收藏本站
《大连理工大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

抗奶牛乳腺炎特异性卵黄抗体的制备及活性研究

甄宇红  
【摘要】: 奶牛乳腺炎是一种给奶牛养殖业造成巨大经济损失的疾病,主要采用抗生素治疗。抗生素疗法会引起动物体内甚至牛奶中药物残留和细菌耐药性的增强,间接危害人类健康。因此,寻找一种安全、高效的抗生素替代品成为一个亟待解决的问题。特异性卵黄抗体(Egg yolk immunoglobulin,IgY)可治疗由细菌或病毒感染引起的疾病,具有安全无残留、不产生抗药性、价廉易得等优点,是一种具有广阔应用前景的抗生素替代品。本研究制备了抗奶牛乳腺炎主要致病菌——金黄色葡萄球菌和大肠杆菌特异性卵黄抗体,考察了抗体的体外抑菌活性、对吞噬细胞的吞噬调理作用及对奶牛乳腺炎的治疗作用。 分别以灭活的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌免疫蛋鸡制备卵黄抗体。ELISA检测表明,抗体最高效价可达25600,抗体高效价(≥6400)可持续100天;抗原浓度、蛋鸡日龄和佐剂等影响免疫效果。特异性IgY含量随时间变化趋势与抗体效价变化趋势基本一致,每毫升卵黄液中金黄色葡萄球菌和大肠杆菌特异性IgY的最高含量分别可达1.86mg和1.88 mg,总IgY的平均含量分别为9.82 mg和9.95 mg。采用水稀释—盐析—超滤—凝胶过滤技术从卵黄中分离纯化IgY,经超滤、凝胶过滤后抗体纯度分别可达87.09%和94.52%,回收率分别为100.6 mg/egg和27.68 mg/egg。水稀释—盐析—超滤法所得抗体纯度高、产量大,适于大规模分离纯化。 体外抑菌实验表明,两种特异性IgY均以剂量依赖方式抑制抗原菌在液体培养基中的生长,大肠杆菌特异性IgY浓度为20 mg/mL,金黄色葡萄球菌特异性IgY浓度为10mg/mL时能完全抑制细菌在液体培养基中的生长。两种特异性IgY对牛奶中分离的5株大肠杆菌和5株金黄色葡萄球菌分别具有生长抑制活性。免疫荧光和免疫电镜结果表明特异性IgY与细菌结合,使细菌表面结构发生改变。 细菌经荧光素标记,采用流式细胞技术检测特异性IgY对奶牛体内吞噬细胞噬菌作用的影响。特异性IgY浓度为1 mg/mL时对吞噬细胞的吞噬促进作用最强。该浓度IgY使外周血PMN吞噬金黄色葡萄球菌的吞噬率由60.2%升高到90.5%,乳中PMN吞噬金黄色葡萄球菌的吞噬率由52.95%升高到82.45%;乳中PMN和Mφ吞噬金黄色葡萄球菌的吞噬率分别提高29.5%和27.66%,吞噬大肠杆菌的吞噬率分别提高26.5%和26.36%,IgY对两种细胞的吞噬促进作用差异不明显(p>0.05)。 乳池内分别注射抗金黄色葡萄球菌特异性IgY(200 mg)和青霉素(1000 mg)治疗金黄色葡萄球菌引起的实验性乳腺炎和临床型乳腺炎,6天治疗期内牛奶颜色和奶中凝块得到明显改善;体细胞数和细菌计数显著降低。IgY和青霉素对实验性乳腺炎的治愈率分别为83.3%和66.7%,对临床型乳腺炎的治愈率分别为50%和33.3%。 综上所述,本研究成功制备出抗奶牛乳腺炎致病菌特异性IgY,考察了其体内外活性,并证明了其对奶牛乳腺炎的疗效优于青霉素。为特异性IgY替代抗生素治疗奶牛乳腺炎提供了依据。
【学位授予单位】:大连理工大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S858.23

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 彭杰荣;宋玉胜;;奶牛乳腺炎的诊治[J];畜禽业;2011年08期
2 杨保荣;刘鹏;;奶牛乳腺炎的病因、诊断及综合防治[J];养殖技术顾问;2011年08期
3 靳朝晖;;乳酸链球菌菌素治疗奶牛隐性乳腺炎的探究[J];科技资讯;2011年23期
4 朱永平;;中药治疗奶牛乳腺炎的效果观察[J];北方牧业;2011年15期
5 田崇刚;;奶牛乳腺炎的综合防治[J];农业技术与装备;2011年11期
6 赵玉明;丁守强;;奶牛乳腺炎诊断方法的研究进展[J];山东畜牧兽医;2011年08期
7 代敏;彭成;万峰;陈丹丹;;5味化湿药对奶牛乳腺炎病原菌体外抗菌活性的比较[J];江苏农业科学;2011年04期
8 张磊;冯雪领;秦建华;;奶牛乳腺炎大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验[J];广东农业科学;2011年13期
9 周雷;王洪梅;王长法;柳楠;侯明海;李秋玲;仲跻峰;;中国荷斯坦牛CXCR1基因第二外显子新SNPs与乳腺炎的关联分析[J];畜牧兽医学报;2011年08期
10 唐吉思;吴金花;布日额;张海宝;薛晓阳;刘洋;张忠祥;;牛乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆及序列分析[J];中国动物传染病学报;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王春璈;;奶牛乳腺炎的诊断与治疗[A];中国奶业协会年会论文集2008(上册)[C];2008年
2 杨磊;王凤龙;;含有TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁对奶牛乳腺上皮细胞凋亡影响[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
3 周雷;王洪梅;王长法;李秋玲;侯明海;仲跻峰;柳楠;;趋化因子受体CXCR1基因多态性与奶牛乳腺炎的关联性研究[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年
4 程结南;蔡亚非;王根林;;脂多糖结合蛋白(LBP)基因的多态性与奶牛乳腺炎相关联[A];中国畜牧兽医学会养牛学分会2011年学术研讨会论文集[C];2011年
5 刘佩红;黄忠;王建;沈莉萍;;奶牛乳腺炎病原的分离鉴定及耐药性分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
6 孙怀昌;;奶牛乳腺炎的基因治疗研究[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
7 王成祖;张瑾;刘池波;刘文琪;;抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定及其初步应用[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年
8 曹丙蕾;王长法;高运东;杨少华;杨宏军;仲跻峰;赵宏坤;;后海穴免疫与常规免疫奶牛乳腺炎三联灭活苗的效力比较[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
9 尹荣兰;张乃生;杨正涛;张艳晶;;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌DNA疫苗的研究进展[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
10 张海宝;布日额;郎景民;唐吉思;张婷;;牛乳中无乳链球菌的公共卫生意义及其表面蛋白的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 何定明;高利多疫苗有效预防奶牛乳腺炎[N];农民日报;2004年
2 记者 付占营;赤峰博恩药业奶牛乳腺炎疫苗产业化项目取得阶段性成果[N];赤峰日报;2011年
3 本报记者 潘莉莉;赛姆生物开发生产出特异性卵黄免疫球蛋白[N];中国高新技术产业导报;2003年
4 本报记者 陶媛慧;“隐性抗生素”也疯狂[N];友报;2010年
5 王金宝;新法防治鸡疫病有高效[N];中国畜牧兽医报;2007年
6 立荣;浅析百佳益饲料在养殖中的应用[N];市场报;2006年
7 徐明书 本报记者 魏宇娜;穿针引线借力而行[N];大连日报;2006年
8 谢运 谢庆梅;乳腺炎的防治[N];中国畜牧报;2004年
9 本报记者 彭会安 王树良;这里天高海阔[N];中国高新技术产业导报;2003年
10 本报记者 刘影;生物酶制品挽救抗生素危机[N];中国经营报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 甄宇红;抗奶牛乳腺炎特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D];大连理工大学;2008年
2 尹召华;奶牛乳腺炎的病原菌分离鉴定、毒力基因检测与基因治疗研究[D];扬州大学;2009年
3 杨丰利;南宁市郊奶牛乳腺炎相关研究及其对繁殖性能的影响[D];广西大学;2011年
4 代敏;TCMAI对奶牛乳腺炎耐药菌的抗菌活性及抗菌作用机制研究[D];成都中医药大学;2010年
5 李晓宇;口服微囊化卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备及性能研究[D];大连理工大学;2008年
6 尹荣兰;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗构建及实验免疫[D];吉林大学;2009年
7 赵中利;MBL2基因与奶牛乳腺炎抗性研究[D];吉林大学;2012年
8 高栋;混合模式扩张床吸附剂的制备及其用于蛋白质分离的研究[D];浙江大学;2007年
9 夏海锋;纤维素基复合层析基质的功能化与应用基础研究[D];浙江大学;2008年
10 雷家慧;基于IgY的免疫磁珠夹心ELISA法检测日本血吸虫循环抗原的研究[D];华中科技大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王宇;抗奶牛乳腺炎特异性IgY的制备及活性研究[D];大连理工大学;2006年
2 郭洁;致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D];大连理工大学;2007年
3 何挺;奶牛乳腺炎主要病原菌的调查[D];浙江大学;2010年
4 刘本君;不同程度奶牛乳腺炎相关因子的研究[D];东北农业大学;2010年
5 王洪伟;不同程度奶牛乳腺炎乳中相关酶与急性蛋白的研究[D];东北农业大学;2010年
6 冯忠义;泰安市奶牛乳腺炎发病规律调查、病原分离鉴定和治疗措施[D];山东农业大学;2009年
7 南海;上海地区奶牛乳腺炎病原菌的分离鉴定及耐药性分析[D];上海交通大学;2011年
8 郭斌;乳肿消膏治疗奶牛乳腺炎的临床疗效及其作用机理的初步研究[D];东北农业大学;2010年
9 闫先峰;不同饲养模式的奶牛乳腺炎发病情况及其主要病原菌的调查[D];山东农业大学;2009年
10 夏志;奶牛乳腺炎炎症因子检测与产奶性能的关联分析[D];西北农林科技大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026