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表面等离子共振技术快速测定海水中天然雌激素方法的研究

张微微  
【摘要】:近年来,环境内分泌干扰物质(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)的污染问题已经日益成为被广泛关注的环境问题。环境中的17β-雌二醇(E_2)和雌酮(E_1)作为最主要的天然雌激素,主要通过人体和生物体以排泄的方式进入环境。它们在自然界中较为普遍,可以通过水、食物、空气等介质直接或间接进入人或动物体内,即使在极低浓度下,也可以显示出极强的内分泌干扰作用,从而对机体的生殖发育、神经系统和免疫系统等产生多方面的影响,因此逐渐成为国内外比较受重视的一类污染物。由于我国是人口和农业大国,由此造成的环境、生态危害问题不容忽视。对其分析方法的深入研究也十分必要。 目前,环境雌激素的检测方法多采用仪器分析法,这些方法通常需要大型仪器以及繁琐的样品前处理技术,并且操作费时,分析成本昂贵,无法实现大批量样本和现场实时监测的需要。因此,开发快速、准确、有效的检测方法可以增强对环境激素的监控能力。本文采用的表面等离子共振技术(Surface plasmon resoumance,SPR)是一种新型免疫传感技术,与其它方法相比具有快速,无需标记,实时监测等特点。 本文建立了表面等离子共振技术测定海水中天然雌激素的方法。利用自组装羧甲基葡聚糖芯片,在芯片表面直接固定雌激素小分子,通过抑制分析法测定溶液中的雌激素。芯片表面通过一定的再生条件可以重复利用,测定一个样品只需15分钟。17β-雌二醇和雌酮的方法检出限分别为0.445μg/L和0.668μg/L。环境样品经酸化,固相萃取(SPE)柱富集,洗脱,干燥等前处理步骤。17β-雌二醇和雌酮的固相萃取加标回收率分别为91.6%~93.1%和92.9%~97.6%,相对标准偏差(RSD)分别为10.9%~15.1%和6.9%~13.0%。并对排污口附近海域的17β-雌二醇和雌酮浓度进行了测定,其浓度检出范围分别在nd~0.114μg/L和nd~0.294μg/L之间。说明天然雌激素可以通过污水排放系统进入海洋环境。


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