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《沈阳农业大学》 2017年
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一株甲醛降解菌的筛选与产酶特性研究

闫潇  
【摘要】:甲醛对人类的危害已成为众所周知的事实,装修材料导致室内甲醛污染是现阶段亟待解决的社会难题。本研究筛选得到一株能够以甲醛为唯一碳源的细菌,优化该菌株的产酶条件,模拟居室环境降解甲醛试验,为生物法降解室内甲醛污染提供参考。(1)从沈阳农业大学后山基地采集的土样中,筛选获得一株能以甲醛为唯一碳源且耐受甲醛能力较强的细菌,编号为YX-1,根据其显微形态观察、生理生化试验和16SrDNA分子学序列,鉴定YX-1为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。(2)以黑腹果蝇为试验对象,对筛选获得的YX-1菌株进行毒理学试验。通过在20℃环境中向果蝇培养基中加入不同浓度的菌液,研究其对雌雄黑腹果蝇存活天数的影响。结果显示当YX-1菌含量不同时,对果蝇寿命有不同程度的影响,即培养基中菌液浓度越大影响越大,所以该菌可能会对人们的身体健康造成潜在的威胁。(3)通过单因子试验和正交试验优化YX-1菌株的产酶条件,获得最佳培养条件为:蛋白胨 1.2g/L,KH2P043g/L,K2HPO44g/L,MgSO4·7H20 0.02g/L,微量元素母液0.1mL/L;最适pH和温度分别为8,30℃。(4)采用超声破碎法测甲醛脱氢酶的酶活得知,该酶属于YX-1菌株的胞内酶;采用响应面法研究了超声破碎菌体对酶提取的影响,结果表明最适超声破碎时间为6s,超声总时间为298s,超声功率为82W,此时酶活最高达4.967U/mg。(5)进行一个降解甲醛的模拟试验,在室温下,通过大气循环泵抽出模拟环境内含有甲醛的空气,经过吸收瓶内的酶液的降解再循环回室中,进而达到降解甲醛的目的。通过对不同浓度甲醛的降解,随循环时间的增长,浓度不断降低,直到达到一个趋于平衡的恒定值。我国室内甲醛限定浓度为0.1mg/m3,当模拟环境中浓度为1.82mg/m3时,经14h即可达到国家标准,当甲醛浓度为2.10mg/m3时,经22h即可达到国家标准。
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:X172;TU834.8;Q93

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