收藏本站
《大连工业大学》 2016年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乳杆菌菌株对人肠上皮细胞屏障功能的影响

郭远骥  
【摘要】:致病菌通过黏附小肠上皮细胞导致肠黏膜上皮细胞受损,进而引起肠炎类疾病。本实验研究的大肠杆菌E.coli ATCC25922为主要诱导肠炎产生的致病菌,它可在肠道中大量繁殖黏附小肠细胞壁并导致肠道屏障功能失调,免疫能力下降,破坏正常肠道菌群的平衡引发肠道类疾病。已有报道乳杆菌可抑制致病菌在肠黏膜上皮黏附,对治疗和预防肠炎类疾病有一定的作用。因此本文通过筛选抑制大肠杆菌(E.coli ATCC25922)在人结肠癌细胞HT-29上黏附的有益乳杆菌,研究其抑制大肠杆菌黏附、诱导细胞产生炎性因子及菌株抗氧化的功能。乳杆菌只有在肠道定殖才能发挥其益生功能。本文研究了8株植物乳杆菌黏附性能,得出以下乳杆菌在HT-29单层细胞上的黏附率:2号植物乳杆菌54.5%、15号植物乳杆菌26.5%、16号植物乳杆菌38%、22号植物乳杆菌25%、23号植物乳杆菌30%、25号植物乳杆菌30.7%、33号植物乳杆菌30.8%、35号植物乳杆菌65.2%;35号植物乳杆菌在HT-29细胞上黏附率显著(p0.05)高于其他菌株。初步筛选出35号植物乳杆菌作为目的菌株,标准菌株鼠李糖乳杆菌LGG作为对照菌株,进一步通过排阻、竞争、取代实验研究该菌株干预大肠杆菌(E.coli ATCC25922)在HT-29单层细胞的黏附性能及相关机制。结果显示植物乳杆菌35号对大肠杆菌黏附HT-29单层细胞有较强的抑制作用,抑制排阻、竞争、取代实验黏附率分别为59%、33%、30%;其中35号通过排阻效果抑制大肠杆菌在HT-29细胞上黏附效果显著高于竞争组和取代组(p0.05);研究植物乳杆菌35号菌体表面分子抑制大肠杆菌在HT-29细胞黏附,发现其S-层蛋白作用浓度为100μg/mL时对大肠杆菌的抑制黏附率为55%。其EPS在作用浓度为500μg/mL时对大肠杆菌的抑制黏附率为32%。利用HT-29细胞为肠上皮细胞模型研究乳酸杆菌抑制大肠杆菌诱导HT-29细胞产生促炎细胞因子IL-8的功能,结果显示,本研究所用乳杆菌不会刺激HT-29细胞大量产生IL-8,但是在E.coli ATCC25922的刺激下,HT-29细胞大量分泌IL-8,乳杆菌首先处理HT-29细胞,再加入E.coli ATCC25922,35号菌株和LGG可显著抑制E.coliATCC25922刺激HT-29细胞产生IL-8,抑制率分别为40%和39%;当乳杆菌和E.coli ATCC25922同时加入HT-29细胞抑制产生IL-8抑制率分别为29%和38%;当先通过E.coli ATCC25922感染HT-29细胞,后加入乳杆菌进行干预,发现35号对IL-8的抑制率为4%,抑制产生IL-8效果并不显著,而LGG对IL-8产生的抑制率为30%。在对35号及LGG不同浓度EPS抑制E.coli ATCC25922刺激细胞分泌IL-8的研究中发现,当35号EPS浓度为500μg/mL,对IL-8的抑制率分别为50.1%、46%;当EPS浓度为250μg/mL,对IL-8的抑制率分别为49%、44%;当EPS浓度为125μg/mL,对IL-8的抑制率分别为38.5%、34.6%。乳杆菌及其EPS和E·coli ATCC25922对诱导细胞产生IL-10效果均不显著。最后利用HT-29细胞作为肠上皮细胞模型研究植物乳杆菌35及其EPS抗氧化的性能。结果表明植物乳杆菌35号及EPS可抑制H2O2对HT-29细胞的氧化损伤,HT-29细胞存活率提高17.56%。植物乳杆菌35号及其EPS增加了HT-29细胞SOD、GSH-Px的活性,提高细胞的抗氧化能力,并减少MDA的含量,降低了H2O2引起的HT-29细胞的氧化损伤程度。从8株菌株筛选出的植物乳杆菌35号具有较强的黏附细胞能力、抑菌黏附能力及抗炎抗氧化性,是一株具有潜在益生功能的菌株。
【学位授予单位】:大连工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:TS201.3

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 罗春丽;王林;李杏;张子程;张久亮;;紫薯花青素体外抗氧化及对H_2O_2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用[J];食品科学;2015年17期
2 张英春;王琳琳;马放;张兰威;;乳酸菌对肠道炎症调控作用研究[J];中国乳品工业;2015年08期
3 李少慧;张英春;张兰威;马放;;乳酸菌及其代谢产物对肠道炎症的调控作用研究进展[J];食品工业科技;2014年18期
4 源瀚祺;黄庆华;李娆玲;;通过细胞模型体外评价抗氧化活性实验方法研究综述[J];广东药学院学报;2012年02期
5 张迪;籍保平;周峰;吴薇;;食品体外抗氧化能力评价方法探讨[J];北京工商大学学报(自然科学版);2012年01期
6 李鹏成;叶小兰;王志胜;庾庆华;杨倩;;乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的拮抗作用[J];微生物学报;2010年09期
7 ;Adhesion and immunomodulatory effects of Bifidobacterium lactis HN019 on intestinal epithelial cells INT-407[J];World Journal of Gastroenterology;2010年18期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姚瑞祺;高敏;王锋;钱拴提;;山茱萸和枸杞乙醇提取物抗氧化活性研究[J];杨凌职业技术学院学报;2016年04期
2 谢飞;曹纯洁;陈美珍;叶天文;;响应面试验优化末水坛紫菜多糖除蛋白工艺及其抗氧化活性[J];食品科学;2016年22期
3 吴莹;周庆;李杏;张久亮;王奕;;蓝莓花青素与白藜芦醇复配对老龄小鼠抗衰老作用的评价[J];中国医院药学杂志;2016年24期
4 李亚会;吉薇;吉宏武;苏伟明;王晶晶;;远东拟沙丁鱼抗氧化肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的影响[J];广东海洋大学学报;2016年06期
5 江浪;李流连;;乳酸杆菌水平与糖尿病患者糖脂及炎症指标相关性分析[J];检验医学与临床;2016年20期
6 陈铭;薛琪;沈婷;王新风;强倩;罗海青;朱翠玲;吴海峰;吴磊;李鹏霞;胡卫成;;超微粉碎对莲子心活性成分提取率及抗氧化能力的影响[J];现代食品科技;2016年11期
7 朱德全;王茗悦;栗金柳;孟祥晨;程广东;岳丽红;王长平;薛勇;;长双歧杆菌NCC2705分泌蛋白的全基因组预测和功能分析[J];安徽农业科学;2016年20期
8 何传波;米聪;魏好程;熊何健;;紫薯花色苷的提取及抗氧化活性研究[J];热带作物学报;2016年05期
9 张毅;王洪云;钮福祥;孙健;徐飞;朱红;岳瑞雪;;‘宁紫薯1号’花青素组分鉴定及其对大鼠高脂诱导肥胖的预防效果[J];中国农业科学;2016年09期
10 文子义;;炎症性肠炎病患者应用益生菌联合美沙拉嗪的治疗效果分析[J];中国实用医药;2016年08期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢超;孙可一;季晓辉;;副干酪乳酸杆菌通过诱导负调控因子抑制单核巨噬细胞对脂多糖刺激的炎性细胞因子应答[J];南京医科大学学报(自然科学版);2014年09期
2 田喜强;董艳萍;马松艳;刘旭阳;;紫薯花青素的稳定性及其抗氧化性研究[J];食品工业;2014年08期
3 余世界;董卫国;;炎症性肠病发病机制的研究新进展[J];胃肠病学和肝病学杂志;2014年02期
4 盖大伟;郭凌云;刘涛;李玉民;;Notch信号通路在消化系肿瘤中的研究进展[J];中国普外基础与临床杂志;2013年10期
5 吕昱;严敏;;紫薯花色苷的生理功能及分离纯化研究进展[J];食品与机械;2013年04期
6 XU Guang-yong;JIANG Jin-qi;WANG Ming;LI Jie;SU Jing-liang;REN Xiao-ming;;Lactic Acid Reduces LPS-Induced TNF-a and IL-6 mRNA Levels Through Decreasing I?Ba Phosphorylation[J];Journal of Integrative Agriculture;2013年06期
7 白洁;李卫芬;黄琴;崔志文;余东游;黄怡;;几株益生乳酸菌对Caco-2细胞的黏附及其对致病菌黏附的影响[J];动物营养学报;2012年10期
8 杨新笋;雷剑;苏文瑾;郑彬;张良兴;邓辉;;紫心甘薯新品种鄂薯8号的选育与高产栽培技术[J];湖北农业科学;2011年22期
9 杨旸;文利新;;花青素的生理活性及作用[J];湖南农业科学;2011年20期
10 Angelamaria Rizzo;Francesco Pallone;Giovanni Monteleone;Massimo Claudio Fantini;;Intestinal inflammation and colorectal cancer:A doubleedged sword?[J];World Journal of Gastroenterology;2011年26期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金磊;王丽;钟青萍;;植物乳杆菌活的非可培养状态的初步研究[J];食品工业科技;2013年16期
2 沈莲清;苏光耀;王向阳;;植物乳杆菌素研究进展[J];食品与生物技术学报;2006年05期
3 武浩;朱拓;孔艳;陈卫;张灏;杨建磊;;植物乳杆菌的吸收和荧光光谱研究[J];光学学报;2010年01期
4 王水泉;包艳;董喜梅;苏芳;姚国强;张和平;;植物乳杆菌的生理功能及应用[J];中国农业科技导报;2010年04期
5 黄珊珊;刘晶;赵征;;植物乳杆菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种菌体外抗氧化活性的对比研究[J];中国乳品工业;2010年10期
6 张树军;狄建军;白靓;黄凤兰;穆莎茉莉;魏永春;张国文;;泡菜中植物乳杆菌的分离及鉴定[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2012年04期
7 于志会;刘志强;;植物乳杆菌在食品工业中的应用[J];吉林农业科技学院学报;2012年03期
8 孙进;乐国伟;施用晖;苏广伟;;植物乳杆菌黏附大鼠小肠黏液及机制的研究[J];微生物学杂志;2006年02期
9 冉咏兰;;泡菜中高产酸植物乳杆菌的分离及筛选[J];科协论坛(下半月);2011年04期
10 王海宽;陈冲;王应东;沈发迪;;以食品级原料进行植物乳杆菌发酵及其抗真菌活性的研究[J];天津科技大学学报;2014年02期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 肖仔君;钟瑞敏;陈惠音;杨汝德;;植物乳杆菌的研究进展[A];第三届“益生菌、益生元与健康研讨会”论文集[C];2004年
2 张广敏;王炜;崔卫东;龙萱杞;常伟;包慧芳;詹发强;林瑞峰;杨蓉;;植物乳杆菌高密度增殖发酵条件的研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
3 徐为民;徐幸莲;周光宏;;肉用发酵剂对肠道菌生长影响的研究[A];2001年肉类科技交流会暨中国畜产品加工研究会第三届肉类科技大会论文集[C];2001年
4 杨锡洪;吴海燕;解万翠;杨磊;李思东;陈建娣;;咸鱼风味快速形成技术[A];“亚运食品安全与广东食品产业创新发展”学术研讨会暨2009年广东省食品学会年会论文集[C];2009年
5 黄怡;王士长;刘金萍;;一株植物乳杆菌生物学特性的研究[A];第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集[C];2006年
6 赵运星;肖萍;王菁蕊;王金菊;王艳萍;;植物乳杆菌KF5产抑菌物质发酵条件的研究[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年
7 何志刚;梁璋成;陆东和;任香芸;李维新;林晓姿;;枇杷酒植物乳杆菌R23苹果酸乳酸发酵动力学研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
8 王海宽;陈冲;王应东;;酸粥中抗真菌活性乳酸菌的筛选以及在酸奶中的应用[A];第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文摘要集[C];2013年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 ;植物乳杆菌[N];中国畜牧兽医报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李川;植物乳杆菌NCU116的益生功能及其作用机制[D];南昌大学;2015年
2 张莉;植物乳杆菌的黏附特性研究及其在益生菌干酪中的应用[D];吉林大学;2013年
3 于志会;益生性降胆固醇植物乳杆菌的筛选、发酵特性及体内功效研究[D];吉林大学;2013年
4 王辑;产胞外多糖植物乳杆菌的分离筛选、分子表征及其应用研究[D];吉林大学;2015年
5 冯美琴;植物乳杆菌胞外多糖发酵、结构鉴定及其功能特性研究[D];南京农业大学;2012年
6 田丰伟;缓解氧化应激乳酸菌的筛选、表征和功能评价研究[D];江南大学;2012年
7 赵山山;植物乳杆菌ST-Ⅲ盐应激反应及其协同保护作用的研究[D];江南大学;2014年
8 陈臣;植物乳杆菌ST-Ⅲ全基因组序列分析及其对低聚果糖代谢通路的解析[D];江南大学;2014年
9 李维新;优良MLF乳酸菌选育及其产酶特性研究与应用[D];福建农林大学;2012年
10 胡斌;植物乳杆菌胆盐耐受评价及内在影响因素分析[D];江南大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李爱茹;豆渣固定化植物乳杆菌的特性研究及其干粉制备[D];南京农业大学;2012年
2 梁丛丛;富硒益生菌的筛选及饲喂对蛋硒含量的影响[D];昆明理工大学;2015年
3 侯晓艳;接种不同乳酸菌发酵对泡萝卜品质的影响[D];四川农业大学;2015年
4 夏姣;四川泡菜发酵过程中乳酸菌的动态变化及其对泡菜风味的影响[D];四川农业大学;2014年
5 姜黎明;AI-2/LuxS群体感应系统介导植物乳杆菌益生特性的初步研究[D];昆明理工大学;2014年
6 叶盼;植物乳杆菌发酵苹果汁的生理活性探究[D];华东理工大学;2016年
7 宋云博;植物乳杆菌对枝孢霉菌抑菌活性的研究及其应用[D];西北农林科技大学;2016年
8 卜潇;葡萄酒中植物乳杆菌β-葡萄糖苷酶及其苹果酸—乳酸发酵潜力研究[D];西北农林科技大学;2016年
9 邹婷婷;具有潜在益生特性乳杆菌的筛选及鉴定[D];沈阳农业大学;2016年
10 王茜茜;基于iTRAQ技术对耐盐植物乳杆菌FS5-5的蛋白质组学分析[D];沈阳农业大学;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026