表面等离子共振技术快速测定海水中天然雌激素方法的研究

【摘要】：近年来，环境内分泌干扰物质(Endocrine disrupting chemicals，EDCs)的污染问题已经日益成为被广泛关注的环境问题。环境中的17β-雌二醇(E_2)和雌酮(E_1)作为最主要的天然雌激素，主要通过人体和生物体以排泄的方式进入环境。它们在自然界中较为普遍，可以通过水、食物、空气等介质直接或间接进入人或动物体内，即使在极低浓度下，也可以显示出极强的内分泌干扰作用，从而对机体的生殖发育、神经系统和免疫系统等产生多方面的影响，因此逐渐成为国内外比较受重视的一类污染物。由于我国是人口和农业大国，由此造成的环境、生态危害问题不容忽视。对其分析方法的深入研究也十分必要。 目前，环境雌激素的检测方法多采用仪器分析法，这些方法通常需要大型仪器以及繁琐的样品前处理技术，并且操作费时，分析成本昂贵，无法实现大批量样本和现场实时监测的需要。因此，开发快速、准确、有效的检测方法可以增强对环境激素的监控能力。本文采用的表面等离子共振技术(Surface plasmon resoumance，SPR)是一种新型免疫传感技术，与其它方法相比具有快速，无需标记，实时监测等特点。 本文建立了表面等离子共振技术测定海水中天然雌激素的方法。利用自组装羧甲基葡聚糖芯片，在芯片表面直接固定雌激素小分子，通过抑制分析法测定溶液中的雌激素。芯片表面通过一定的再生条件可以重复利用，测定一个样品只需15分钟。17β-雌二醇和雌酮的方法检出限分别为0.445μg／L和0.668μg／L。环境样品经酸化，固相萃取(SPE)柱富集，洗脱，干燥等前处理步骤。17β-雌二醇和雌酮的固相萃取加标回收率分别为91.6％～93.1％和92.9％～97.6％，相对标准偏差(RSD)分别为10.9％～15.1％和6.9％～13.0％。并对排污口附近海域的17β-雌二醇和雌酮浓度进行了测定，其浓度检出范围分别在nd～0.114μg／L和nd～0.294μg／L之间。说明天然雌激素可以通过污水排放系统进入海洋环境。