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《沈阳农业大学》 2017年
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啶酰菌胺对斑马鱼的毒性与在鱼体内的富集性研究

臧晓霞  
【摘要】:啶酰菌胺作为最常用的杀菌剂之一,主要通过抑制琥珀酸脱氢酶的活性,阻碍机体内物质与蛋白质线粒体呼吸链复合物Ⅱ(以下简称"复合物Ⅱ")结合,使机体内电子转移受到干扰,从而阻碍能源生产、供应来发挥作用,在有效抑制孢子萌发、病害传播,促进农业生产、发展上起着越来越重要的作用,可用于防治白粉病、灰霉病、茎腐病等多种病害。本文以斑马鱼为研究对象,采用半静态法,研究了啶酰菌胺对斑马鱼胚胎与成鱼的急性与亚急性毒性效应、对斑马鱼肝脏与鳃抗氧化酶体系的影响、对斑马鱼的作用机制、在斑马鱼体内富集与消除作用,得出啶酰菌胺对斑马鱼有中等毒性,中等富集性,可诱导氧化应激,能显著抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)和复合物Ⅱ的活性,为评价啶酰菌胺对斑马鱼的环境毒性提供更全面、系统的资料。啶酰菌胺对斑马鱼的致死中浓度(96 h-LC50)为1.26 mg/L(胚胎),1.84 mg/L(成鱼),均为中等毒性;且能显著抑制斑马鱼胚胎与成鱼的心跳。斑马鱼暴露于啶酰菌胺中使斑马鱼肝脏和鳃中丙二醛(MDA)含量增加,激发机体防御功能,诱发氧化应激。随着暴露时间及浓度的增大,氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性呈现出,暴露前期,随浓度增大而升高,暴露后期,浓度增大,活性降低,肝脏中以上四种酶活性最高时分别为对照组的 124.16%(0.32 mg/L)、121.71%(0.32 mg/L)、127.65%(0.16 mg/L)、124.13%(0.16 mg/L),鳃中最高为对照组的 121.51%(0.32 mg/L)、118.85%(0.32 mg/L)、129.65%(0.32 mg/L)、114.90%(0.08 mg/L),肝脏中以上四种酶活性最低时分别为对照组的67.16%、70.51%、54.49%、60.74%,鳃中最低为对照组的 80.50%、77.11%、70.51%、73.40%,且均在0.32 mg/L时取得。有机体通过增加体内酶活性以对外界环境的变化做出适应性反应,然而,有机体都存在自身应对外界变化的调节阈值,当机体自身难以抵抗外界环境变化时,将会产生氧化损伤。斑马鱼暴露于啶酰菌胺中,随着浓度和时间增大,肥满度(CF)、比肝重(HSI)和比鳃重(BSI)升高,暴露至21d,0.32mg/L下,CF、HSI、BS1与对照组相比均差异显著,分别为对照组的93.04%、175.00%、122.00%。斑马鱼在0.32 mg/L啶酰菌胺中暴露21 d,SDH活性分别为对照组的32.64%(肝脏)和56.48%(鳃);复合物Ⅱ分别为对照组的60.53%(肝脏)和66.35%(鳃)。CF、HSI、BSI变化可能指示肝脏和鳃中由于SDH与复合物Ⅱ的抑制造成能量供应不足,给机体组织造成了一定的毒性。建立了分析啶酰菌胺在斑马鱼体内浓度的方法,斑马鱼中啶酰菌胺经乙腈超声震荡提取、弗罗里硅土柱净化,在紫外波长210 rnn下检测,相对保留时间约为7.60 min,流动相比例为乙腈:水=65:35(V/V)。啶酰菌胺在斑马鱼体内的富集系数(BCF)分别为35.50(0.08 mg/L)和36.72(0.32 mg/L),属中等富集性,最大富集时期和达到富集平衡时期均出现在富集暴露14~28 d,将试验斑马鱼移至清水中,在鱼体内的消除半衰期小于1 d。
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:X174;S481.1

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