收藏本站
《内蒙古农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

布鲁菌内蒙古分离株部分外膜蛋白基因的克隆与序列分析

陆静  
【摘要】: 本研究根据GenBank中已发表的布鲁菌株基因序列设计特异性引物。应用聚合酶链式反应(PCR)技术,扩增出6个内蒙古分离株(NH-B1、NH-B2、NH-B3、NH-R1、NH-R2、NH-R3)的OMP19、OMP28、OMP25、OMP31基因,将纯化的目的DNA与PMD19-T载体连接,转化DH5α感受态细胞,提取质粒,用PCR法鉴定,将鉴定为含有阳性质粒的菌液测定基因序列。测序结果表明:测定的OMP19基因节段长618bp,均包含完整的开放性阅读框(Open Reading Frame,ORF),位于43~576bp;OMP28基因节段长953 bp,包含完整的开放性阅读框(ORF),位于151~903 bp;测定的OMP25基因节段长865bp,均包含完整的开放性阅读框( ORF),位于166~808 bp;OMP31基因节段长1167bp,包含完整的开放性阅读框(ORF),位于137~859bp。 应用DNAstar软件将测定序列与参考序列的核苷酸的同源性进行比较分析,6个分离株的OMP19基因核苷酸序列之间同源性很高,在99.8%~100%之间;与参考菌株的同源性也很高在99.4%~100%之间。6个分离株的OMP28基因核苷酸序列之间具有很高的同源性在99.9%~100%之间,其中,NH-B2、NH-B3、NH-R1和NH-R2同源性为100%,NH-B1和NH-R3的同源性也是100%,NH-B2、NH-B3、NH-R1、NH-R2和NH-B1、NH-R3之间同源性为99.9%;与参考菌株的同源性在99.6%~100%之间。6个分离株的OMP25基因核苷酸序列相互之间同源性很高在99.5%~100%之间;与参考菌株的同源性在99.1%~100%之间;其中,NH-B2、NH-B3、NH-R1、NH-R2与Brucella abortus S19的同源性为100%,NH-B1与Brucella suis 1330的同源性也为100%。NH-B1、NH-B2和NH-R3分离株的OMP31基因核苷酸序列相互之间同源性为100%;与参考菌株的同源性在99.6%~100%之间。6个分离株同一组之间,其同源性均大于99%,与参考菌株相比,其各自的同源性亦保持在98%以上,显示布鲁菌OMP19、OMP25、OMP28以及OMP31基因种间的高度保守性,这与参考文献结果相一致。
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S852.61

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨丽娟,陈创夫;动物布鲁氏菌病的防治研究进展[J];浙江畜牧兽医;2005年05期
2 齐景文;;布鲁氏菌病常用诊断方法应用现状及评价[J];中国畜牧兽医;2006年08期
3 赵永利,朱岱;聚合酶链反应(PCR)在布病检测中的应用[J];中国地方病防治杂志;1999年01期
4 唐浏英,邱海燕,李元凯;应用分子生物学技术检测布鲁氏菌抗原的研究——Ⅱ PCR技术在动物布鲁氏菌病早期诊断中的应用[J];中国地方病防治杂志;1997年04期
5 金山,乌尼,哈斯木伦;布鲁氏菌生物学特性研究进展[J];内蒙古畜牧科学;2000年01期
6 吴从雅;防治布鲁氏菌病的艰巨性和必然性[J];内蒙古预防医学;1998年04期
7 冯开军,孙桐,林增良,陈富荣,王显军;微量补体结合试验与试管凝集试验在诊断布鲁氏菌病上的应用比较[J];中国卫生检验杂志;1995年05期
8 尚德秋!102206北京;中国布鲁氏菌病防治科研50年[J];中华流行病学杂志;2000年01期
9 尚德秋;布鲁氏菌病流行病学研究现况[J];中华流行病学杂志;1998年02期
10 徐春厚,吴凌,邵红,倪宏波,刘倩红;四种凝集试验检测牛布鲁氏菌病血清抗体的比较[J];中国动物检疫;1998年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
3 葛宏华,肖亚中,姚建平;人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年06期
4 王丽荣;董永军;梁美兰;;牛病毒性腹泻病毒的病原学与诊治[J];安徽农业科学;2005年12期
5 王永芬;边传周;;河南省鸡致病性大肠杆菌耐药性质粒的研究[J];安徽农业科学;2006年13期
6 赵为;邓科君;杨足君;周建平;任正隆;;景天科植物基因组DNA的高效提取方法[J];安徽农业科学;2006年22期
7 臧金灿;樊国燕;乔宏兴;丁明星;;RT-PCR技术检测河南省猪瘟病毒的研究[J];安徽农业科学;2006年24期
8 易庆平;罗正荣;张青林;;植物总基因组DNA提取纯化方法综述[J];安徽农业科学;2007年25期
9 朱建华,叶棋浓,江泽飞,严景华,宋三泰,黄翠芬;利用GST沉淀技术检测蛋白质间的相互作用[J];癌症;2003年07期
10 袁建辉,贺智敏,余艳辉,陈主初;Tet调控的乳腺癌耐受蛋白表达细胞系的建立及功能研究[J];癌症;2004年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
2 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
3 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
4 龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
5 王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
6 董运书;;鸡传染性喉气管炎的诊断与防治[A];河北省畜牧兽医科技创新论坛论文集[C];2007年
7 周兴;张居农;;蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK~R的构建及其在奶牛乳腺组织中的表达[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
8 曹丙蕾;王长法;高运东;杨少华;杨宏军;仲跻峰;赵宏坤;;后海穴免疫与常规免疫奶牛乳腺炎三联灭活苗的效力比较[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
9 崔晓燕;方定志;刘秉文;;人肝脏高凝状态相关基因的筛选[A];2004全国血脂分析及其临床应用学术研讨会、第七届全国脂蛋白学术会议论文汇编[C];2004年
10 王志宇;王健伟;何深一;吴围屏;韩金祥;洪涛;;截短型A组轮状病毒VP6在E.coli中的高效表达[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 范伟兴;PRV鲁A株的分离鉴定及表达EGFP和CSFV-E2的TK~-重组伪狂犬病毒的构建[D];南京农业大学;2002年
2 侯周华;输血传播病毒(TTV)基因变异的临床意义[D];中南大学;2003年
3 赵建国;鸡解偶联蛋白(UCP)基因与生长和体组成性状关系的遗传学研究[D];东北农业大学;2003年
4 张颖;淋巴细胞HIV-1辅受体的表型剔除对病毒感染的阻断作用[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
5 李琳琳;膳食因素和Calpain-10基因与维吾尔族哈萨克族2型糖尿病[D];新疆医科大学;2003年
6 于红;钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究[D];中国海洋大学;2003年
7 孙雪;龙须菜cDNA文库构建及EST和ISSR分析[D];中国海洋大学;2003年
8 李永辉;芳香族氨基酸生物合成代谢途径调控研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
9 赵计林;问号赖型钩端螺旋体毒力新基因的筛选及其功能研究[D];四川大学;2003年
10 王芳;表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌及其免疫生物学特性[D];扬州大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱德林;中国葡萄属野生种抗黑痘病基因RAPD标记作图[D];西北农林科技大学;2004年
2 张征峥;白细胞介素15基因克隆、改型及其在NCI-H446细胞中的表达[D];河北医科大学;2004年
3 巩燕;烟草中乙烯受体NTHK2全长基因的克隆和功能研究[D];山东农业大学;2003年
4 李玉梅;东北地区梅花鹿四种疫病的血清学调查[D];吉林农业大学;2005年
5 柏亚铎;牛传染性鼻气管炎PCR诊断方法的建立及初步应用[D];吉林农业大学;2002年
6 沈锦玉;嗜水气单胞菌外膜提取物及胞外产物特性的分析[D];浙江大学;2002年
7 柏锡;t-PA基因对黄瓜的遗传转化及其在不同植物中的表达效率分析和密码子改造[D];东北农业大学;2003年
8 邹敏芬;黄瓜DNA伏安传感器制备及应用研究[D];湖南大学;2003年
9 胡洋;h-CR1及m-CR1基因在E.coli和Pichia pastoris中的克隆表达及其抗体制备[D];沈阳药科大学;2003年
10 江汕;人细胞增殖相关激酶Plk3/Prk基因的表达及其功能的研究[D];南京医科大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨丽娟,陈创夫;动物布鲁氏菌病的防治研究进展[J];浙江畜牧兽医;2005年05期
2 尚德秋;布氏菌病的地理流行病学[J];中国地方病防治杂志;1992年06期
3 姜继春,李占乔,李绍丰,王秀英;一个特殊布病疫点布氏菌自然消长规律的研究[J];中国地方病防治杂志;1994年03期
4 尚德秋,张士义;布鲁氏菌病监测与特异性实验监察技术[J];中国地方病防治杂志;1995年01期
5 尚德秋;布鲁氏菌病流行病学及分子生物学研究进展[J];中国地方病防治杂志;1997年01期
6 冮森林,赵永利,张士义;布氏菌病全国重点监测点1990~2001年监测结果分析[J];中国地方病防治杂志;2002年05期
7 曾瑞霞;苏玉虹;;布鲁氏杆菌各类检测方法的比较[J];现代畜牧兽医;2006年05期
8 冯培忠,苏城,黄建;病绵羊体内分离的拟似绵羊附睾种布氏菌的首次系统鉴定与分类[J];畜牧兽医学报;1997年03期
9 阎文瑛,辛志春,李玉莲,包丕云;布鲁氏菌病与人类白细胞抗原相关关系的初步探讨[J];中国地方病学杂志;1990年06期
10 顾文艺,伊米提,袁燕,谷登峰,金根源,史丕裕,任德坤,刘宗元;牛种布氏杆菌抗独特型抗体苗的研究[J];中国兽医科技;1991年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄伟坚;连慧香;尹业师;屈素洁;李军;余克伦;罗廷荣;陆芹章;刘芳;;6株猪圆环病毒2型流行毒株全基因组克隆及序列分析[J];动物医学进展;2006年07期
2 白娟;蒋康富;李玉峰;王先炜;姜平;;猪脑心肌炎病毒NJ08株基因组序列测定与分析[J];中国预防兽医学报;2011年05期
3 盖新娜;杨汉春;郭鑫;吕艳丽;王芳;陈艳红;查振林;;猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定[J];畜牧兽医学报;2007年01期
4 刘丽霞;庄天中;潘树德;刘金玲;;PRRSV辽宁分离株ORF3基因的克隆与序列分析[J];沈阳农业大学学报;2007年03期
5 孙海亮;曹瑞兵;陈溥言;魏威;潘华奇;刘磊;;猪圆环病毒Ⅱ型DT株的分离鉴定及动物模型建立[J];甘肃农业大学学报;2008年05期
6 王暖成;鲁承;杜鑫;王中光;陈健;崔洪钧;杜秋明;;鹅细小病毒延边分离株VP3基因的克隆与序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2009年11期
7 胡北侠;黄艳艳;路希山;张秀美;许传田;颜世敢;张伟;;鸭新城疫病毒分离株抗原表位和遗传演化分析[J];中国兽医学报;2010年02期
8 李薇;李建强;赵祖波;王智永;赵英杰;王玉琳;;肠道病毒71型甘肃分离株VP1基因特征分析[J];中国生物制品学杂志;2010年10期
9 曲丰发,张大丙,郑献进,郭玉璞;鸭疫里默氏菌16SrDNA基因的PCR-RFLP分析[J];中国兽医杂志;2005年10期
10 张庆霞;陈建飞;韩宗玺;周玉长;邵昱昊;荣骏弓;刘胜旺;孔宪刚;;中国1995~1999年鸡传染性支气管炎病毒地方分离株核蛋白基因的遗传变异分析[J];病毒学报;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 任艳;陈创夫;乔军;杨霞;张辉;王鹏雁;盛金良;倪伟;;牛病毒性腹泻病毒石河子株的分离与基因型鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
2 胡北侠;黄艳艳;路希山;张秀美;许传田;颜世敢;张伟;;鸭新城疫病毒分离株抗原表位和遗传演化分析[A];禽类新发传染病高层论坛论文集[C];2009年
3 盖新娜;杨汉春;郭鑫;吕艳丽;王芳;陈艳红;查振林;;猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定[A];第四届中国畜牧科技论坛论文集[C];2009年
4 胡爱荣;蒋素文;胡耀仁;陆传统;朱德东;张岳灿;顾文珍;;两例EV71死亡病例的病理特征及EV71宁波分离株全基因组序列分析[A];第四届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、浙江省医学会肝病、感染病学学术年会论文汇编[C];2011年
5 朱国强;李玉华;王永坤;严维巍;周继宏;庄国宏;王建业;田慧芳;;腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒分离株S1纤突蛋白基因的比较研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
6 龚文杰;江禹;曾政;李茂;王莉莉;刘浩;熊仲良;涂长春;;动物狂犬病病毒街毒株的细胞分离鉴定[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
7 闫丽萍;肖和平;乐军;张滢蓉;;左氧氟沙星对结核分枝杆菌耐氧氟沙星临床分离株的抗菌活性分析[A];中华医学会2008年全国结核病学术会议论文汇编[C];2008年
8 王伟;糜祖煌;毛剑锋;徐伟珍;;大肠埃希菌连续分离株耐药表型及复方磺胺甲噁唑耐药相关基因研究[A];2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2008年
9 尚欣荣;王玫;王利君;黄艳飞;鲁辛辛;;MRSE血流分离株的分子特征研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 王永明;王晓丽;龙冬;马大亮;朱万光;李士成;;一株猪链球菌2型菌株的分离鉴定[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 余志平;关键在于其遗传特征及SCC mec组分[N];中国医药报;2005年
2 余志平;抗生素耐药问题牵动全球神经[N];中国医药报;2006年
3 中国农大 查红波;猪流感研究进展[N];中国畜牧兽医报;2005年
4 广东省农业科学院畜牧研究所 郑春田 周桂莲;饲用抗生素残留与畜产品安全[N];中国畜牧兽医报;2006年
5 连云港出入境检验检疫局 朱其太;禽鼻气管鸟杆菌感染[N];中国畜牧报;2002年
6 王永坤;用动态观点防制高致病性禽流感[N];中国畜牧兽医报;2005年
7 张荔子;野生候鸟既是“存贮器”也是“传播器”[N];健康报;2005年
8 杜蕾 马培奇;特利霉素:抗生素中的“明日之星”[N];医药经济报;2002年
9 扬州大学畜牧兽医学院病原微生物研究室 王永坤教授;新城疫有新动向 防制对策需跟上[N];中国畜牧报;2002年
10 综信;杂交棉花能留种吗?[N];中华合作时报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 坎布;副溶血弧菌海产品分离株的致病性和主要毒力基因结构分析[D];浙江大学;2007年
2 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
3 赵光日;棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株的部分基因组克隆载体的构建与序列分析[D];武汉大学;2003年
4 Sagheer Atta;[D];西南大学;2011年
5 汤细彪;猪源多杀性巴氏杆菌的分子流行病学与致病性研究[D];华中农业大学;2010年
6 吴晓平;商品蛋鸡源J亚群禽白血病病毒分离株生物学特性研究[D];扬州大学;2010年
7 余利岩;Actinobacteria的FISH鉴定方法的建立及分类学的研究[D];中国协和医科大学;1999年
8 王伟利;不同源性禽流感病毒株的分离鉴定及其主要基因信息的研究[D];吉林农业大学;2006年
9 秦卓明;新城疫病毒流行株致病性和抗原性及其与F和HN基因变异的相关性[D];山东农业大学;2006年
10 于淼;山东鸡新城疫病毒分离鉴定与Ⅱ+Ⅶ基因型灭活疫苗研究[D];南京农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 佘晓彬;鸽痘病毒分离株鉴定、致弱及免疫效力研究[D];扬州大学;2007年
2 陆静;布鲁菌内蒙古分离株部分外膜蛋白基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
3 齐亚银;致羔羊脑炎肠球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究[D];石河子大学;2005年
4 王志刚;三个CTV弱毒分离株的拮抗效果研究[D];西南大学;2007年
5 熊素玉;酸马奶中乳酸菌的分离鉴定及其生物学特性的研究[D];新疆农业大学;2007年
6 李晶梅;马立克氏病病毒在鸡体内的复制动力学研究[D];中国农业科学院;2008年
7 杜晓华;内蒙古西部地区自然发酵酸粥中乳酸菌的分离与鉴定[D];内蒙古农业大学;2009年
8 张晓利;动物性食品源空肠弯曲杆菌的分离鉴定及其二重PCR检测方法的建立[D];四川农业大学;2009年
9 张绍丽;河南省2008年手足口病病原体(EV71)分离株全基因组序列[D];郑州大学;2010年
10 王伟杰;猪乙型脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立及乙脑病毒四川分离株PrM/E基因的序列分析[D];四川农业大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026