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《大连工业大学》 2016年
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海洋细菌Vibrio agarivorans-1和Vibrio agarivorans-2产琼胶酶培养条件及酶学性质的研究

李佳茵  
【摘要】:由于海洋环境的特殊性,海洋细菌有着其他细菌没有的多种活性物质,有着非常广阔的开发前景。目前,琼胶降解菌主要来源于海洋细菌。研究表明,琼胶降解菌所产的琼胶酶可以使琼胶多糖被降解为琼胶寡糖,具备活性功能的琼胶寡糖在各个领域有着广阔的应用前景。但是,由于琼胶降解菌产琼胶酶的活性较低,所以有必要对海洋细菌产琼胶酶的培养条件进行优化,并对其所产琼胶酶酶学性质进行研究。本论文应用实验室保存的两株海洋细菌Vibrio agarivorans-1和Vibrio agarivorans-2在前期研究的基础上,分别对这两株细菌进行六因素三水平的正交实验,以期得到其最佳培养条件。结果表明,Vibrio agarivorans-1的最佳培养条件为28℃、培养24 h、pH为7、发酵液装量50 mL/100 m L、种子液装量12%;Vibrio agarivorans-2的最佳培养条件为28℃、培养48 h、pH为7.2、发酵液装量40 m L/100 mL、种子液装量10%。对这两株海洋细菌所产的琼胶酶活性进行测定,Vibrio agarivorans-1、Vibrio agari-orans-2所产的琼胶酶活性分别为1.375 U/ml、3.474 U/ml。对琼胶酶活性更高的Vibrio agarivorans-2进行紫外线与氯化锂复合诱变,筛选出一株遗传稳定且琼胶酶活较高的诱变菌株Vibrio agarivorans-2-32。对Vibrio agarivorans-2-32进行琼胶酶活性测定,并与Vibrio agarivorans-2的琼胶酶活性进行比较。结果表明,Vibrio agarivorans-2-32琼胶酶活性为5.417 U/mL,与Vibrio agarivorans-2的琼胶酶活性相比提高了55.9%。对Vibrio agarivorans-2-32进行部分酶学性质的研究。结果表明,该琼胶酶的最适底物浓度为0.20%;最适作用温度和最适反应p H分别为40℃和7.2;酶活在pH6.0-7.0范围内和40℃以下相对稳定;Ca~(2+)对琼胶酶活性有促进作用,而Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)和Zn~(2+)则会对琼胶酶活性有抑制作用。
【学位授予单位】:大连工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:Q936

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