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《沈阳农业大学》 2008年
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高粱原花青素提取纯化及生物活性研究

黄朝晖  
【摘要】: 原花青素(procyanidins,简称PC)是一大类多酚化合物的总称。具有抗氧化、清除自由基、抗辐射、抗肿瘤、抗炎症、抗衰老和保护心血管活性、护肤美容、改善视觉等诸多生物功效。 高粱[Sorghum bicolor(Linn.)Moench]是禾本科高粱族高粱属一年生草本植物。它含有原花青素等很多化学成分,为了更好地利用高粱原花青素资源,本文对其做了初步研究。 1.采用乙醇提取高粱原花青素,正交试验得出最优提取工艺为:用70%乙醇,在70℃,提取2次,每次1.0h,原料和乙醇用量比为1:10;影响顺序是乙醇浓度>提取时间>料液比>提取温度。 2.采用AB-8大孔树脂吸附,经过水洗脱,去掉了大部分水溶性杂质,再用30%乙醇水溶液洗脱,富集了绝大部分高粱原花青素,经比色测定原花青素含量为86.47%;经聚酰胺树脂纯化后,高粱原花青素含量为79.62%。 3.高速逆流色谱分离纯化原花青素,采用正丁醇-甲醇-水体系(20:1:15)分离得到3个物质峰。经过HPLC-TOFMS分析,推测包含原花青素单体儿茶素、一种原花青素二聚体和一种原花青素三聚体。 4.抗氧化试验。总抗氧化力,三个样品中以聚酰胺部位最高,AB-8树脂部位次之,70%乙醇粗提物部位最低;聚酰胺部位、AB-8树脂部位和70%乙醇粗提物部位均表现出清除自由基活性,且都具有明显的量效关系;与模型组比较,聚酰胺部位、AB-8树脂部位和70%乙醇粗提物部位的MDA水平都明显下降(P<0.05);三个样品的小鼠血清中GSH-PX和SOD活力普遍提高,与模型组比较,差异显著(P<0.05)。 5.抗Lewis肺癌试验。高粱原花青素高、中、低三个剂量组,给药量分别为每公斤体重1g、2g和4g,给药天数为20d。结果:①高剂量组抑制肿瘤率为17.59%(P<0.05):②高、中、低剂量组肿瘤转移抑制率分别为80.56%(P<0.01)、72.12%(P<0.01)和61.1%(P<0.01),抑制率与药物剂量呈明显量效关系。 6.VEGF免疫组化实验,结果表明高粱原花青素高、中、低剂量组可明显抑制肿瘤细胞VEGF的表达,从而抑制肿瘤转移,预示高粱原花青素具有比较好的肿瘤抑制前景。 7.建立高粱原花青素含量快速检测方法。利用近红外反射光谱技术,采用偏最小二乘法(PLS)建立高粱原花青素含量预测模型。模型的内部交叉验证决定系数(R~2)为0.8657,标准差(RMSECV)为0.277;外部验证决定系数(R~2)为0.8919,标准差(RMSEP)为0.312。高含量和低含量样品的预测值与化学值的基本吻合。结论:用PLS建立的回归方程能比较准确地预测高粱原花青素的含量。 8.高粱原花青素的资源研究表明:各省区高粱的原花青素含量范围为0.01%~4.1%。原花青素平均含量超过1.5%有黑龙江等9个省区,平均含量超过2.0%的有云贵川三省;平均含量低于1.0%的有新疆等5个省区,平均含量最低的为新疆,仅为0.025%。总体来说,南方产区比北方产区原花青素含量高。
【学位授予单位】:沈阳农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R285.5

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