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《沈阳农业大学》 2017年
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水飞蓟果托总黄酮的分离纯化及其生物活性研究

孙晶  
【摘要】:水飞蓟(Silybum marianum L.)为菊科水飞蓟属一年或二年生植物,我国从上世纪七十年代开始引进种植。目前国内外对于水飞蓟的研究和利用主要集中在果实部分,水飞蓟植株利用价值较低。黄酮类物质广泛存在于植物中,具有多种生理活性,水飞蓟果实中的黄酮类物质—水飞蓟素已作为护肝药物的主要成分在临床上得到广泛应用。国内外对水飞蓟植株的研究较少,且主要集中在根、茎、叶等部分,未见对水飞蓟果托部分的报道。本课题首先对水飞蓟植株各部位活性成分及醇提物活性进行研究,然后对醇提物抗氧化活性最高的果托部位的总黄酮进行提取和分离纯化,明确果托总黄酮中的主要单体组分,并对其抗氧化活性和降血糖活性进行研究。主要研究结果如下:1、对水飞蓟根、茎、叶、果托等四部位的活性成分含量及其醇提物体外抗氧化活性进行测定,结果表明:四个部位中,果托总黄酮含量最大(9.98±0.58mg/g),总黄酮含量顺序依次为果托根叶茎;水飞蓟根中多糖的含量最大(8.02±0.15mg/g),多糖含量的比较顺序为根果托叶茎;果托中多酚含量最大(12.19±0.38mg/g),多酚含量顺序为果托根叶茎;水飞蓟植株各部位蛋白质的含量均较少,经比较含量顺序为茎根果托叶。四部位醇提物对DPPH清除活性、清除羟基和总抗氧化能力试验结果表明,醇提物体外抗氧化活性顺序为果托根叶茎。2、采用响应面法优化超声波辅助乙醇溶液提取水飞蓟果托总黄酮的最佳工艺条件。结果表明,超声波辅助乙醇溶液提取的最佳工艺条件为:乙醇体积分数40%,提取时间80min,液料比40:1,提取温度60℃。在此条件下,水飞蓟果托中总黄酮的提取量可达10.18mg/g。四个因素对果托总黄酮提取量的影响顺序从大到小依次为液料比乙醇体积分提取温度提取时间。3、采用大孔树脂和硅胶柱层析试验对果托总黄酮进行分离纯化,并通过红外光谱分析、质谱分析和核磁共振谱图分析对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。结果表明,7种大孔树脂中AB-8最适合对果托总黄酮进行纯化,其纯化工艺参数为:果托总黄酮浓度3.98mg/ml、上样体积80mL、pH5.5、乙醇体积分数70%、洗脱体积100mL、吸附温度50℃、解析温度60℃。在此条件下,分离纯化后果托总黄酮纯度为73.45±0.26%,回收率为84.04%±1.83。硅胶柱层析梯度洗脱试验中,从乙酸乙酯:丙酮配比为3:1洗脱液中得到化合物Ⅰ(45mg),从乙酸乙酯:丙酮配比为1:1洗脱液中得到化合物Ⅱ(55 mg),从乙酸乙脂丙酮配比为1:2洗脱液中得到化合物Ⅲ(80mg)。结构鉴定结果表明,化合物Ⅰ分子式C15H12O7,为二氢榭皮素(花旗松素);化合物物Ⅱ分子式C25H22O10,为水飞蓟亭;化合物物Ⅲ分子式C25H22O10),为水飞蓟宾。4、通过测定清除DPPH活性、清除羟基自由基活性、总抗氧化能力和对油脂的抗氧化活性等对水飞蓟果托总黄酮的体外抗氧化能力进行评价,然后以昆明种小白鼠为受试动物,通过测定果托总黄酮对血清和肝肾中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响评价其体内抗氧化能力。体外抗氧化试验结果表明,DPPH清除率,羟基清除率和总抗氧化能力顺序均为果托总黄酮抗坏血酸果托醇提物;对猪油和大豆油的抗氧化试验结果表明,果托总黄酮对猪油和大豆油均具有很好的抗氧化效果。体内抗氧化试验结果表明,果托总黄酮各剂量组均可显著提高小鼠体内血清、肝和肾组织的CAT活性,降低MDA含量;果托总黄酮高剂量组可增加小鼠体内血清、肝和肾组织的T-SOD活性和GSH-PX活性。因此,果托总黄酮具有较好的体外和体内抗氧化能力。5、通过建立2型糖尿病大鼠模型,测定其血糖、血脂变化、血清丙二醛(MDA)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和糖耐量等指标,并对其肝脏组织进行切片观察,研究果托总黄酮的降血糖活性。试验结果表明,果托总黄酮对2型糖尿病大鼠有如下作用:总黄酮各剂量组均可起到降低大鼠血糖、血清中总胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)浓度的作用,并使TG恢复到正常水平,对TC的降低存在一定的剂量相关性;可使血清中高密度脂蛋白(HDL-C)浓度升高,低密度脂蛋白(LDL-C)浓度降低,并使HDL-C恢复到正常水平,对LDL-C的降低作用存在一定的剂量相关性;可使血清中SOD活性升高,MDA含量降低;可在一定程度上提高大鼠的口服糖耐量。肝脏组织切片观察结果表明,果托总黄酮对糖尿病大鼠肝脏组织脂肪化有一定的抑制作用。
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:TQ464

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张津鸣;钟筱婷;盛德乔;喻玲玲;李世刚;柳蔚;;资木瓜总黄酮的体内外抗氧化活性研究[J];天然产物研究与开发;2016年10期
2 王思明;付炎;刘丹;王于方;李力更;霍长虹;李勇;刘江;张嫚丽;史清文;;天然药物化学史话:“四大光谱”在天然产物结构鉴定中的应用[J];中草药;2016年16期
3 胡朝暾;唐霞;肖震;付明;胡兴;;茯苓发酵液中蛋白质的电泳分离与质谱分析[J];中草药;2016年13期
4 郝风芹;李娜;;洋葱总黄酮对糖尿病大鼠丙二醛与超氧化物歧化酶的影响[J];中国临床药理学杂志;2016年09期
5 周少英;苏静;阚敏宸;史延卿;梁伟;;山楂叶总黄酮对2型糖尿病大鼠血糖血脂和抗氧化能力的影响[J];江苏中医药;2016年05期
6 傅力;徐佳;包晓玮;赵晓梅;叶凯;;石榴皮多酚体内抗氧化活性研究(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2016年01期
7 王海涛;于涛;;菊芋花盘酚类物质提取和体外抗氧化活性研究[J];食品工业科技;2016年09期
8 谭林;刘冬恋;杨春梅;杨霞;游均梅;牟倩云;;桑叶总黄酮对2型糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用[J];食品工业科技;2016年08期
9 梅进;丁文平;刘航;庄坤;张轩;;大麦糟多酚体外抗氧化活性的研究[J];粮食与饲料工业;2015年11期
10 余翠;熊钱颖;王李卓;高家林;;糖尿病肾病的发病机制及治疗进展[J];医学综述;2015年21期
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 赵菲;水飞蓟壳中水飞蓟素分离纯化及其功能性的研究[D];沈阳农业大学;2015年
2 朱淑云;水飞蓟籽仁蛋白和油的主要特性与生物活性研究[D];江苏大学;2013年
3 王菲;软枣猕猴桃黄酮类化合物的提取纯化及生物活性研究[D];沈阳农业大学;2011年
4 刘宏;水飞蓟种子活性成分的提取、分离及初步活性研究[D];北京化工大学;2009年
5 乔卫;委陵菜黄酮降血糖作用及其机制研究[D];天津医科大学;2009年
6 赵春艳;沙葱中黄酮类化合物的分离纯化、结构鉴定及其对小鼠免疫抗氧化机能影响的研究[D];内蒙古农业大学;2008年
7 孙艳辉;水飞蓟粕制备抗氧化物及其活性研究[D];江苏大学;2007年
8 彭亮;紫萍总黄酮提取、纯化工艺及其抗癌、抗氧化损伤的活性研究[D];重庆大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 姜秀娟;刺山柑花蕾中黄酮类化合物的分离纯化及抗氧化活性研究[D];塔里木大学;2010年
2 郑巨约;水飞蓟中有效成分的分离制备及其抗氧化活性[D];浙江工商大学;2009年
3 赵福阳;柳蒿芽黄酮类化合物提取、纯化及抗氧化活性的研究[D];东北林业大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘莎;张小娟;王炜;陈林;廖彦;鲁耀邦;唐映红;崔培梧;;液态发酵法合成雪峰虫草活性成分的初步研究[J];中国药房;2017年22期
2 何丹丹;郑毅;陈闯;陈建超;孙铁民;;治疗糖尿病并发症的药物研究进展[J];中南药学;2017年06期
3 魏乐;;消解通络固肾汤联合盐酸贝那普利治疗糖尿病肾病15例[J];光明中医;2017年11期
4 王明川;于涛;;不同黑木耳品种抗氧化物质含量研究[J];现代农业科技;2017年09期
5 田琦;;辛伐他汀联合阿司匹林治疗糖尿病肾病患者SOD、MDA水平及肾功能的影响[J];北方药学;2017年05期
6 王黎明;王敏;李道兵;;上尿路结石致高血压发病机制及治疗的研究进展[J];海南医学;2017年08期
7 袁晓艳;封冬梅;陈晓兰;;菊芋叶中多酚类成分的提取分离及结构鉴定[J];江西农业学报;2017年04期
8 林文静;张秋霞;胡职舟;;缬沙坦联合阿托伐他汀对早期糖尿病肾病患者微量白蛋白尿及血清hs-CRP水平的影响[J];中外医学研究;2017年11期
9 王兰;蓝璟;龚频;杨文娟;常相娜;姬海红;杨薪正;;葛根异黄酮降血糖活性及作用机制的研究[J];食品科技;2017年03期
10 马丽华;;匹伐他汀联合赖诺普利治疗糖尿病肾病肾间质纤维化的临床研究[J];中国现代药物应用;2017年05期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙晶;水飞蓟果托总黄酮的分离纯化及其生物活性研究[D];沈阳农业大学;2017年
2 木其尔;沙葱黄酮对肉羊机体抗氧化和免疫功能的影响及其机理研究[D];内蒙古农业大学;2016年
3 荆常亮;紫花苜蓿总黄酮的提取、纯化及其抗氧化活性研究[D];中国农业科学院;2016年
4 王宇;瑞香狼毒总黄酮对实验性高脂血症大鼠降脂作用的研究[D];内蒙古农业大学;2015年
5 萨茹丽;沙葱黄酮提取工艺优化、结构鉴定及其相关生物活性研究[D];内蒙古农业大学;2014年
6 左丽丽;狗枣猕猴桃多酚的抗氧化与抗肿瘤效应研究[D];哈尔滨工业大学;2013年
7 宣丽;软枣猕猴桃多糖的结构初探及抗氧化活性、免疫活性的研究[D];沈阳农业大学;2013年
8 朱淑云;水飞蓟籽仁蛋白和油的主要特性与生物活性研究[D];江苏大学;2013年
9 孟庆焕;牡丹种皮黄酮提取分离与抗氧化及抗疲劳作用研究[D];东北林业大学;2013年
10 扈瑞平;沙葱多糖的分离、纯化和结构鉴定及其生物学活性的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 周李柳;虎杖、啤酒花、水飞蓟和肉桂对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能的影响[D];华南农业大学;2016年
2 姜鸿运;水飞蓟悬浮培养体系的建立及不同诱导子对水飞蓟宾含量的影响[D];吉林农业大学;2015年
3 侯艳;大蓟中有效成分的分离纯化、鉴定及其活性研究[D];华南理工大学;2015年
4 张淑丽;水飞蓟发状根培养体系的建立及其有效成分的评价[D];吉林农业大学;2014年
5 梅利伟;刺山柑(Capparis Spinosa L.)抗类风湿性关节炎软膏剂的研制[D];华中科技大学;2012年
6 陈义磊;刺山柑茎提取物化学成份与生物活性初步研究[D];塔里木大学;2011年
7 向朝林;草鱼(Ctenopharyngodon idellus)硫代乙酰胺肝损伤实验模型建立及其应用研究[D];苏州大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 仇宏伟;骆珍;孙立梅;张林超;;萝藦花总黄酮的含量测定及抗氧化研究[J];青岛农业大学学报(自然科学版);2016年02期
2 王思明;王于方;李勇;刘江;李力更;张嫚丽;史清文;;天然药物化学史话:来自海洋的药物[J];中草药;2016年10期
3 李羿;李晨;杨万清;杨胜;;茯苓补料液体发酵工艺优化及不同来源茯苓所含成分量比较[J];中草药;2016年09期
4 郭瑞霞;李力更;王于方;王磊;张嫚丽;詹文红;史清文;;天然药物化学史话:甾体化合物[J];中草药;2016年08期
5 闫雪生;孙丹丹;郭艳伟;徐新刚;于蓓蓓;;茯苓皮总三萜液固压缩片的处方研究[J];中草药;2016年03期
6 陈飞;何先元;周卯勤;程鹏;欧阳凯;黄英如;;超声辅助提取四齿四棱草中总黄酮及其抗氧化活性[J];天然产物研究与开发;2016年01期
7 周文婷;邬利娅·伊明;马虎;古再努尔·买买提;艾尼瓦尔·吾买尔;;榅桲总黄酮降压作用及抗炎机制的实验研究[J];中药材;2015年10期
8 郭瑞霞;李力更;王于方;霍长虹;付炎;王磊;史清文;;天然药物化学史话:天然产物化学研究的魅力[J];中草药;2015年14期
9 付炎;李力更;王于方;王磊;史清文;;天然药物化学史话:维生素B_(12)[J];中草药;2015年09期
10 王昱;王胜青;叶文斌;何九军;祁林林;;橄榄苦苷对糖尿病大鼠肾组织的保护作用及其机制[J];食品工业科技;2015年21期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 杨平;刺五加苷延缓衰老作用机理研究[D];沈阳农业大学;2009年
2 李颖畅;蓝莓花色苷提取纯化及生理功能研究[D];沈阳农业大学;2008年
3 张秀丽;梓醇对D-半乳糖衰老小鼠的神经保护作用研究[D];大连理工大学;2008年
4 孙艳辉;水飞蓟粕制备抗氧化物及其活性研究[D];江苏大学;2007年
5 张巧娥;沙葱提取物的分离鉴定及其对绵羊消化道共轭亚油酸含量和胴体脂肪沉积影响的研究[D];内蒙古农业大学;2007年
6 李琳;鳙鱼蛋白控制酶解及酶解物抗氧化研究[D];华南理工大学;2006年
7 赵国芬;沙葱和油料籽实对绵羊瘤胃发酵、营养物质消化流通及胴体品质影响的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王作昭;笃斯越桔中黄酮类化合物的提取及纯化工艺研究[D];吉林大学;2006年
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1 徐德峰;张卫明;史劲松;顾龚平;孙达峰;;国内水飞蓟资源利用现状与展望[J];食品研究与开发;2007年02期
2 徐德峰;孙力军;王雅玲;刘唤明;张卫明;;水飞蓟油水代法提取工艺主要影响因素的筛选[J];现代食品科技;2012年08期
3 ;[J];;年期
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1 张卫明;钱学射;顾龚平;;水飞蓟油的研究与利用[A];中医药现代化与科技创新高层论坛暨第二届金陵名医论坛论文集[C];2007年
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1 吴桂亮;水飞蓟饼粕喂蛋鸡要先试验[N];江苏农业科技报;2007年
2 记者 刘永安;盘锦水飞蓟“飞”出家门赚外汇[N];辽宁日报;2009年
3 丁立威 丁乡;水飞蓟栽培技术[N];中国特产报;2004年
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1 孙晶;水飞蓟果托总黄酮的分离纯化及其生物活性研究[D];沈阳农业大学;2017年
2 孙艳辉;水飞蓟粕制备抗氧化物及其活性研究[D];江苏大学;2007年
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1 姜鸿运;水飞蓟悬浮培养体系的建立及不同诱导子对水飞蓟宾含量的影响[D];吉林农业大学;2015年
2 张晓倩;水飞蓟耐盐碱特性及NO对盐胁迫缓解效应研究[D];南京农业大学;2014年
3 张淑丽;水飞蓟发状根培养体系的建立及其有效成分的评价[D];吉林农业大学;2014年
4 郑巨约;水飞蓟中有效成分的分离制备及其抗氧化活性[D];浙江工商大学;2009年
5 张朝阳;水飞蓟化学成分及其抗氧化活性的研究[D];西北农林科技大学;2009年
6 贾丽娜;水飞蓟有效成分的提取研究[D];辽宁师范大学;2005年
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