烟草靶斑病生防链霉菌的鉴定、作用机理及应用研究

【摘要】：烟草靶斑病(Rhizoctonia solani Kuhn)是我国近年来报道的烟草新病害,该病害在东北地区大面积流行,对烟叶品质和产量均造成了巨大的损失。目前国内外该病害依然以化学农药防治为主,生物防治报道较少。本文筛选到一株对烟草靶斑病菌具有较强拮抗活性的生防链霉菌S128,对其进行了分类鉴定、抑菌活性测定、作用机理及固体发酵条件优化研究,并进行了温室盆栽和田间防治效果试验,取得的主要研究成果如下：1.从辽宁省丹东市植烟土壤中分离并筛选得到1株对烟草靶斑病菌具有很强抑制作用的生防链霉菌,编号为S128,并对其进行了鉴定,结合其形态特征、培养特征、理化特性及16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为灰色链霉菌Streptomyces griseus。2.明确了生防链霉菌S128的作用机理。生防链霉菌S128对烟草靶斑病病原菌菌丝生长具有明显的抑制作用,抑制率可达88.70%；该菌株能使烟草靶斑病菌的菌丝形态出现畸形,并且菌丝还出现节间变短、变粗、扭曲变形、菌丝分隔增多等现象；该菌株除了对烟草靶斑病菌具有较强的抑菌活性外,还对其他供试16种病原真菌均具有不同程度的抑菌作用,抑菌谱很广；‘该菌株可以产生几丁质酶、纤维酶、葡聚糖酶和蛋白酶,推测其以水解酶降解真菌细胞壁的方式作用于烟草靶斑病病原菌。3.对生防链霉菌S128进行了固体发酵条件优化。初步筛选出最优的发酵基质为小米粉、发酵含水量为18 mL、发酵温度为28℃、发酵装瓶量为75 g、发酵接种量为3 mL以及发酵碳源为葡萄糖。4.研究了生防链霉菌S128和7种商品化生防菌剂对烟草靶斑病菌的室内抑菌作用及温室和田间防效。室内抑菌测定结果表明,生防链霉菌S128和7种供试的生防菌剂对烟草靶斑病菌均具有较明显的抑菌作用,其中枯草芽孢杆菌效果最好,抑菌率可达94.26%,生防链霉菌S128的抑菌效果仅次于枯草芽孢杆菌,抑菌率为90.88%,且优于其他6种生防菌剂。室内毒力测定结果显示,枯草芽孢杆菌对烟草靶斑病菌的毒力最高,其ECso值为2.6422 cfu/mL,其次为生防链霉菌S128,其EC50值为2.7008 cfu/mL,均较高于其他6种生防菌剂。 温室盆栽试验结果表明,在治疗和保护作用中,生防链霉菌S128的防效也仅次于枯草芽孢杆菌而优于其他6种生防菌剂,并且供试的生防链霉菌S128和7种生防菌剂的防效均优于对照化学药剂。田间防效试验结果表明,枯草芽孢杆菌对烟草靶斑病的防效达88.83%,生防链霉菌S128的防效达86.87%。两者之间差异不显著,其余6种药剂防也效均在59.18%以上,而对照组化学药剂的防效为54.37%。表明利用生防菌剂防治烟草靶斑病均优于化学药剂。综上所述,生防链霉菌S128对防治烟草靶斑病菌具有较好的开发应用前景。