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《大连工业大学》 2016年
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产琼胶酶降解菌的筛选及酶的固定化研究

朱磊  
【摘要】:琼胶主要由琼脂糖和琼脂胶构成,是目前应用最为普遍的海洋多糖之一。琼脂糖可被琼胶酶降解为琼胶寡糖,具有较强的抗氧化、抗炎等生理活性,是一种非常有开发潜力的低聚糖。本文通过从大连海域海藻中筛选琼胶降解菌,研究其产酶条件以及游离与固定化后琼胶酶酶学性质,为琼胶酶的应用提供一定的依据。其结果如下:(1)利用卢戈氏碘液染色从石花菜等中筛选一琼胶降解菌株,酶活力为2.89U/m L。经16S r DNA鉴定为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.),暂命名为Pseudoalteromonas sp.Z。(2)对琼胶降解菌产酶条件进行了优化及游离琼胶酶酶学性质研究。在转速为140r/min、碳源为琼脂粉、氮源为蛋白胨、接种量为1%、琼脂浓度为0.2%时Pseudoalteromonas sp.Z产琼胶酶酶活力最好;Pseudoalteromonas sp.Z所产琼胶酶酶促反应最适温度为35℃,且酶活在30-40℃范围内稳定性较好;Pseudoalteromonas sp.Z所产琼胶酶酶促反应最适p H为8.0,且酶活在7.5-8.5内稳定性较好;同时Fe2+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、SDS、K+、NH4+对琼胶酶酶促反应均有不同程度的抑制作用。(3)对所产琼胶酶进行了固定化研究。海藻酸钠浓度为40g/L时,固定化酶酶活力为1.39 U/m L;琼胶酶酶液与海藻酸钠溶液体积比为1:3时,酶活力为1.57 U/m L;固定化时间为2h时,酶活力为2.09 U/m L;Ca Cl2浓度为4%时,酶活力为1.92 U/m L;硬化时间为1h时,酶活力为1.88 U/m L;p H为7.5时,固定化酶酶活力为1.95 U/m L。在单因素试验的基础上利用正交实验确定了固定化条件的最优组合为海藻酸钠浓度40g/L、Ca Cl2浓度为4%、琼胶酶酶液与海藻酸钠溶液体积比为1:3,此条件下的酶活力为2.1U/m L,酶活力较单因素时得到了优化。(4)比较了固定化琼胶酶与游离酶的酶学性质。固定化琼胶酶最适反应温度为40℃,且在35-50℃范围内温度稳定性较好,较游离琼胶酶的最适作用温度提高了5℃,优于游离琼胶酶;固定化琼胶酶最适反应p H为8.5,较游离琼胶酶最适作用p H向碱性移动了0.5个单位,且在7.0-9.0范围内p H稳定性较好,p H适应范围较游离琼胶酶广。目前操作稳定性稍差些,重复使用4次后,酶活力从1.92U/m L降至0.58U/m L。
【学位授予单位】:大连工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:Q814.2

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 李江;沙玉杰;;Expression and enzymatic characterization of a cold-adapted β-agarase from Antarctic bacterium Pseudoalteromonas sp.NJ21[J];Chinese Journal of Oceanology and Limnology;2015年02期
2 胡鹏程;陈光;;酶固定化研究进展[J];安徽农业科学;2014年14期
3 张千;曾润颖;;厦门沿岸海域杂色鲍中产琼胶酶菌株的筛选及其酶学性质的研究[J];台湾海峡;2011年02期
4 张斌;孙倩;任延鹏;梁艳明;张婉婧;陈璐;李春;曹红;;海藻酸钠固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的研究[J];中国食品添加剂;2011年01期
5 蔡俊鹏;许少丹;;一株海洋细菌所产琼胶酶酶学特性的研究[J];现代食品科技;2008年12期
6 时岩玲;于文功;路新枝;;海洋紫色杆菌β-琼胶酶的分离纯化及性质[J];武汉大学学报(理学版);2008年04期
7 缪伏荣;李忠荣;;琼胶的降解及其产物的开发应用[J];现代农业科技;2007年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 欧阳茜茜;陈法锦;李思东;李高荣;;琼胶及琼胶寡糖的加工与应用研究进展[J];山东化工;2016年23期
2 李霞;崔文甲;弓志青;王延圣;石贤权;王文亮;;酶的新型固定化方法及其在食品中的应用研究[J];食品工业;2016年10期
3 朱思颖;陈丹琦;梁家铭;李海新;李蓉;柯德森;;腐烂龙须菜自水解生产琼胶寡糖的可行性研究[J];广州化工;2016年18期
4 宗培杰;赵镜锟;张晓东;;从江蓠藻中提取琼胶的工艺研究[J];青岛大学学报(工程技术版);2016年02期
5 丁志新;陈兴麟;周治东;金敏;曾润颖;;深海沉积物中龙须菜降解菌群的筛选与鉴定及多样性分析[J];应用海洋学学报;2016年02期
6 朱磊;薛永常;;琼胶酶酶学研究进展[J];生命的化学;2016年02期
7 彭静;马益华;陈彦;刘聪燕;高霞;周静;;微乳化-凝胶法制备微球固定化蜗牛酶并生物转化淫羊藿苷研究[J];中草药;2015年22期
8 韩尧跃;林娟;张建美;叶秀云;;产琼脂糖酶海洋微生物的筛选鉴定及酶学性质研究[J];福州大学学报(自然科学版);2015年02期
9 杨玎玲;杭华;黄敏;许飞跃;付传香;江波;;明胶-海藻酸钠固定化菊糖果糖转移酶[J];食品与发酵工业;2014年11期
10 刘丽莉;祖国仁;;新型产琼胶酶海洋细菌的筛选和鉴定[J];湖北农业科学;2014年20期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙玉英;张继泉;;吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究[J];淮海工学院学报(自然科学版);2013年03期
2 范超;宋子凤;秦伟捷;蔡耘;钱小红;;新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用[J];色谱;2013年05期
3 宋子凤;张庆林;张养军;秦伟捷;钱小红;;新型鳞片状聚合物修饰硅胶填料固定化酶的制备及其在蛋白质组鉴定中的应用[J];色谱;2012年06期
4 王慧玲;赵燕;李建科;;戊二醛交联法固定扩展青霉脂肪酶的研究[J];食品科技;2012年06期
5 卢斌;柯才焕;杨明;康康;赵晶;;一株高产琼胶酶菌株MA-B22的分子鉴定与产酶条件优化[J];水产学报;2009年06期
6 宋宝东;宋丽;庞春霞;陈二霞;蒋亚庆;;树脂吸附法固定Candida rugosa脂肪酶[J];化学工程;2009年04期
7 宋占科;王小艳;陈国强;李春;;产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆与原核表达[J];化工学报;2008年12期
8 王静;贾英民;邹磊;苗立军;彭红丽;鲁凤娟;;固定化酶生产低乳糖牛乳的研究[J];现代食品科技;2008年08期
9 李炜炜;陆启玉;;酶工程在食品领域的应用研究进展[J];粮油食品科技;2008年03期
10 乔德亮;胡冰;曾晓雄;;酶固定化及其在食品工业中应用新进展[J];食品工业科技;2008年01期
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3 张振清;;纤维素酶活力的计算方程[J];植物生理学通讯;1980年03期
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6 顾谦,滕德斌,严洁,严景华,李纯;加压对茶叶加工中酶活力影响的研究[J];激光生物学报;1999年02期
7 王少华;张红梅;孙强;徐淑霞;贾新成;吴坤;;杂色云芝突变株酶活力变化及遗传特性研究[J];河南农业大学学报;2006年02期
8 陈素丽,黄琼英;文昌鱼酸性磷酸酯酶的化学修饰[J];厦门大学学报(自然科学版);1986年05期
9 张克庞;陈秀芳;;损伤兔大脑皮层表层引起深层酸性及碱性磷酸酶的变化[J];生理学报;1966年01期
10 赵德臻,季川,李士?,许如君;大鼠再生肝中蛋白二硫还原酶的提纯及性质的初步研究[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;1964年06期
中国重要会议论文全文数据库 前7条
1 秦永发;郑易之;马福荣;;高压静电场对小麦矿质营养吸收与根H+-ATP酶活力的影响[A];第三届全国现代生物物理技术学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年
2 朱伯明;李韻笙;陳明璧;;小白鼠注射皮質醇後肝中谷-丙轉氨酶活力和糖元異生作用有關因素的變化[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
3 潘碧霞;邵國英;陳詩書;林性玉;孫月霞;張惠珠;;不同肝機能狀態時激素對大鼠肝中某些酶活力的影響 Ⅱ.皮質素對CCl_4中毒肝及再生肝中谷丙轉氨酶活力的影響[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
4 殷德明;;影響血清谷丙、谷草轉氨酶活力测定操作結果的因素探討[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
5 馮德培;陸大荇;;膈肌兩種肌纖維在去神經後的相反的營養性變化[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生理)[C];1964年
6 刘飞;伍晓丽;贺宗毅;杨大坚;刘杏忠;;冬虫夏草寄主昆虫粉拟青霉病害的研究[A];中药与天然药高峰论坛暨第十二届全国中药和天然药物学术研讨会论文集[C];2012年
7 郑玉才;吕程;兰景超;王杰;李光汉;金素钰;;大熊猫初乳中酶活力和常规组成的研究[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
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1 李佳庆;诺维信推出酶活力定性检测方法[N];中国化工报;2002年
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2 曾化伟;Serratia marcescens SYBC 08的筛选、鉴定及其发酵产过氧化氢酶的研究[D];江南大学;2011年
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1 朱磊;产琼胶酶降解菌的筛选及酶的固定化研究[D];大连工业大学;2016年
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4 余诗庆;耐高温α-淀粉酶发酵活力提高的研究和应用[D];天津大学;2007年
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7 吴文婷;地芽胞杆菌CHB1产高温酶液态发酵条件优化及其粗酶液性质初探[D];福建农林大学;2012年
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