收藏本站
《大连工业大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Lactobacillus plantarum 12产胞外多糖的条件优化及结构研究

梁雪  
【摘要】:乳酸菌胞外多糖(Lactic acid bacteria exopolysaccharide,LAB EPS)是指乳酸菌在生长的过程当中代谢到体外的一种生物大分子聚合物。乳酸菌胞外多糖具有良好的物理特性和生物活性,成为了近些年的研究热点。某些乳酸菌菌株所产的胞外多糖能够抑制肿瘤细胞的增殖,也具有抗氧化生物活性。本论文研究了实验室所保藏的4株乳酸菌L.plantarum 12、L.plantarum 14、L.plantarum 32、L.plantarum 37所产的胞外多糖,筛选出对人结肠癌细胞Caco-2的增殖抑制作用效果最强的一种胞外多糖,确定这种胞外多糖产量最大时菌株的培养条件,然后分离纯化这种胞外多糖,研究纯化后单一组分的理化性质以及其初级结构。首先采用MTS法对实验室所保存的4株乳酸菌L.plantarum 12、L.plantarum 14、L.plantarum 32和L.plantarum 37所产的胞外多糖进行抑制肿瘤细胞增殖效果的测定。结果显示,L.plantarum 12所产的胞外多糖对Caco-2细胞增殖的抑制率最高,可达到42.1%,L.plantarum 14、L.plantarum 32和L.plantarum 37所产的胞外多糖对Caco-2细胞增殖的抑制率分别为14.1%、32.6%和22.5%,所以选定L.plantarum 12所产的胞外多糖作为后续实验的研究对象。其次采用单因素实验和正交试验对L.plantarum 12产胞外多糖的培养条件(碳源种类和浓度、培养时间、培养温度、培养基初始pH、接种量)进行优化,最后得L.plantarum12产多糖的最佳培养条件为:碳源选择为蔗糖,碳源浓度为4%,培养温度为37℃,培养液的初始pH为7.0,培养时间为24 h。验证实验结果表明在此条件下12号多糖的产量高于正交试验中任意一条件组合的糖产量。然后采用优化过的培养条件提取12号多糖,先用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱对12号粗多糖进行分离纯化,得到2个组分,再利用Sepharose CL-6B凝胶柱对分离出的两个组分进行进一步纯化,最后得到两个单一组分EPS12-1、EPS12-2。利用蛋白纯化仪测定出标准品分子量与洗脱体积之间的线形关系和两种组分的洗脱体积,计算出两个组分的分子量均为3.58×10~5 Da。最后检测两种多糖组分的纯度,对其理化性质及结构进行研究。对纯化后的两个单一组分EPS12-1、EPS12-2进行紫外全波长扫描,紫外扫描结果表明:两个单一组分在260 nm和280 nm都没有吸收峰,可以说明两种组分中不含核酸和蛋白质。采用间羟基联苯法和硫酸钡浊度测定法测定两种组分的糖醛酸含量和硫酸基含量,测定结果显示,在EPS12-1中未检测出糖醛酸和硫酸基,EPS12-2中糖醛酸的含量为4.6%,硫酸基的含量为8.9%。采用高效液相色谱测定12号多糖的单糖组成,通过与4种标准品(鼠李糖,木糖,果糖,葡萄糖)的保留时间进行对比,发现12号粗多糖中所含的单糖种类为葡萄糖。对两种组分EPS12-1、EPS12-2进行红外光谱扫描分析得出,两种组分EPS12-1、EPS12-2均存在多糖典型的特征吸收峰。
【学位授予单位】:大连工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:Q936;TQ281

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 唐志红;王艺;马红婷;温少红;秦松;;浒苔多糖脱蛋白工艺的考察[J];食品研究与开发;2015年11期
2 萨如拉;芒来;赵娜;双全;乌云达来;;产胞外多糖乳杆菌的菌种鉴定及其发酵条件优化[J];食品科技;2014年08期
3 刘正君;;植物多糖生物活性概述[J];海峡药学;2014年05期
4 田政;王辑;郑喆;杨贞耐;;乳酸菌胞外多糖的结构及功能特性研究进展[J];食品安全质量检测学报;2013年03期
5 丹彤;王俊国;张和平;;乳酸菌胞外多糖的结构、生物合成及其应用[J];食品科学;2013年07期
6 刘佳;潘道东;;硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响[J];营养学报;2013年01期
7 刘莉;李泳怡;潘育方;;荔枝核多糖脱蛋白工艺考察[J];中国实验方剂学杂志;2012年23期
8 唐血梅;李海英;赵芳;姚新奎;董婷;车驰;祝春梅;刘婷婷;曾亚琦;韩煜茹;曹丽萍;王建文;刘志安;孟军;李智军;;新疆酸马奶中高产胞外多糖乳酸菌筛选鉴定及培养条件优化研究[J];新疆农业科学;2012年08期
9 邢书涵;连正兴;孙勇;韩红兵;钟思琼;刘慧;;藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖抑制人结肠癌细胞增殖的研究[J];食品科学;2012年07期
10 姚晶;任婧;吴正钧;王荫榆;郭本恒;;乳酸菌胞外多糖的生物合成及其遗传调控[J];食品与发酵工业;2011年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 童良琴;曲亚军;陈敏;;乳酸菌胞外多糖的研究进展[J];中国生物工程杂志;2015年11期
2 吴月国;赵铮蓉;张萍;辛艳飞;刘骅;;铁皮石斛复方颗粒对小鼠免疫功能影响的研究[J];中华中医药学刊;2015年08期
3 吴锦羽;林伟锋;陈中;;响应面法优化嗜热链球菌产胞外多糖的培养条件[J];食品科技;2015年07期
4 唐志红;王艺;马红婷;温少红;秦松;;浒苔多糖脱蛋白工艺的考察[J];食品研究与开发;2015年11期
5 张帅;郑宝东;林良美;卢旭;郑亚凤;;笋壳多糖脱蛋白方法的比较[J];热带作物学报;2015年05期
6 陈凯;郭丽冰;王计长;刘文秀;徐文雅;赵越;;六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺优选[J];中国实验方剂学杂志;2015年10期
7 任晓蕾;霍金海;董文婷;张海燕;王伟明;;北青龙衣总多糖脱蛋白工艺比较[J];中国实验方剂学杂志;2015年10期
8 秦晓萌;张远森;柳陈坚;张昆林;杨恩;;乳酸菌胞外多糖生理功能及合成途径的研究进展[J];食品工业科技;2015年14期
9 杨峰玉;;超高压技术对旅游食品中微生物的影响[J];河南工业大学学报(自然科学版);2014年05期
10 胡盼盼;宋微;杜明;黄明辉;任青兮;张兰威;;乳酸菌胞外多糖的研究进展[J];粮油食品科技;2014年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱朝阳;刘高强;旷思敏;周国英;;冬虫夏草真菌产胞外多糖发酵条件的优化[J];食品科技;2013年05期
2 刘佳;潘道东;;硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响[J];营养学报;2013年01期
3 刘莉;李泳怡;潘育方;;荔枝核多糖脱蛋白工艺考察[J];中国实验方剂学杂志;2012年23期
4 孟祥升;李博;;副干酪乳杆菌及其胞外多糖的抗氧化性研究[J];食品科技;2012年09期
5 唐血梅;李海英;赵芳;姚新奎;董婷;车驰;祝春梅;刘婷婷;曾亚琦;韩煜茹;曹丽萍;王建文;刘志安;孟军;李智军;;新疆酸马奶中高产胞外多糖乳酸菌筛选鉴定及培养条件优化研究[J];新疆农业科学;2012年08期
6 许女;习傲登;;干酪乳杆菌KW3产胞外多糖的研究[J];中国食品学报;2012年07期
7 欧士钰;罗伟生;靳雅玲;覃浩;孙旭锐;;荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝组织MMP-2表达的影响[J];中国实验方剂学杂志;2012年13期
8 邢书涵;连正兴;孙勇;韩红兵;钟思琼;刘慧;;藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖抑制人结肠癌细胞增殖的研究[J];食品科学;2012年07期
9 颜炳祥;潘道东;曾小群;;乳酸菌胞外多糖硒化修饰及其抗氧化活性研究[J];中国食品学报;2012年02期
10 周宝珍;肖娅萍;;绞股蓝多糖脱蛋白工艺及相对分子质量的测定[J];陕西师范大学学报(自然科学版);2012年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 尚天翠;卫刚;赵玉;;一株产胞外多糖土壤细菌培养条件的优化[J];生物学杂志;2017年01期
2 刘芳;黄丹;陈永贵;樊江;;一株高产胞外多糖乳酸菌的筛选与鉴定[J];中国乳品工业;2013年12期
3 励建荣,封平;乳酸菌产胞外多糖的研究[J];食品与机械;2005年01期
4 唐血梅;李海英;赵芳;姚新奎;董婷;车驰;祝春梅;刘婷婷;曾亚琦;韩煜茹;曹丽萍;王建文;刘志安;孟军;李智军;;新疆酸马奶中高产胞外多糖乳酸菌筛选鉴定及培养条件优化研究[J];新疆农业科学;2012年08期
5 王亚峰;霍贵成;范丽平;;产胞外多糖乳酸菌对发酵乳品质的影响[J];食品科技;2009年03期
6 廖春丽;王福梅;王莲哲;陈兰英;;蛹虫草产胞外多糖发酵培养研究[J];安徽农业科学;2009年09期
7 刘先;康小红;孙军德;;高产胞外多糖乳酸菌的筛选与初步鉴定[J];农产品加工(学刊);2010年03期
8 鲍志宁;吴锦羽;林伟锋;陈中;;嗜热链球菌在传代培养中产胞外多糖的稳定性分析[J];食品与机械;2016年01期
9 刘天华;乔梦;李乐乐;解斐;杜宗军;;海洋细菌0417产胞外多糖发酵条件的优化[J];中国酿造;2011年06期
10 范丽平;王亚峰;霍贵成;;产胞外多糖乳酸菌的鉴定及发酵性能研究[J];食品与机械;2010年03期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 田文祥;杨幼慧;蹇华丽;;一株高产胞外多糖菌株的鉴定及其多糖性质研究[A];2010年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨华南地区农产品加工产学研研讨会论文摘要集[C];2010年
2 张日馨;牟光庆;妥彦峰;钱方;姜淑娟;;Lactobacillus plantarum-12乳杆菌产胞外多糖培养条件优化[A];中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集[C];2018年
3 郑晓雅;殷伟伟;张松;;两种食用菌液体培养产胞外多糖条件的研究[A];中国菌物学会2018年学术年会论文汇编[C];2018年
4 张国华;张纬珍;;高产胞外多糖旧金山乳杆菌的筛选及其在馒头中的应用[A];中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集[C];2018年
5 张镜;刁树平;;发酵条件对一拟盘多毛孢菌株产胞外多糖的影响[A];2012年鄂粤微生物学学术年会——湖北省暨武汉微生物学会成立六十年庆祝大会论文集[C];2012年
6 武敬;王一明;林先贵;;高产胞外多糖的光合细菌菌株鉴定与筛选[A];面向未来的土壤科学(中册)——中国土壤学会第十二次全国会员代表大会暨第九届海峡两岸土壤肥料学术交流研讨会论文集[C];2012年
7 郭东起;孙爱华;;生防酵母菌产胞外多糖能力与其在果实表面定殖的关系[A];中国植物病理学会2015年学术年会论文集[C];2015年
8 高坤;刘艳芳;冯杰;张劲松;唐庆九;颜梦秋;李德顺;;灵芝液态深层发酵高产胞外多糖菌株筛选及多糖特性分析[A];中国菌物学会2018年学术年会论文汇编[C];2018年
9 王迎华;陈燕;高丹丹;曹郁生;;大肠杆菌galU基因在乳酸乳球菌中的克隆及对产胞外多糖的影响[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 顾笑梅;乳酸菌产胞外多糖的研究[D];山东大学;2003年
2 邵丽;产胞外多糖乳杆菌的筛选及其多糖的分离、结构和生物活性研究[D];江南大学;2015年
3 王辑;产胞外多糖植物乳杆菌的分离筛选、分子表征及其应用研究[D];吉林大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁雪;Lactobacillus plantarum 12产胞外多糖的条件优化及结构研究[D];大连工业大学;2018年
2 上官王丽;产胞外多糖细菌多样性及其对土壤团聚体形成作用的研究[D];南京农业大学;2013年
3 陈若雯;高产胞外多糖乳酸乳杆菌的选育及其发酵条件的优化[D];华中农业大学;2010年
4 杨柳;海洋微生物产胞外多糖菌株筛选及发酵条件研究[D];大连工业大学;2008年
5 陈佳;海洋产胞外多糖菌的筛选、发酵条件优化及其多糖免疫学活性初步探究[D];广西民族大学;2015年
6 李雄超;高产胞外多糖干酪乳杆菌的太空诱变选育及混合发酵的研究[D];甘肃农业大学;2014年
7 杨燕萍;产胞外多糖乳酸菌的筛选及其多糖的结构研究[D];天津大学;2016年
8 刘燕;高产胞外多糖乳酸菌的筛选及培养基优化方法的研究[D];河南农业大学;2009年
9 董阳勤;产胞外多糖乳杆菌的筛选及多糖功能的研究[D];大连工业大学;2016年
10 曹红阳;新型产胞外多糖细菌的筛选及其多糖结构的探究[D];南京理工大学;2014年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026