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《内蒙古农业大学》 2008年
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牛磺胆酸对小鼠免疫细胞凋亡的影响

郭凤英  
【摘要】: 牛磺胆酸(TCA)是牛羊胆汁中的有效成分之一,也是其发挥药理作用的主要成分之一。本文研究了TCA对胸腺细胞凋亡启动阶段、执行阶段、生化特征阶段以及腹腔巨噬细胞、外周血淋巴细胞和脾脏淋巴细胞凋亡生化特征阶段的影响,以探讨牛磺胆酸对小鼠免疫细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测了TCA对胸腺细胞凋亡磷脂酰丝氨酸外翻百分率,结果显示,高剂量TCA在体内可显著抑制胸腺细胞磷脂酰丝氨酸外翻,抑制胸腺细胞凋亡;将TCA与胸腺细胞在体外共同孵育后发现,不同浓度的TCA均能显著降低磷酯酰丝氨酸外翻,抑制胸腺细胞凋亡。采用分光光度法检测了TCA对胸腺细胞凋亡过程中Caspase-9蛋白酶的活化程度,体内实验结果显示:低剂量、高剂量TCA均可显著提高凋亡特异蛋白酶Caspase-9的活性,诱导胸腺细胞凋亡;体外实验结果显示:不同浓度TCA与胸腺细胞共同孵育后,中、高剂量TCA均可显著提高Caspase-9的活化程度,诱导胸腺细胞凋亡,而低剂量TCA则无显著影响。采用分光光度法检测了TCA对胸腺细胞凋亡过程中Caspase-3蛋白酶的活化程度,体内实验结果显示:低剂量TCA可显著提高caspase-3的活化程度,诱导细胞凋亡,而高剂量组对胸腺细胞凋亡则无明显的影响;体外实验结果显示:不同浓度TCA与胸腺细胞共同孵育后,中剂量TCA可显著提高Caspase-3的活化程度,诱导细胞凋亡,而低剂量TCA和高剂量TCA组则无显著性作用。采用二苯胺法检测了TCA对小鼠不同免疫细胞的凋亡百分率。实验结果显示:低剂量、高剂量TCA均能够显著增加胸腺细胞凋亡DNA片断化百分率,诱导胸腺细胞凋亡,但剂量间无显著性差异;低剂量TCA能够显著增加腹腔巨噬细胞凋亡DNA片断化百分率,诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,而高剂量TCA的作用不显著;低剂量和高剂量TCA均能够显著增加外周血淋巴细胞凋亡DNA片断化百分率,诱导外周血淋巴细胞凋亡;低剂量、高剂量TCA均能显著降低脾脏淋巴细胞凋亡DNA片断化百分率,抑制脾脏淋巴细胞的凋亡。结论:TCA可显著降低胸腺细胞磷脂酰丝氨酸外翻;能显著提高Caspase-9、Caspase-3蛋白酶在小鼠胸腺细胞内的表达,对小鼠胸腺细胞凋亡的启动、执行阶段具有诱导作用。TCA能显著增加正常小鼠胸腺细胞、腹腔巨噬以及外周血淋巴细胞DNA片段化百分率,促进这些免疫细胞的凋亡;但对正常小鼠脾脏淋巴细胞,TCA能显著降低DNA片段化百分率,抑制脾脏淋巴细胞的凋亡。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S853.7

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