杜氏盐藻外源基因转化系统的建立

李克锦

【摘要】： 本文以杜氏盐藻(Dunaliella salina)为研究对象，建立了杜氏盐藻外源基因的转化系统，为下一步杜氏盐藻转化植酸酶基因的研究奠定了基础。本文主要的研究内容及结果如下：本文从盐藻培养液中分离到5种菌，选择了卡那霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素、氯霉素、链霉素、新霉素7种常用的抗生素对其进行敏感性实验，筛选出链霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素，氯霉素5种菌较敏感的抗生素，并通过实验得出这几种抗生素之间的作用是累加的。考察了不同浓度的链霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素，氯霉素对盐藻生长状况的影响，结果表明氯霉素对盐藻的生长有很大的抑制作用，盐藻对于氯霉素最为敏感，而其它4种抗生素浓度达到1600μg／mL，培养10天时，藻的生长状态仍较好；选用链霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素进行联合除菌，结果显示当每种抗生素的浓度均为800μg／mL、处理3次后，用平板法分离纯化盐藻可得到无菌的盐藻。选择了氯霉素、G418、潮霉素3种抗生素做盐藻基因工程选择标记实验。结果表明氯霉素可以作为盐藻基因工程的筛选抗生素，CAT基因为其阳性筛选标记基因，固体培养基筛选浓度为80μg／mL。优化了无菌盐藻的培养条件。对C、N、P三种大量元素和维生素进行了优化。在单因素实验的基础上做了四因素三水平正交实验，得到优化组合为NaNO_3和NaH_2PO_4为f／2培养基的10倍、NaHCO_30.4g/L、V_(B1)100μg／L、V_(B12)1.0μg/L，其他营养盐按f／2培养基添加。利用电击法将GFP基因转入到无菌杜氏盐藻细胞中，研究了电击转化条件、藻的生长状态对转化率的影响，结果得出培养7天的盐藻细胞在3KV的脉冲电压、3ms的脉冲时间下可获得较高的转化率，为转化的最优条件。

【关键词】：杜氏盐藻 无菌化 优化培养 选择标记
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：Q943.2
【目录】：

下载全文更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

	【引证文献】
	【引证文献】

中国硕士学位论文全文数据库

前4条

1	曾磊;杜氏盐藻叶绿体双筛选载体pchlN-CAT-BAR的构建及转化[D];郑州大学;2010年
2	张翅;杜氏盐藻（Dunaliella salina）cDNA文库构建及表达序列标签分析[D];华中科技大学;2009年
3	张翅;杜氏盐藻（Dunaliellasalina）cDNA文库构建及表达序列标签分析[D];华中科技大学;2009年
4	卢水秀;雨生红球藻表达载体的构建与电转化研究[D];华南理工大学;2010年

	【参考文献】
	【参考文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	李斌,李涛,童雪梅,王东辉,赵进东,吴光耀;蓝藻光合基因psaC在酵母中的转化和表达[J];北京大学学报(自然科学版);2001年06期
2	张晓宁,万由衷,林长发,张亚兰,李彦舫,沈大棱;盐胁迫下盐藻特异表达基因片段的克隆[J];复旦学报(自然科学版);2001年05期
3	张晓宁,王昊,陈火英,沈大棱;盐藻启动子活性片段的克隆及序列分析[J];复旦学报(自然科学版);2002年02期
4	王高歌,张宝红,茅云翔,臧晓南,张学成;无菌钝顶螺旋藻单细胞的制备和再生[J];高技术通讯;2001年04期
5	耿德贵,王义琴,李文彬,孙勇如;GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达[J];高技术通讯;2002年02期
6	姜国忠,袁保梅,范天黎,薛乐勋;简并引物在克隆盐藻热休克蛋白70基因家族中的应用[J];郑州大学学报(医学版);2003年06期
7	秦松,童顺,王希华,武建秋,张培军,曾呈奎,吴光耀,崔武,李亚菲;钝顶螺旋藻质粒的电镜观察及杂交研究[J];海洋与湖沼;1994年05期
8	刘建国,吴超元;盐藻和β-胡萝卜素研究述评[J];海洋与湖沼;1995年03期
9	刘广发,楼士林,李庆顺,赖瑞卿;杜氏藻与大肠杆菌跨界融合初探[J];海洋科学;1993年04期
10	林伟;几种海洋微藻的无菌化培养[J];海洋科学;2000年10期

	【共引文献】
	【共引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
2	王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
3	康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
4	安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
5	朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
6	毕玉平,廖俊杰,单雷,王兴军,徐平丽;番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究[J];山东农业科学;1997年06期
7	单雷,毕玉平,王兴军,徐平丽,李广存;双抗TMV和CMV转基因番茄后代的遗传分析[J];山东农业科学;1998年04期
8	葛宏华,孙莉宁,张其瑞;家蚕血淋巴蛋白的发育变化和BmLSP的纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2001年03期
9	王欢;曹光辉;高艳萍;王起华;;包埋-脱水法常温和常低温保存条斑紫菜自由丝状体[J];安徽农学通报;2007年23期
10	王北艳;曹宁;汤晖;;苜蓿中华根瘤菌电转条件的优化[J];安徽农学通报;2008年11期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
2	唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集（上册）[C];2007年
3	樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
4	刘晓丽;杨锡洪;;链状亚历山大藻的培养及麻痹性贝类毒素的HPLC检测[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
5	商庆龙;谷鸿喜;;HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年
6	陈振文;赵太云;孙贺娟;路静;王迎;孟霞;曹争和;王钜;;微卫星DNA与生化标记分析对长爪沙鼠群体遗传分析的比较[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
7	林栖凤;李冠一;周海龙;;第五章若干问题的探讨[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
8	方孝东;黄薇;李冠一;林栖凤;;盐生植物耐盐相关基因的分离与识别[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
9	王革;王妍;何凌冰;乔刚;朱一松;王君艳;;酵母分泌表达重组人神经生长因子[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
10	任华;顾建华;孙竹筠;沈万赟;吴鹰;周忠良;;RT-PCR法检测斑马鱼(Danio rerio)卵黄蛋白原mRNA表达[A];2005年上海市动物学会学术会议论文集[C];2005年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	颜日明;聚球藻7942光自养本征生长动力学及其能量利用研究[D];华东理工大学;2011年
2	吴迪;微藻综合品质信息快速无损获取技术和方法研究[D];浙江大学;2011年
3	崔玉琳;亚心型扁藻细胞核与叶绿体稳定转化系统的构建[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2011年
4	隋娟;褐牙鲆与夏鲆杂交及回交子代的早期发育及细胞遗传学研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2011年
5	文世勇;基于营养盐的赤潮灾害风险评估技术与应用研究[D];大连海事大学;2010年
6	李世国;裙带菜减数分裂相关基因UpMND1的克隆、鉴定与功能分析[D];辽宁师范大学;2011年
7	朱跃辉;聚球蓝藻7002类胡萝卜素的生理功能及其代谢工程研究[D];华南理工大学;2011年
8	陈辉;杜氏盐藻耐盐渗透调节与Ca~（2+）介导的渗透信号传导[D];华南理工大学;2011年
9	陈政强;不同条件下九孔鲍免疫防御因子的差异性[D];中国海洋大学;2009年
10	苏青福;生态工业园风险识别与废弃物交换价格研究[D];天津大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
2	曾磊;杜氏盐藻叶绿体双筛选载体pchlN-CAT-BAR的构建及转化[D];郑州大学;2010年
3	孔凡敏;产油脂酵母菌株的选育[D];山东农业大学;2010年
4	武昌俊;杜氏盐藻高产玉米黄素突变株的诱变筛选及生物学特性的研究[D];安徽农业大学;2010年
5	孙琦;水稻OsCOI基因表达载体构建及其遗传转化[D];甘肃农业大学;2010年
6	毕晓琳;海洋知识溢出及其对沿海区域经济发展的效应研究[D];中国海洋大学;2010年
7	高莉丽;微藻的溶气气浮采收技术研究[D];中国海洋大学;2010年
8	江怀真;培养条件对海水小球藻生长及油脂积累的影响[D];中国海洋大学;2010年
9	潘瑾;温度和硅胁迫对三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）生长和脂肪酸组成的初步研究[D];中国海洋大学;2010年
10	吴亮;亲油缓释肥料的制备及在溢油污染潮间带生物修复中的应用[D];中国海洋大学;2010年

	【同被引文献】
	【同被引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	张静霞;;小球藻去除污水中氮磷能力的研究[J];安徽农业科学;2009年32期
2	吴海燕;谢应桂;何雄斌;滕淑静;;快速准确制备大肠杆菌高效感受态细胞中有关OD_(600)值的探讨[J];湘南学院学报;2006年03期
3	张晓宁,万由衷,林长发,张亚兰,李彦舫,沈大棱;盐胁迫下盐藻特异表达基因片段的克隆[J];复旦学报(自然科学版);2001年05期
4	耿德贵,王义琴,李文彬,孙勇如;GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达[J];高技术通讯;2002年02期
5	于道展,秦松,孙国琼,曾呈奎;β-半乳糖苷酶基因(lacZ)在大型经济海藻裙带菜中的瞬间表达[J];高技术通讯;2002年08期
6	鲁照明;刘红涛;臧卫东;薛乐勋;;杜氏盐藻psaB基因cDNA克隆及系统进化分析(英文)[J];广西植物;2007年02期
7	陈鸿雁,李强,翟晓丹;单细胞蛋白饲料——藻体饲料[J];养殖技术顾问;2002年08期
8	王宁,刘红涛,侯桂琴,王天云,柴玉荣,薛乐勋;杜氏盐藻基因组文库的构建[J];河南肿瘤学杂志;2005年02期
9	谢华,姜国忠,吕玉民,牛向丽,许培荣,王建民,薛乐勋;杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段的克隆与分析[J];郑州大学学报(医学版);2004年01期
10	潘卫东,张贵星,袁保梅,李杰,王建民,薛乐勋;杜氏盐藻叶绿体16S rRNA基因的克隆[J];郑州大学学报(医学版);2004年01期

中国博士学位论文全文数据库

前7条

1	滕长英;雨生红球藻控制虾青素合成的关键酶基因的转录调控元件[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2003年
2	张贵星;光诱导表达载体的构建及其在盐藻除草剂抗性转化中的应用[D];郑州大学;2003年
3	潘卫东;杜氏盐藻（Dunaliella salina）叶绿体转化研究[D];郑州大学;2003年
4	林伟;海洋微藻与细菌相互关系的研究—正负相互作用的几个例证[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2005年
5	孟春晓;雨生红球藻中虾青素合成关键酶基因的顺式作用元件研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2005年
6	王天云;杜氏盐藻核基质结合区的分离及其对转基因的表达调控作用[D];郑州大学;2005年
7	王逸云;小球藻外源基因转化系统的建立及其表达植酸酶的研究[D];大连理工大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库

前7条

1	曹军平;莱茵衣藻外源基因高效转化系统的建立及金藻转化方法的研究[D];中国农业科学院;2000年
2	牛向丽;杜氏盐藻生物学特征及表达载体pGEM-D18S-BAR的构建[D];郑州大学;2003年
3	汪本凡;杜氏盐藻纯化及生物学特性研究[D];安徽农业大学;2004年
4	张文平;莱茵衣藻遗传转化条件的优化及表皮生长因子基因的转化[D];新疆大学;2005年
5	魏炜;雨生红球藻中虾青素合成相关酶基因的转录调控序列分析[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2006年
6	曲东京;杜氏盐藻完整叶绿体的分离和叶绿体转化体系的构建[D];郑州大学;2007年
7	刘国宪;狂犬病G，N抗原基因在衣藻叶绿体中的定点重组和表达[D];首都师范大学;2009年

	【二级参考文献】
	【二级参考文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	陆杨森,唐欣昀;螺旋藻室外长期培养及其养分动态[J];安徽农学院学报;1991年02期
2	张晓宁,万由衷,林长发,张亚兰,李彦舫,沈大棱;盐胁迫下盐藻特异表达基因片段的克隆[J];复旦学报(自然科学版);2001年05期
3	何连金;;螺旋藻的培养方法和应用效果的初步探讨[J];福建水产;1988年02期
4	王义琴,陈颖,白琴华,赵世民,李文彬,孙勇如;以小球藻为载体生产兔防御素的研究[J];高技术通讯;2001年09期
5	耿德贵,王义琴,李文彬,孙勇如;GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达[J];高技术通讯;2002年02期
6	梁利群,孙效文,沈俊宝,闫学春,曹鼎臣;转基因“超级鲤”的构建[J];高技术通讯;1999年04期
7	方孝东,吴多桂,林栖凤,李冠一;一种适用于盐生植物的RNA提取方法[J];海南大学学报(自然科学版);1998年04期
8	姜建国,姚汝华;五种盐藻生化组成及β-胡萝卜素异构体分析[J];华南理工大学学报(自然科学版);1997年10期
9	胡天赐,杨世杰,毛炎麟;γ射线对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)的生物学效应[J];核农学报;1990年02期
10	王宪,李文权;聚生角毛藻Chaetoceros socialis生长的动力学模式初探[J];海洋通报;1992年04期

	【相似文献】
	【相似文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	李大鹏,熊艳;裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体对四种抗生素的敏感性研究[J];海洋与湖沼;2005年03期
2	唐颖;王长海;李克锦;黄笛;;杜氏盐藻无菌纯化研究[J];大连理工大学学报;2010年06期
3	谢华,姜国忠,吕玉民,牛向丽,许培荣,王建民,薛乐勋;杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段的克隆与分析[J];郑州大学学报(医学版);2004年01期
4	柴玉荣,王天云,薛乐勋;新型生物反应器——杜氏盐藻研究进展[J];中国生物工程杂志;2004年02期
5	姜国忠,吕玉民,牛向丽,薛乐勋;盐藻肌动蛋白基因启动子驱动的bar基因表达作为核转化筛选标记(英文)[J];遗传学报;2005年04期
6	柴玉荣,王天云,侯桂琴,侯卫红,谢华,袁保梅,王建民,薛乐勋;杜氏盐藻荧光素酶基因表达载体的构建[J];郑州大学学报(医学版);2004年01期
7	吕玉民,姜国忠,牛向丽,侯桂琴,张贵星,薛乐勋;杜氏盐藻两种碳酸酐酶基因启动子的克隆和功能研究[J];遗传学报;2004年10期
8	徐坤,李琳,欧阳光察,焦新之;杜氏盐藻(Dunalielle　salina)盐适应相关蛋白[J];植物生理学报;1998年04期
9	潘卫东,张娟,张贵星,袁保梅,王建民,薛乐勋;藻类及陆生高等植物叶绿体16Sr RNA基因进化谱系及同源性分析[J];郑州大学学报(医学版);2004年01期
10	马淑英,黄阳成,杨小贺,武维华;高浓度钾对杜氏盐藻叶绿体超微结构的影响(英文)[J];植物学报;1999年12期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	罗晓丽;肖娟丽;张安红;王志安;吴家和;;甘露糖磷酸异构酶基因为选择标记的高效棉花遗传转化体系的建立[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
2	洪利亚;徐仰仓;;两种碘盐对杜氏盐藻生长和生物富碘作用的影响[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
3	陈辉;姜建国;王强;;盐度变化对杜氏盐藻细胞生长和3-磷酸甘油脱氢酶同工酶活性的影响[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
4	王强;姜建国;陈辉;;盐度对杜氏盐藻中一种NAD~+依赖的3-磷酸甘油脱氢酶基因表达的影响[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
5	刘承帅;张丽佳;李芳柏;;锰氧化物界面磺胺嘧啶的氧化降解动力学与其物理化学性质的相关性研究[A];第五届全国环境化学大会摘要集[C];2009年
6	张玉仙;李长军;王文利;张凡健;;“仔畜壮”对兔子大肠杆菌病防治效果试验[A];京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛论文集[C];2008年
7	姜清彬;仲崇禄;曾炳山;张勇;陈羽;陈珍;梁俊峰;C.Franche;D.Bogusz;;细枝木麻黄遗传转化中抗生素敏感性研究[A];第二届中国林业学术大会——S2 功能基因组时代的林木遗传与改良论文集[C];2009年
8	梁爱华;大野尚仁;宿前利郎;;溶菌酶对头孢他啶诱导的细菌内毒素释放的抑制作用[A];1999中药研究论文集[C];2000年
9	梁爱华;大野尚仁;宿前利郎;;头孢他啶诱导的细菌溶解和内毒素释放[A];1999中药研究论文集[C];2000年
10	师理;;抗生素对马铃薯脱毒苗快繁效应的影响[A];马铃薯产业与粮食安全（2009）[C];2009年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	本报记者叶依;莫让抗生素变成“强弩之末”[N];健康时报;2003年
2	本报特约撰稿人朱军生;一季度抗生素市场更趋理性[N];医药经济报;2005年
3	记者　刘颖;动物也吃“黄金搭档”[N];解放日报;2006年
4	于洁　红韬;抗生素时代de辉煌yu忧患[N];中国教育报;2003年
5	;抗生素：让人欢喜让人忧[N];河北日报;2004年
6	徐铮奎法新;抗生素再不能“为所欲为”[N];医药经济报;2002年
7	本报记者王军戴丹（实习）;想像中药“抗生素”[N];医药经济报;2004年
8	仇逸叶国标;医院内使用抗生素存在三重误区[N];医药经济报;2004年
9	河南科技学院崔艳红博士;扼制细菌抗药性的主动权在哪里？[N];中国畜牧兽医报;2006年
10	李芳;用抗生素继发腹泻中医治疗三法[N];农村医药报（汉）;2007年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	谢华;杜氏盐藻（Dunaliella salina）硝酸盐还原酶基因的克隆、表达及功能鉴定[D];郑州大学;2004年
2	潘卫东;杜氏盐藻（Dunaliella salina）叶绿体转化研究[D];郑州大学;2003年
3	陈辉;杜氏盐藻耐盐渗透调节与Ca~（2+）介导的渗透信号传导[D];华南理工大学;2011年
4	王逸云;小球藻外源基因转化系统的建立及其表达植酸酶的研究[D];大连理工大学;2006年
5	崔柳青;杜氏盐藻盐适应蛋白GPI基因的鉴定及其对食管鳞癌细胞侵袭的影响[D];郑州大学;2010年
6	姜国忠;杜氏盐藻hsp70基因的克隆及其肌动蛋白基因启动子驱动bar基因作为转基因筛选标记[D];郑州大学;2004年
7	吕玉民;杜氏盐藻（Dunaliella salina）两种碳酸酐酶基因的克隆和启动子功能研究[D];郑州大学;2003年
8	刘贤德;杜氏盐藻中捕光天线色素蛋白磷酸化水平的调节[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2005年
9	王天云;杜氏盐藻核基质结合区的分离及其对转基因的表达调控作用[D];郑州大学;2005年
10	柴玉荣;杜氏盐藻的RbcS基因及其调控区的克隆和功能鉴定[D];郑州大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	李克锦;杜氏盐藻外源基因转化系统的建立[D];大连理工大学;2007年
2	牛向丽;杜氏盐藻生物学特征及表达载体pGEM-D18S-BAR的构建[D];郑州大学;2003年
3	牟春琳;杜氏盐藻番茄红素β环化酶基因敲除的研究[D];南开大学;2010年
4	汪本凡;杜氏盐藻纯化及生物学特性研究[D];安徽农业大学;2004年
5	闫红霞;杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能互补分析[D];郑州大学;2007年
6	肖群;超声波对杜氏盐藻的辐射刺激效应研究[D];暨南大学;2010年
7	吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
8	武昌俊;杜氏盐藻高产玉米黄素突变株的诱变筛选及生物学特性的研究[D];安徽农业大学;2010年
9	刘冠楠;杜氏盐藻3-磷酸甘油脱氢酶基因的克隆、鉴定及表达纯化[D];华南理工大学;2011年
10	王俊;杜氏盐藻、青岛大扁藻对营养盐变化的生理生态学响应机制[D];浙江海洋学院;2012年

	快捷付款方式		订购知网充值卡	订购热线	帮助中心
	银行卡支付宝神州行	知网卡手机短信更多>>	免费送卡上门银行汇款购卡邮局汇款购卡	400-819-9993 010-62791813 010-62985026	常见问题在线咨询阅读器下载	广告服务知网卡新手指南