海洋厌氧活性菌株系统分类学地位研究及发酵条件优化

【摘要】： 海洋微生物资源是21世纪新资源研究开发的宝库,研究利用海洋微生物及其活性提取物已成为各国研究的热点,海洋厌氧细菌尤其成为了新型抗菌生物活性物质来源的重要研究对象。在特殊的海洋环境下,海洋厌氧细菌往往可以产生特异的次级代谢产物,从中分离得到新型抗菌生物活性化合物的潜力巨大。目前,已知的大多数生物活性化合物的产生往往是菌株特异的,所以通过直接培养分离得到的特异活性菌株,可以从中分离得到新的生物活性化合物。因此,对新药的开发而言,从海洋厌氧细菌中筛选具有抗菌生物活性的菌株是一项重要的前期工作。 本研究通过3种具有选择性的培养基,从大连长海县海域厌氧区的底泥沉积物中富集分离得到多株海洋厌氧细菌,运用“纸片法”对其进行抗菌生物活性筛选,并对活性较强的6株海洋厌氧细菌进行了系统分类学研究。通过16S rDNA全序列测定及分析、形态学特征和生理生化特性研究,确定了6株海洋厌氧活性菌株的系统分类学地位,结果表明:菌株1-1-1和1-3-1属光合细菌;菌株1-6-2属弧菌属(Vibrio);菌株1-6-3、3-2-1和3-2-3属希瓦氏菌属(Shewanella)。 微生物来源生物活性物质的分离往往需要大量的发酵液。因此,本研究对海洋厌氧光合细菌活性菌株1-1-1和1-3-1的最佳发酵培养条件进行了优化。研究结果表明:菌株1-1-1的最优培养条件为:培养基盐度2%,初始pH值为7,培养温度为30℃,培养时间为10d;菌株1-3-1的最优培养条件为:培养基盐度2%,初始pH值为7,培养温度为35℃,培养时间为10d。 本研究对分离得到的海洋厌氧活性菌株进行了科学的菌种鉴定,并通过正交试验和单因素实验优化了海洋厌氧光合细菌菌株1-1-1和1-3-1的发酵培养条件,为生物活性物质的提取和分离奠定了基础。