMDV快速检测方法一直都是各国学者研究的热点问题。 目前,口蹄疫病毒的检测方法很多,如病毒分离鉴定、血清学检测、分子生物学检测等。这些检测方法虽然为口蹄疫的诊断提供了强大的技术支持,但随着分子生物学技术的不断发展和成熟,一些新的分子生物学检测技术还在应运而生,环介导等温扩增法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)就是新型的口蹄疫病分子生物学检测技术之一。 本试验从Genebank中获得口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型3D区的基因序列,应用MegAlign软件分析其基因序列,根据LAMP引物设计原则,用PrimerExplorer在这些序列的保守区域设计内、外和环三对引物,建立了快速检测口蹄疫病毒的LAMP检测方法,并进行了敏感性和特异性的确定;与此同时还对口蹄疫病毒包含上述目标序列的一段基因克隆后插入T载体,以便为所建立的LAMP检测方法提供阳性物质,并对此阳性物质进行了LAMP反应条件和反应体系的优化。试验结果表明:本试验所建立的快速检测口蹄疫病毒的LAMP检测方法具有较高的特异性和敏感性,敏感性与荧光PCR检测方法一致,能够满足口蹄疫快速检测的需要。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S854.43

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 刘振宝;;猪口蹄疫的诊断及其防控[J];畜牧与饲料科学;2012年08期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 马丽娟;CPV LAMP检测方法建立和蜘蛛香治疗效果研究[D];吉林大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张显升,刘在新,赵启祖,谢庆阁;口蹄疫病毒基因组RNA结构与功能研究进展[J];病毒学报;2001年04期
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3 张怀宇;王泰健;赵启祖;;口蹄疫灭活疫苗质量控制和检测技术的研究进展[J];兽医导刊;2007年03期
4 刘庆军,张永光;口蹄疫病毒基因组结构及其功能[J];动物医学进展;2005年05期
5 钟金栋;花群义;肖荣海;夏雪山;杨云庆;周晓黎;董俊;邓祖洪;;多重PCR同时检测口蹄疫病毒、猪水疱病病毒和水疱性口炎病毒[J];动物医学进展;2006年07期
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10 黄桂菊;罗满林;刘镇明;;猪口蹄疫病毒DNA疫苗与常规灭活苗的比较[J];华南农业大学学报;2006年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 钱凤芹,刘长梅,任红梅,李爱芹,庄文忠;鸡新城疫病毒山东分离株F蛋白基因的克隆与鉴定[J];山东农业科学;2001年03期
3 东野传现;史玉颖;黄中利;刘玉山;亓丽红;傅剑;;“禽喘康颗粒冲剂”对鸡人工感染新城疫病毒临床效果的研究[J];山东农业科学;2007年02期
4 李子剑;李云龙;陈苏;艾武;宋敏训;李玉峰;;鸭肠炎病毒US2基因的序列测定与分析[J];山东农业科学;2008年03期
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8 张小飞,潘孝成,汪秀娟,赵瑞宏,蒋书东;绩溪县浩寨兔病毒性出血症的诊断[J];安徽农业科学;2002年02期
9 沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡传染性法氏囊病病毒冻干保护剂热稳定性研究[J];安徽农业科学;2004年01期
10 沈咏舟,沈乐平,程建整;鸡新城疫病毒耐热冻干保护剂的研究[J];安徽农业科学;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄金秋;梅建国;沈志强;;赤羽病病毒检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 庄金秋;梅建国;沈志强;;犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
6 程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
7 赵东升;盖新娜;孙栋;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎灭活疫苗的制备及小鼠免疫研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
8 方忠意;崔保安;;动物基因工程疫苗研究进展[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
9 曾政;任远志;叶昭辉;凌洪权;杨泽林;熊仲良;;重庆市2009年犬狂犬病检测及流行病学调查[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
10 薛传华;何林;赵志模;;朱砂叶螨β-actin基因cDNA片段的克隆及实时荧光定量PCR方法的建立[A];庆祝重庆市植物保护学会成立10周年暨植保科技论坛论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈琳;淡色库蚊击倒抗性(kdr)相关钠离子通道基因多态性研究[D];南京医科大学;2010年
2 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
3 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
4 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
5 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
6 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
8 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
10 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
3 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
4 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
5 许莹;H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究[D];南京医科大学;2010年
6 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
7 贾丽锋;A型流感病毒NP蛋白的原核表达及初步应用[D];郑州大学;2010年
8 史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
9 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
10 裴兰英;HSP_(70)与MDV肿瘤的发生发展相关性研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李健;陈沁;熊炜;方雪恩;;口蹄疫病毒RT-LAMP检测方法的建立[J];病毒学报;2009年02期
2 马景霞;;犬细小病毒研究进展[J];山东畜牧兽医;2008年05期
3 邱薇;范泉水;李作生;杨美峰;郑颖;李丽红;王双印;李江;夏咸柱;;犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验[J];动物医学进展;2006年03期
4 孙艳芳;扎西英派;辛国省;贾宁;;犬细小病毒病的病理学观察[J];动物医学进展;2007年06期
5 王建东;郭建宏;杨春生;刘在新;;基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展[J];动物医学进展;2007年S1期
6 李河林;焦铁军;刘淑红;王晶钰;李健强;;犬细小病毒病研究进展[J];动物医学进展;2008年05期
7 孔庆波;;犬细小病毒病免疫预防研究进展[J];动物医学进展;2008年09期
8 陈元其;犬细小病毒病的诊断和综合治疗[J];福建畜牧兽医;2003年S1期
9 傅亮,楚清脆,黄宝康,郑汉臣,叶建农;毛细管电泳-电化学检测法测定蜘蛛香中多元酚类化合物[J];分析化学;2005年02期
10 胡晓娜;周欣;李明;刘海;周伟;陈华国;;不同提取方法对蜘蛛香挥发油的研究[J];分析试验室;2008年S1期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 肖丹;蜘蛛香提取物抗良性前列腺增生的作用及机理研究[D];成都中医药大学;2005年
2 明东升;连翘和蜘蛛香化学成分及生物活性研究[D];中国协和医科大学;1998年
3 闫兴丽;蜘蛛香环烯醚萜对肠易激综合征的治疗作用及机理探讨[D];北京中医药大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王彤光;犬细小病毒单克隆抗体在治疗犬细小病毒病上的应用研究[D];西北农林科技大学;2003年
2 程言信;犬细小病毒VP2的原核高效表达及特异单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2007年
3 戈锐;犬细小病毒四川株的分离鉴定与VP2结构蛋白基因变异性研究[D];四川农业大学;2007年
4 谢联香;检测犬细小病毒抗原和抗体ELISA方法的建立和应用[D];南京农业大学;2007年
5 李爽;猫细小病毒分离鉴定与基因组序列分析及VP2基因的原核表达[D];吉林大学;2008年
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8 易立;犬细小病毒的分离鉴定、序列分析及VP2基因的融合表达[D];中国农业科学院;2008年
9 胡连霞;环介导等温核酸扩增(LAMP)技术检测婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的研究[D];河北农业大学;2009年
10 张锦秀;猪圆环病毒2型间接ELISA、实时定量PCR及LAMP检测方法的建立[D];中国农业科学院;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 陈畅;李韶菁;唐仕欢;吴宏伟;许海玉;杨洪军;闫智勇;;蜘蛛香药理研究进展[J];中国中药杂志;2012年14期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张显升,刘在新,赵启祖,谢庆阁;口蹄疫病毒基因组RNA结构与功能研究进展[J];病毒学报;2001年04期
2 张显升,赵启祖,刘在新,江鹏斐,常惠芸,陈应理,李冬,魏怀录,谢庆阁;口蹄疫病毒基因组内部核糖体进入位点一级和二级结构分析[J];病毒学报;2002年02期
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6 汪洋,亢文华,白永平,薄清如;口蹄疫研究概况[J];中国畜牧兽医;2004年09期
7 龚团莲,孙立杰,毛景东,任菊秋,廉春艳;口蹄疫研究概述[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2001年04期
8 娄高明,杜伟贤,杨傲冰,周秀蓉,谢明权;应用RT-PCR技术检测动物组织中的口蹄疫病毒[J];微生物学通报;2002年04期
9 徐全武,申涛,马雪峰;口蹄疫疫苗研究进展[J];新疆畜牧业;2003年03期
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李琼;岳志芹;凌宗帅;刘荭;梁成珠;陈晓;陈昌福;;淋巴囊肿病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用[J];华中农业大学学报;2009年03期
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3 闫海滨;赵刚;朱江巍;申绍庆;;口蹄疫诊断技术的研究进展[J];现代畜牧兽医;2010年04期
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10 段文刚;;第八讲 口蹄疫(FMD)[J];畜牧市场;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 邱杨;肖性龙;刘建丽;李惠芳;张经纬;余以刚;吴晖;;口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
4 潘群兴;王永山;何孔旺;欧阳伟;王晓丽;诸玉梅;夏兴霞;;重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
5 李夏莹;王建昌;郑世军;;口蹄疫病毒VP1,2C蛋白与宿主细胞相互作用机制的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
6 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒RNA组成、功能及分子致病机制的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
7 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;金宁一;;口蹄疫病毒3AB基因在重组杆状病毒中的表达及检测[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
8 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒分子流行病学的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
9 郑敏;金宁一;张洪勇;刘棋;韦婷;郭建刚;李华明;尹革芬;鲁会军;;口蹄疫病毒O/NYOO株的分子生物学特性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
10 郝雪梅;;口蹄疫流行病学及防制措施[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 张建琛;厦门首创子宫颈癌自我检测技术[N];科技日报;2006年
2 来文;大庆钻具疲劳检测技术填补国内空白[N];中国质量报;2007年
3 张雁琳曾民君 记者 龚琛虎;江西赣州服装检测技术全省领先[N];中国质量报;2008年
4 胜文;色彩检测技术与色彩管理应用[N];中国包装报;2006年
5 何北;国内混凝土防渗墙施工及质量检测技术[N];中国水利报;2006年
6 本报记者 晁国荣 通讯员 龚伟;为重大工程建设保驾护航[N];中国冶金报;2006年
7 陈雪梅徐业富;茶叶稀土检测技术达国际水平[N];中国质量报;2008年
8 记者 严风华;船用油颗粒污染度检测技术行业标准问世[N];中国船舶报;2006年
9 张荔子;床边诊断技术问题不少[N];健康报;2006年
10 阿聪;金属容器的渗漏检测技术[N];中国包装报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李勇;口蹄疫病毒3C(D)蛋白与宿主细胞因子Fascin-1相互作用研究[D];武汉大学;2010年
2 孙萌;口蹄疫病毒VP1抗原基因在模式植物叶绿体中的重组和表达[D];浙江大学;2003年
3 吴兴泉;福建马铃薯病毒的分子鉴定与检测技术[D];福建农林大学;2002年
4 吴雨霞;口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在原核和真核细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
5 朱远茂;表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组牛疱疹病毒1型的构建及其免疫研究[D];东北农业大学;2010年
6 邵寒娟;A、O型口蹄疫双价疫苗研究[D];厦门大学;2004年
7 白兴文;我国O型泛亚1系口蹄疫病毒表型差异的分子基础[D];中国农业科学院;2012年
8 夏响华;油气微渗漏理论与检测技术研究[D];成都理工大学;2003年
9 洪琦;口蹄疫—伪狂犬病二价与口蹄疫—猪细小—伪狂犬病三价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2005年
10 潘丽;口蹄疫病毒免疫原基因在番茄和拟南芥中的表达及转基因番茄动物免疫试验[D];中国农业科学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙晓智;口蹄疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立与评价[D];内蒙古农业大学;2007年
2 祝秀梅;检测牛、猪血清口蹄疫病毒非结构蛋白3AB抗体ELISA方法的建立[D];甘肃农业大学;2007年
3 张先锋;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC、3AB、3A的克隆表达及3A蛋白间接ELISA方法的初步建立[D];新疆农业大学;2010年
4 裴志花;牛O型口蹄疫病毒内蒙古疫苗株p1基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2005年
5 金华利;口蹄疫病毒vp1体外表达和DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2004年
6 孙琳;MUC1肿瘤抗原和口蹄疫病毒抗体检测方法的建立[D];吉林大学;2004年
7 王钢;口蹄疫病毒VP1基因的序列分析及巢式PCR检测研究[D];四川农业大学;2005年
8 田飞鹏;杆状病毒介导O型口蹄疫病毒P12A和3C基因在Sf9细胞和BHK细胞中的共表达[D];西北农林科技大学;2010年
9 杜宇;猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测[D];山西农业大学;2005年
10 赵磊;抗口蹄疫病毒单克隆抗体的制备和抗原模拟表位的筛选[D];安徽农业大学;2008年
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