收藏本站
《大连理工大学》 2002年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

硝基苯降解菌Pseudomonas XN-1细胞质粒的提取和特性研究

刘春  
【摘要】: 本论文在对菌株Pseudomonas XN-1降解硝基苯的特性及降解条件优化的基础上,研究了菌株细胞内所含有的降解性质粒,希望能为今后对这株菌在分子水平上降解硝基苯的特性研究打下一些基础。 因为细菌的抗生素抗性往往是与质粒相关的,所以考察了这株菌对抗生素的抗性,结果表明,这株菌对氨苄青霉素有抗性,对氯霉素和四环素没有抗性。 对于野生菌株的质粒提取,需要选择合适的提取方法,我们首先采用了细菌细胞质粒提取常用的碱裂解法,但是未取得理想的效果,只得到了许多破碎的质粒DNA片段。 应用质粒检测的方法,对菌株细胞进行质粒检测,并对检测结果进行电泳分析,实验发现,菌体细胞中存在一个质粒,而且质粒较大。 因此我们采用了适合于大质粒提取的SDS法,和文献中应用于硝基苯降解性质粒的提取方法,来尝试对菌株细胞进行质粒提取,这两种方法裂解反应温和,不会像碱裂解法那样,在裂解过程中损坏质粒,可以实现质粒提取的完整性。结果表明,应用这两种方法可以得到清晰完整的质粒带。对质粒DNA电泳结果的分析表明,该质粒的大小约为22kb左右。 为了考察质粒的功能,进行了质粒消除实验,结果表明,质粒消除后的菌株细胞难以在硝基苯选择培养基上生长,表明这个质粒是与硝基苯的降解代谢过程有关的。同时实验表明,这个质粒与菌株抗生素的抗性没有关系。 对菌株的自发突变株的研究表明,这些菌株在硝基苯选择培养基上的生长特性是与它们细胞中所含质粒的特性相关的。一株质粒含量较高的突变株在硝基苯选择培养基中的生长情况要好于其它菌株,其所含的质粒也略小一些,因此我们推测,某个质粒片段的缺失造成了质粒拷贝数的变化,从而影响了它的生长特性。 为了建立质粒的物理图谱,我们对所提取的质粒进行了限制性酶切消化, 摘要 但是未能取得满意的结果,原因可能有两个:一,所选择的酶不合适,在质 粒上没有合适的酶切位点;二,质粒的纯度不够,影响了酶切反应的结果。
【学位授予单位】:大连理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:Q932

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 宫占元;王艳杰;;侧孢芽孢杆菌质粒提取方法的探究[J];黑龙江八一农垦大学学报;2005年06期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 金术超;侧孢芽孢杆菌BL-21降解有机磷农药作用的研究[D];黑龙江大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵朝成,赵东风;超临界水氧化技术处理硝基苯废水研究[J];重庆环境科学;2001年03期
2 周集体,黄丽萍,王竞,张劲松,吕红;芳香族硝基化合物生物降解代谢研究现状与展望[J];大连理工大学学报;2000年S1期
3 罗如新,张素琴,李顺鹏;氯苯降解性质粒pL1限制性酶消化和物理图谱[J];环境科学学报;1999年05期
4 刘东,蔡宏道;硝基苯类化合物降解菌的分离鉴定及其最适降解条件的研究[J];环境与健康杂志;1989年05期
5 李湛江,韦朝海,任源,梁世中;硝基苯降解菌生长特性及其降解活性[J];环境科学;1999年05期
6 毛连山,赵泉珍,林中祥;硝基苯废水的治理[J];环境污染与防治;2000年06期
7 李劲,叶齐政,郭香会,齐军;电流体直流放电降解水中硝基苯的研究[J];环境科学;2001年05期
8 宋文华,颜慧,胡国臣,戴树桂,庄源益,温孚江,郑成超;蒽醌染料及中间体脱色优势菌的特性研究和基因定位[J];环境化学;1999年03期
9 张全兴,王勇,李秀娟,陈金龙;树脂吸附法处理硝基苯和硝基氯苯生产废水的研究[J];化工环保;1997年06期
10 罗如新,沈标,李顺鹏;一氯苯的微生物厌气降解及其降解性质粒的研究[J];南京农业大学学报;1997年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 程鹏;慎义勇;;催化湿式氧化技术原理与应用[J];环境科学与管理;2005年05期
2 缪劲松;徐红丽;欧阳吉庭;;利用低温等离子体技术脱除甲醛的研究[J];北京理工大学学报;2005年S1期
3 李霞,刘素文,刘建安;溶胶-凝胶法制备掺杂银的TiO_2薄膜与光催化性能的研究[J];玻璃与搪瓷;2003年04期
4 魏守强,刘瑛,邵忠财;电化学生成臭氧的研究进展[J];表面技术;2005年03期
5 董新姣,林晓华,胡静;固定化无花果曲霉对活性艳蓝KN-R的脱色[J];城市环境与城市生态;2003年06期
6 宋文华,颜慧,胡国臣,冯,庄源益,戴树桂;脱色酶和优势菌混合固定化降解染料的研究[J];城市环境与城市生态;1999年02期
7 曹植菁,龙炳清,朱明,赵仕林,杨代军;微生物处理生物难降解有机物的进展[J];重庆环境科学;2002年06期
8 龙炳清,曹植菁,杨代军;铁还原中和沉淀法处理TNT酸性废水的研究[J];重庆环境科学;2003年05期
9 刘时松;何瑾馨;;低浓度染色废水的臭氧—活性炭在线脱色及其回用的研究[J];东华大学学报(自然科学版);2006年02期
10 黄丽萍,周集体,杨凤林,王竞;菌株HP3降解溴胺酸特性研究[J];大连理工大学学报;2000年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黎华亮;李忠;夏启斌;;两种钛电极电生过氧化氢性能的比较[A];第六届中国功能材料及其应用学术会议论文集(10)[C];2007年
2 顾晓利;;铁酸盐催化剂在微波氧化处理水中低浓度甲苯的研究[A];第四届全国工业催化技术及应用年会论文集[C];2007年
3 吴海珍;梁世中;吴锦华;韦朝海;;环境微生物的上游技术与下游技术[A];中国环境保护优秀论文集(2005)(下册)[C];2005年
4 何军;奚晓东;聂宏元;彭卫;;提高石油化工废水可生化性——臭氧氧化法条件的研究[A];2007中国环境科学学会学术年会优秀论文集(上卷)[C];2007年
5 缪劲松;徐红丽;欧阳吉庭;;利用低温等离子体技术脱除甲醛的研究[A];中国物理学会静电专业委员会第十二届学术年会论文集[C];2005年
6 刘力章;马少健;;废水处理用膨润土改性方法综述[A];第十一届全国粉体工程学术会暨相关设备、产品交流会论文集[C];2005年
7 李同川;;TNT生产废水流化床的焚烧方法[A];2006年石油和化工行业节能技术研讨会会议论文集[C];2006年
8 刘玉真;岳钦艳;高宝玉;李倩;;PDMDAAC-阳离子膨润土复合材料处理印染废水的研究[A];中国化学会第七届水处理化学大会暨学术研讨会会议论文集[C];2004年
9 付冬梅;刘仁华;章飞芳;薛兴亚;徐青;梁鑫淼;;催化湿式共氧化法处理硝基苯废水的研究[A];持久性有机污染物论坛2006暨第一届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集[C];2006年
10 杨秀山;赵军;钱城;董雪;;微生物降解生物质气化洗焦废水和焦油的初步研究[A];中国太阳能学会生物质能专业委员会论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 慎义勇;油制气废水毒害有机污染物控制技术初步研究[D];中国科学院广州地球化学研究所;2000年
2 黄丽萍;溴胺酸的生物降解及降解途径的研究[D];大连理工大学;2001年
3 钟文辉;2,4-二氯酚的微生物降解及相关基因的克隆[D];浙江大学;2001年
4 刘新;有机磷杀虫剂降解菌的诱发、分离与降解效果研究[D];福建农林大学;2002年
5 刘守新;活性炭光再生技术与TiO_2--活性炭协同作用机制研究[D];东北林业大学;2002年
6 董晓丽;胶质红假单胞菌对活性艳蓝KN-R的脱色研究[D];大连理工大学;2002年
7 周红艺;钯/铁双金属体系对氯代芳烃的催化脱氯研究[D];浙江大学;2003年
8 王兆守;微生物降解茶叶农药残留的研究[D];福建农林大学;2003年
9 安立超;含硝基苯类化合物工业废水生物降解及处理技术研究[D];南京理工大学;2003年
10 翟永清;纳米无机非金属材料的合成、表征及性质研究[D];河北大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李凌云;水中脉冲放电活性粒子的研究[D];华中科技大学;2005年
2 郑昱;含氯含硝基芳烃类污染物ZVI还原转化及QSAR的研究[D];浙江大学;2005年
3 尹奋平;改性天然高分子絮凝剂的制备及在废水处理中的应用研究[D];西北师范大学;2005年
4 时小兵;柱撑膨润土在饮用水处理中的应用[D];河北工业大学;2005年
5 金若非;蒽醌染料中间体的微生物降解脱色研究[D];大连理工大学;2000年
6 何健;高盐难降解工业废水微生物处理的污泥驯化研究与应用[D];南京农业大学;2000年
7 刘颖;溴氨酸生物降解动力学模型的建立[D];大连理工大学;2001年
8 应启锋;阴离子表面活性剂直链烷基苯磺酸钠(LAS)高效降解菌的筛选及其降解特性研究[D];北京工业大学;2001年
9 何锋;UV-Fenton处理难降解有机废水的研究[D];浙江大学;2002年
10 王传花;固定化活性污泥处理生活污水的探索研究[D];中南林学院;2002年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 侯轶,任源,韦朝海;硝基苯好氧降解菌筛选及其降解特性[J];环境科学研究;1999年06期
2 李轶;胡洪营;吴乾元;杨海洋;;低温硝基苯降解菌的筛选及降解特性研究[J];环境科学;2007年04期
3 王晨;马放;山丹;杨基先;蓝远东;高国伟;;固定化生物活性炭处理含硝基苯微污染水的可行性研究[J];环境科学;2007年07期
4 郑金来,李君文,晁福寰;苯胺、硝基苯和三硝基甲苯生物降解研究进展[J];微生物学通报;2001年05期
5 王竞,周集体,张劲松,张爱丽,吕红;假单胞菌JX165及其完整细胞对硝基苯的好氧降解[J];中国环境科学;2001年02期
6 刘蕾,李杰,王亚娥;生物固定化技术中的包埋材料[J];净水技术;2005年01期
7 刘云焕,陈东海;微生物降解有机磷农药的研究进展[J];北方环境;2005年01期
8 张韩杰,闫艳春;农药残留及微生物在农药降解中的应用与展望[J];湖北植保;2004年01期
9 周斌;方萍;张亚雷;赵建夫;;有机磷农药生物降解技术研究进展[J];化工环保;2005年05期
10 郭明,陈红军,王春蕾;4种农药对土壤脱氢酶活性的影响[J];环境化学;2000年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 石成春;有机磷农药曲霉生物降解特性及其动力学的研究[D];福州大学;2005年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李志瑞;有机磷农药降解菌的分离筛选及其降解性能的初步研究[D];西北大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李劲,王泽文,高秋华,李胜利;放电等离子体水处理技术中的放电问题[J];高电压技术;1997年02期
2 叶齐政,齐军,顾温国,李劲;EHD喷雾电晕放电现象研究[J];高压电器;2000年05期
3 陶大钧;张玮;;大孔吸附树脂处理酚类胺类和其再生[J];化工环保;1990年05期
4 张全兴,王勇,李秀娟,陈金龙;树脂吸附法处理硝基苯和硝基氯苯生产废水的研究[J];化工环保;1997年06期
5 赵军;O_3氧化处理苯胺、硝基苯废水的试验研究[J];环境保护科学;1997年03期
6 任源,吴超飞,韦朝海;苯胺分解菌的驯化筛选研究[J];环境科学研究;1998年04期
7 白迺彬;定量构效关系(QSAR)在环境化学中的进展与方法[J];环境科学;1990年02期
8 李胜利,李劲,王泽文,姚宏霖,高秋华;脉冲电晕放电对印染废水脱色效果的实验研究[J];环境科学;1996年01期
9 韦朝海,任源,吴超飞;Ochrobactrum anthropi 对苯胺的降解特性[J];环境科学;1998年05期
10 李湛江,韦朝海,任源,梁世中;硝基苯降解菌生长特性及其降解活性[J];环境科学;1999年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 何士敏;大肠杆菌C802的质粒(PBR322)转化[J];高师理科学刊;1983年02期
2 宁林夫,龚汉英,周路明,岑英华;几类快生型根瘤菌质粒的研究[J];中国农业科学;1985年04期
3 赵铭山,何永山;双向琼脂糖凝胶电泳鉴别鼠疫菌质粒构型方法的探讨[J];中国地方病学杂志;1988年02期
4 孙国凤;;分离出消除青枯病病原的质粒[J];生物技术通报;1991年11期
5 邓子新,周秀芬;质粒在大肠杆菌和链霉菌FR-008之间的属间接合转移[J];遗传;1994年06期
6 陶美凤,胡志浩,周秀芬,邓子新,David A Hopwood,Tobias Kieser;一个可介导链霉菌PKS基因向植物转化的杂合质粒的构建[J];生物工程学报;1996年04期
7 赵敬勇,高东,钱新民;质粒在大肠杆菌和沼泽红细菌之间的接合转移[J];微生物学报;1996年05期
8 王洪涛,陈宝雯,纪保安,贾博琦,谷青,马清钧;反义表皮生长因子受体可调控表达型质粒的构建及意义[J];北京医科大学学报;1998年04期
9 赵静,杨汉春;猪源大肠杆菌耐药性质粒的监测研究[J];黑龙江畜牧兽医;2000年01期
10 陈兰明,盛祖嘉,毛裕民;嗜热脂肪芽孢杆菌质粒DNA的高压电穿孔转化研究[J];微生物学通报;2000年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周利刚;向华;;极端嗜盐古菌隐蔽型质粒pZMX101的研究[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
2 马苏;姜平;段舒怡;李玉峰;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白中和性单克隆抗体研制[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
3 吴丛梅;殷玉和;韩依辰;;药用级含IL-24基因质粒提取工艺的研究[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
4 吴淑燕;宋国蓉;眭阳;李嫄渊;吕杰;李琼;黄瑞;;伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)与巨噬细胞自噬和凋亡关系的研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
5 朱建国;周杨;段新平;张明军;李莉;王铁东;逄大欣;欧阳红生;;绿色荧光蛋白基因体外转录质粒的构建[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
6 陆正齐;朱灿胜;刘然义;谢发君;胡学强;;质粒pAAV-MCS转导的骨髓间充质细胞导向的CNTF基因靶向性治疗慢性进展型多发性硬化[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
7 胡晓敏;袁永明;袁志明;;苏云金杆菌杀虫质粒在敏感昆虫体内体外的结合转移研究[A];第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议论文摘要集[C];2006年
8 程时丹;王晓瑾;乔敏敏;周季兰;吴云林;;Smad4基因抑制人类胃癌细胞株生长作用的实验研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
9 耿春银;李德莉;刘佳佳;陈大雷;杨连玉;;猪Ghrelin基因质粒对小鼠的促生长效应研究[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
10 尹志康;吴小候;罗春丽;何云锋;刘川;杜虎;;TGF-β1基因特异性shRNA真核表达载体的构建及其基因抑制作用[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 刘霞;美利用质粒制造诱导多功能干细胞[N];科技日报;2009年
2 农业部饲料工业中心 陆文清博士;使用饲用抗生素危害到底有多大[N];中国畜牧兽医报;2005年
3 Wang Johson译;非病毒游离质粒基因载体技术获美国专利[N];中国高新技术产业导报;2002年
4 直尺编译;健康新武器——D N A疫苗[N];科技日报;2002年
5 卢苏燕;研究显示鼠疫杆菌有向抗多药性发展的危险[N];医药经济报;2007年
6 吴一福;PTFE血管材料可携载VEGF基因转染[N];中国医药报;2006年
7 付毅飞;建造极端微生物“细胞工厂”[N];科技日报;2004年
8 ;放线共生放线杆菌黏附性研究[N];科技日报;2006年
9 陆志城;安普霉素让抗生素寿命延续[N];医药经济报;2004年
10 上海医药工业研究院信息中心 郭文;DNA疫苗欲做抗击流感的急先锋[N];医药经济报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 钟春英;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520内生质粒生物量的鉴定[D];华中农业大学;2010年
2 梁小燕;抑癌基因LKB1调控细胞周期分子机制研究[D];重庆医科大学;2010年
3 徐元喜;Cytophaga hutchinsonii遗传操作体系的建立及应用[D];山东大学;2012年
4 徐娟;肠道病毒EV71 VP1基因的优化和免疫原性的研究[D];南京医科大学;2011年
5 杨波;阻断TGF-β信号通路增强NK-92细胞过继性治疗的抗肿瘤效应[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
6 王荫榆;有关乳酸菌质粒和表达体系的研究[D];复旦大学;2003年
7 马永平;含质粒人两歧双歧杆菌的分离、质粒测序和生物信息学分析[D];重庆医科大学;2005年
8 孙江滨;重组Psilencer1.0-U6-siRNA-STAT3对动脉化静脉壁内膜异常增生抑制作用的实验研究[D];吉林大学;2010年
9 赵旺;肌细胞增强因子2A基因突变调控血管平滑肌细胞机制及干预研究[D];中南大学;2010年
10 郭素霞;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1518新型杀线虫晶体蛋白基因分离的新策略[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘春;硝基苯降解菌Pseudomonas XN-1细胞质粒的提取和特性研究[D];大连理工大学;2002年
2 董流昕;转基因抗草甘膦大豆参比分子的构建[D];北京林业大学;2005年
3 曹鹏;人脑胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)原核表达载体的构建及蛋白表达的鉴定[D];第二军医大学;2009年
4 胡伶俐;牛杀菌—通透性增加蛋白和防御素基因融合质粒的构建及其在大肠杆菌中表达[D];华中农业大学;2010年
5 佘其美;TNF-α、胰岛素和地塞米松对稳定表达人脂联素3T3-L1细胞PPAR-γ2mRNA表达的影响[D];安徽医科大学;2005年
6 牛牛;COX-2基因和肺癌相关性研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2006年
7 田海山;酸性成纤维细胞生长因子发酵工艺的优化[D];吉林大学;2007年
8 蔡燕飞;P-糖蛋白mRNA中IRES序列分析及与肿瘤多药耐药性关系研究[D];江南大学;2011年
9 高卓;侧脑室注射质粒pLXSN介导Bcl-2基因对大鼠脑梗塞及BDNF影响的研究[D];中国医科大学;2004年
10 黄强;犬经皮插管肾动脉注射人HGF基因的实验研究[D];南京医科大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026