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《沈阳建筑大学》 2016年
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一株马拉硫磷高效降解菌的筛选及其特性研究

王思博  
【摘要】:目前,我国食物中有机磷农药的残留情况相当普遍和严重,尤其是一些高毒性有机磷农药在食品中的残留污染已不容忽视,筛选高效的农药降解菌刻不容缓。为此,本研究以有机磷农药马拉硫磷为研究对象,以辽宁沈阳农田生态系统国家野外研究站的潮棕壤作为供试土壤,通过逐级驯化的方式,从长期施喷马拉硫磷农药的土壤中分离出六株对马拉硫磷具有良好降解能力的菌株,经过复筛得到一株性能较好的降解菌M5,该菌对马拉硫磷的降解率为52.0%。通过研究马拉硫磷降解菌M5的生长曲线特征,以及在不同pH、温度、外加碳源和氮源以及马拉硫磷浓度因素下的生长特征,试验表明降解菌M5生长的延迟期约为6h,对数生长期约为6h~18h,从第30h开始进入衰亡期。由试验可知最佳的马拉硫磷降解时间为4d时达到最大降解率,6d后的降解率为52%;降解菌M5生长的最适培养温度为30℃,适宜降解菌M5生长的pH值为7.0;当马拉硫磷浓度为100mg/L,最适合降解菌的生长;在有葡萄糖做碳源的培养基中生长最旺盛。研究紫外灯照射时间、盐酸氢胺溶液质量分数不同和土壤浸出液体积分数的不同对降解菌致死率和降解率的影响,确定了最佳诱变条件后将三种方法复合诱变还原,即将培养基置于20W紫外灯30cm处位置照射20s后,用质量分数0.6%的盐酸氢胺120r/min恒温振30min,最后用体积分数60%的土壤浸出液30℃恒温培养48h。筛选出对农药马拉硫磷具有良好降解作用的高效菌株,复合诱变还原之后的降解菌诱变M5'对农药的降解率有明显的提高,比未经诱变的降解菌高出了 19.26%,降解3天后达到最大降解率69.26%。经过对马拉硫磷降解菌M5'的形态学特征、生理生化特征及分子生物学鉴定,确定了菌株M5'为施氏假单胞菌。对其使用进行环境影响分析,根据国家对微生物安全划分标准的相关规定,明确了施氏假单胞菌为对生物安全程度最高的第四类,使用安全。采用单因素考察方式进行室内模拟试验,测定不同的pH、有机肥施肥量、菌剂添加量以及不同的土壤最大持水量对该菌降解能力的影响,试验结果表明土壤对马拉硫磷降解率最高的最佳环境因素为pH值为7.0,有机肥施肥量为5g/kg,菌剂接种量为10ml/kg,土壤最大持水量为70%。
【学位授予单位】:沈阳建筑大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:X592;X172

【参考文献】
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