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《内蒙古民族大学》 2018年
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蒙药止吐六味散的止吐作用机制及质量研究

陈香梅  
【摘要】:目的:蒙药“止吐六味散”是蒙医临床常用于各种呕吐的止呕良方。根据相关文献报道,关于蒙药“止吐六味散”的研究尚未深入,“止吐六味散”的质量研究及药理作用机制的系统研究仍未见公开报道。通过对蒙药“止吐六味散”进行方源考证、成药进行生药学鉴别研究、质量评价研究、和药理作用机制研究,为该药的二次开发及推广应用提供实验依据。方法:采用文献研究方法对蒙药“止吐六味散”的渊源及方药组成进行考证。采用显微鉴别法对“止吐六味散”进行粉末鉴定;依据《中国药典》(2015版),进行水分、灰分、浸出物及重金属的含量测定;薄层色谱法对“止吐六味散”中甘草、芫荽子、蔓荆子、小茴香和酸梨干进行定性鉴别;采用HPLC法测定蒙药“止吐六味散”中甘草苷、甘草酸的含量。采用大鼠异食癖模型即顺铂复制大鼠异食癖模型,测定大鼠每日摄食高岭土量,作为其恶心呕吐程度的指标,从整体动物、细胞、分子、基因等水平,采用ELISA法、免疫组化法、Western blotting法和Real-time PCR法,从外周(血清、回肠)和中枢(延髓)同步观察“止吐六味散”对顺铂引起呕吐的大鼠不同时间点(24h,72h)对5-HT合成(TPH)、代谢(MAOA)、转运(SERT)和5-HT3A受体、多巴胺合成(TH)、代谢(MAOB,DOPAC)和D2受体、P物质及其前体(PPTA)和NK1受体的影响。结果:(1)蒙药“止吐六味散”来源于8世纪经典医籍《四部医典》记载的“兴阿日如克巴”;在临床用药过程中存在其中2个单味药被代用现象。(2)“止吐六味散”配伍组份中除了芫荽子外其他均有区别于其他五味单药的粉末显微特征。TLC法能够鉴别“止吐六味散”中甘草、芫荽子、蔓荆子、小茴香和酸梨干。测得水分含量为6.89%~7.75%;灰分含量4.06%~4.40%;酸不溶性灰分含量1.24%~1.44%;水溶性浸出物含量26.52%~27.36%,醇溶性浸出物含量14.45%~14.56%,醚浸出物含量0.05%~0.06%;重金属铅含量0.01μg/kg,汞含量2.60mg/kg,铬含量2.41mg/kg,镉含量1.194μg/kg;砷盐含量0.20mg/kg;甘草苷、甘草酸分别在0.06~3.00μg,0.0784~0.3920μg范围有良好的线性关系。平均回收率分别为99.20%,100.26%。测定10个批号的“止吐六味散”样品中甘草苷、甘草酸含量:甘草苷含量0.552~1.365 mg/g;甘草酸含量1.874~2.582 mg/g。(3)该研究中用顺铂成功复制了大鼠异食癖模型,每24h(24h,48h,72h)称量摄食高岭土的量,与正常组比较明显增加。“止吐六味散”和昂丹司琼组大鼠摄食高岭土量均显著降低,说明“止吐六味散”和昂丹司琼均可抑制大鼠异食癖行为。造模24h和72h给“止吐六味散”治疗使大鼠回肠和延髓TPH水平降低,MAOA水平升高,上调SERT m RNA表达抑制5-HT的合成,促进5-HT的转运和代谢;下调5-HT3A受体m RNA表达和5-HT3A受体蛋白表达,通过对5-HT3A受体m RNA表达和5-HT3A受体蛋白表达的下调达到止呕效果。造模24h和72h给“止吐六味散”治疗使大鼠回肠和延髓TH水平降低,抑制DA的合成,下调D2受体m RNA表达和D2受体蛋白表达,通过对D2受体m RNA表达和D2受体蛋白表达的下调达到止呕效果。“止吐六味散”止呕作用机制也与降低大鼠回肠和延髓P物质含量,下调NK1受体m RNA表达和NK1受体蛋白表达有关。结论:蒙药“止吐六味散”来源于8世纪经典医籍《四部医典》所记载的兴阿日如克巴;“止吐六味散”质量分析结果表明该方法精密度高,稳定性及重现性良好,可作为止吐六味散质量评价方法。止吐机制研究结果表明,“止吐六味散”对顺铂引起的恶心呕吐有一定疗效,其疗效作用与5-HT,P物质和DA受体等多个靶点作用密切相关。
【学位授予单位】:内蒙古民族大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R29

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