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《大连理工大学》 2000年
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几种金属酶与金属离子之间的直接相互作用研究

盖宏伟  
【摘要】: 本文利用电子顺磁共振法(EPR)、可见光谱法(VIS)及活性 测量,探讨了枯草杆菌中性蛋白酶(B.S.NP)、核酸P1酶、碱性磷 酸酶(AKP)及氨基酰化酶(ACY)与外加金属离子(Cu(Ⅱ)、Co (Ⅱ))的直接相互作用。结果表明,外加金属离子都能进入上述四 种酶的活性中心位点,取代中心位点的Zn(Ⅱ),影响酶活性。 对于单核锌酶B.S.NP,外加的Cu(Ⅱ)与B.S.NP生成大分子配 合物。而且,这种配合物有两种不同的构象形式,这两种构象形式随 pH值不同而相互转换。 对于三核锌酶核酸Pl酶,在pH3.8和5.6条件下,外加的Cu (Ⅱ)同时进入Zn_2、Zn_3位。随pH值的升高,Zn_3位的Cu(Ⅱ)向 Zn_2位迁移。直接外加的Co(Ⅱ)进入的Zn位与以往文献用传统方 法引入的Zn位不同,并存在类似于Cu(Ⅱ)在不同活性位点间的 迁移现象。 对于二核锌酶AKP,外加Cu(Ⅱ)进入某一亚基的A位,当pH 变化时,另一亚基A位的Cu(Ⅱ)迁移至该亚基的B位,形成抗 铁磁性偶合,致使EPR垂直区的峰强度减小。外加Co(Ⅱ)亦有 类似于Cu(Ⅱ)的移动现象,导致可见光区出峰位置的变化。 对于结构知之较少的单核锌酶ACY来说,我们得到了Cu(Ⅱ) 进入酶活性中心位点的顺磁共振谱,表明外加Cu(Ⅱ)与ACY之 间存在直接相互作用。 本文工作进一步拓展了金属离子与金属酶之间的直接相互作用 的研究范围。发现了进入多核锌酶活性中心位点的外加金属离子随 pH值变化在不同位点之间的迁移现象。为进一步探讨金属酶活性 中心结构做了一些基础研究。
【学位授予单位】:大连理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:Q55

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