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《东北大学》 2015年
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PAEs、BPA复合污染对大豆种子生理指标和HSP70基因表达及调控的影响

刘超  
【摘要】:本研究选用25组不同浓度比例的邻苯二钾酸酯(phthalic acid esters,以下简称PAEs)、双酚A(BisphenolA,以下简称BPA)复合处理大豆种子,测定种子体内丙二醛(malondialdehyde,以下简称MAD)含量、可溶性糖含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,以下简称SOD)活性、过氧化物酶(peroxidase,以下简称POD)活性、可溶性蛋白含量、游离脯氨酸含量的变化;通过提取大豆种子的总RNA、反转录合成cDNA第一链、相关引物扩增并克隆HSP70部分序列进行同源序列比对,来确定处理后的大豆种子中是否含有HSP70基因;通过Western Blot技术定性检测处理后大豆种子在发育过程中的HSP70基因蛋白水平的表达情况;通过RT-PCR技术定量检测HSP70基因在不同浓度环境激素复合污染胁迫下的表达差异。本实验研究结果表明:PAEs、BPA单一污染使大豆种子丙二醛含量、可溶性蛋白含量呈现先下降后增加的趋势;可溶性糖、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性呈现先增加后下降的趋势;游离脯氨酸含量呈现逐渐下降的趋势。PAEs、BPA复合污染使大豆种子丙二醛含量、过氧化物酶活性呈现先增加后降低的趋势;可溶性糖、超氧化物歧化酶活性、游离脯氨酸、可溶性蛋白呈现先下降再升高的趋势。本实验基因克隆序列测序结果表明该扩增的片段属于热激蛋白70基因的片段。24个实验组序列比对的结果表明:PAEs、BPA污染对HSP70基因有致突变作用,且复合污染比单一污染危害大。RT-PCR及western blot的结果表明,RT-PCR定量及western blot定性检测结果一致,HSP70基因及蛋白的表达量先升高后下降,与单一浓度环境激素污染相比,复合环境激素污染对大豆种子HSP70呈现低促高抑的作用。
【学位授予单位】:东北大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S565.1;X503.231

【参考文献】
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