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《沈阳农业大学》 2013年
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柞蚕线粒体控制区的结构特征与FK506结合蛋白基因的表达谱分析

陈默  
【摘要】:柞蚕(Antheraea pernyi)属于鳞翅目大蚕蛾科,是我国特有的一种产丝和食用昆虫。 本学位论文分为两个部分。第一部分报道柞蚕线粒体DNA中A+T丰富区的结构特征与长度多态性。第二部分报道柞蚕两个12kDa FKBP基因的分离与表达模式。 测定了柞蚕19个样品(包括16个放养型和3个野生型)的线粒体A+T丰富区的全长序列。从16个放养型柞蚕样品中鉴定出9种单倍型,序列长度在550bp到554bp之间,序列之间具有很高的相似度,序列变异仅为0.18-0.91%。3个野生型柞蚕样品分为2种单倍型,序列长度为516bp或517bp。与放养型柞蚕的A+T丰富区序列相比,野生型柞蚕A+T丰富区序列显示出了长度多态性和相对较多的碱基差异。系统进化分析发现,柞蚕A+T丰富区序列明显被分为两种类型:放养型和野生型。串联重复序列数量的变化造成了放养型与野生型柞蚕A+T丰富区之间的长度多态性。在柞蚕A+T丰富区也发现了已在其他昆虫中鉴定出的一些保守结构元件。同时,在柞蚕A+T丰富区中还发现了2个类tRNA序列。 克隆出的两个柞蚕12kDa FK506结合蛋白(FKBP12)基因分别被命名为ApFKBP12A和ApFKBP12B。柞蚕FKBP12A和FKBP12B都含有108个氨基酸残基,且氨基酸序列一致性为82%。系统进化分析显示,柞蚕(A.pernyi)、家蚕(Bombyx mori)、黑脉金斑蝶(Danaus plexippus)的FKBP12A与FKBP12B被明显分开,表明昆虫的FKBP12A与FKBP12B可能已经开始独立进化。RT-PCR分析表明两个ApFKBP12在柞蚕不同发育时期以及5龄幼虫的不同组织器官中均有表达。实时荧光定量RT-PCR分析表明,ApFKBP12A的表达水平显著高于ApFKBP12B。热激处理后,两个ApFKBP12的相对表达量分别在不同时间点显著上调。研究结果表明,ApFKBP12A和ApFKBP12B可能在柞蚕生长发育过程中发挥不同作用。
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:S881

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