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《中国医科大学》 2018年
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家族及散发性乳腺癌BRCA1与FANCD2相关性研究

冯亮  
【摘要】:前言:家族性乳腺癌指的是两个同一家族成员患有乳腺癌的情况。而具有明确遗传因子的乳腺癌则被称为遗传性乳腺癌,占乳腺癌人群的5-10%。大多数遗传性乳腺癌与BRCA1和BRCA2有关。除BRCA1/2外,还有其他已知的乳腺癌易感基因,如p53、PTEN、ESR1、FGFR2和TOX3等,与这些基因突变相关的乳腺癌被归类为遗传性乳腺癌[1,2,3]。范可尼贫血(FA)是一种累及造血干细胞的常染色体隐性遗传性疾病,临床表现复杂多样。基因分型发现其至少有19个亚型(FANCA,FANCB,FANCC,FANCD1,FANCD2,FANCE,FANCF,FANCG,FANCI,FANCJ,FANCL,FANCM,FANCN,FANCO,FANCP,FANC,FANCQ,FANCR,FANCS和FANCT,其中至少12个基因已被克隆,这些基因可以解释差不多所有的FA病例[4,5]。目前的研究发现,由FA基因编码的蛋白质可以相互协调,通过“FANCONI贫血/BRCA途径”调节DNA损伤修复[6,7]。FANCD2与BRCA1是FANCONI贫血/BRCA通路中重要的组成成分。DNA突变是人类许多肿瘤疾病的主要原因。其直接原因主要是由不同类型的DNA损伤引起的,而不同因素引起的DNA损伤可以通过不同的修复途径进行修复[8,9]。DNA修复中的遗传缺陷也是许多遗传性疾病的分子基础,这些患者通常具备极高的肿瘤易感性[10]。有研究发现,乳腺癌相关的致癌基因BRCA1/2可与其他肿瘤抑制基因(如FA基因)形成复合物,通过同源染色体重组的方式调节基因修复以防止肿瘤发生[11,12]。目的:了解BRCA1与FANCD2基因在家族性、散发性乳腺癌及良性组织中表达情况及研究两者是否具有相关性。探讨两种基因在FA/BRCA通路中的作用。研究FANCD2的泛素化在散发性乳腺癌中的情况,探讨FANCD2泛素化在疾病进展过程中的作用。对所有恶性病例进行随访,分析伴有BRCA1、FANCD2基因表达和Fancd2泛素化差异的乳腺癌患者的病理学特点及愈后情况有何不同。材料与方法:采用免疫组化SP法检测家族性、散发性乳腺癌及乳腺癌良性增生共计335例蜡块组织中BRCA1及FANCD2蛋白的表达,研究BRCA1及FANCD2在不同组织中的表达情况。采用Western Blot技术检测56例散发性乳腺癌中FANCD2的蛋白水平及泛素化程度。收集所有乳腺癌病人的临床病理资料并随访病人的预后情况,分析BRCA1和FANCD2的表达,以及FANCD2的泛素化程度与家族性和散发性乳腺癌预后的关系,并结合TCGA数据库验证本次实验结果。结果:1、病例特征良性肿瘤组共47名女性,中位年龄46岁(18-71岁),病理结果包括纤维腺瘤(15例),囊性增生(24例),导管内乳头状瘤(7例),和硬化性腺病(1例)。288名原发性乳腺癌患者(表1),家族组组诊断中位年龄为52岁(31-76岁),散发组为50岁(25-79岁)。其中包括导管内癌(39例),浸润性导管癌(172例),浸润性小叶癌(47例)和其他罕见类型(30例)。组织学类型主要是I型(家族组:30.5%,散发组:21.1%)和II型(家族组:47.5%,散发组:53.1%)。大部分肿瘤T分期是T1(46.9%)和T2(43.1%),腋窝淋巴结转移率(41%)。根据2017年AJCC标准,大多数患者TNM分期为I期(家族组:43.3%,散发组:37.4%)或II期(家族组:36.2%,散发组:38.1%)。随访时间于2016年1月终止,中位随访时间为74.4个月(4-155个月)。中位DFS时间为91.8个月,1年,3年和5年DFS率分别为97.9%,91.7%和83.3%。在5年内发生了24例(8.33%)局部复发和29例(10.08%)远处转移。2、BRCA1和FANCD2的免疫组织化学染色1)BRCA1在良恶性乳腺组织中的表达多位于细胞质和细胞核中。FANCD2的典型染色结果在良恶性组织中主要是细胞核(图1)。表2显示了患者的临床特征和BRCA1和FANCD2的表达的相关性。家族组中BRCA1的表达与肿瘤大小(P=0.021),淋巴结转移(P=0.004),TNM分期(P=0.01),ER(P=0.014)和FANCD2表达(P0.001)呈正相关。然而,在散发组病例中未发现这些相关性。而散发组中FANCD2的表达与肿瘤大小(P=0.003),TNM分期(P0.001)和Ki-67指数(P=0.015)呈正相关。良性组织BRCA1(29/47,61.7%)和FANCD2(21/47,44.7%)多为阳性表达,而两种蛋白的表达没有相关性(P=0.206)。良性组织BRCA1阳性率高于SBC组织(61.7%对14.3%,P0.001),FANCD2阳性率高于SBC组织(44.7%对27.9%,P=0.069)。2)基于TCGA数据进一步分析及验证乳腺癌中BRCA1和FANCD2的表达。本实验的免疫组织化学显示BRCA1和FANCD2在乳腺癌组织和邻近组织中均表达。基于GEPIA的结果,BRCA1和FANCD2在乳腺癌组织中的表达均高于癌旁组织中的表达(图2)。我们使用TCGA数据集分析FANCD2和BRCA1的表达临床参数之间的关联。共计入组1080病例,由于入组要求不同,我们的结果与TCGA数据库验证的结果不完全相同(表3)。BRCA1和FANCD2在TCGA数据集中的表达与肿瘤大小(BRCA1:P0.001;FANCD2:P0.001)和ER表达(BRCA1:P0.001;FANCD2:P0.001)呈正相关,此外BRCA1和FANCD2表达之间存在正相关。FANCD2在TCGA数据集中的表达与TNM分期呈正相关(P=0.039)。TCGA数据库的上述结果与本研究的结果一致。3、BRCA1和FANCD2表达的预后价值根据家族组及散发组患者的BRCA1和FANCD2表达状态进行Kaplan-Meier生存分析研究。在家族组中,与BRCA1阴性(5年DFS率95.2%,中位无病生存时间108.8月)相比,BRCA1阳性者(5年DFS率77.8%,中位无病生存时间81.4月)预后较差(P=0.001,图3A)。然而,在家族组中,FANCD2阳性者组具有较低的5年DFS(78%vs 86.6%)和较短的DFS中位时间(79.7个月对96.7个月)。但FANCD2阳性与阴性者预后没有统计学差异(P=0.328,图3B)。散发组中,尽管BRCA1阳性组具有较低的5年DFS率(76.2%对84.9%)和较短的无病生存时间(92个月对94.3个月),但统计学上并无明显差别(P=0.22,图3C)。在散发组中,FANCD2阳性者预后较差(P0.001,图3D),5年DFS率(63.4%对91.5%)和无病生存时间(69.7个月vs 103.3个月)均低于阴性者。因此,我们得出结论BRCA1表达在家族组病例中具有显著的预后价值,而FANCD2表达在散发组病例中具有显著的预后价值。4、乳腺癌患者的单因素和多因素分析单因素分析显示,家族组患者的5年DFS率与TNM分期(P=0.001)和BRCA1表达(P=0.001)显著相关,而散发组患者的DFS率与肿瘤大小(P=0.001),淋巴结转移(P=0.004),TNM分期(P0.001),Ki-67表达(P=0.025)和FANCD2表达(P0.001)有相关性。多变量Cox分析还显示,TNM分期(III-IV与I-II,HR:2.042,95%CI:1.150-3.624,P=0.015)和BRCA1表达(阳性与阴性,HR:2.168,95%CI:1.142-4.113,P=0.018)是家族性乳腺癌预后的独立因素。在散发组中,TNM分期(III-IV与I-II,HR:4.361,95%CI:2.465-7.716,P0.001)和FANCD2表达(阳性与阴性,HR:1.192,95%CI:1.041-3.512,P=0.037)是预后的独立因素(表4)。5、FANCD2泛素化是SBC的独立预后因素FANCD2的泛素化反映了FA途径的功能性激活,并且我们的研究中FANCD2表达是SBC的独立预后因子。因此,我们对56个随机选择的SBC组织进行Western印迹检测,以探讨FANCD2泛素化是否与预后相关。我们用FANCD2-L和FANCD2-S的表达强度比值(L/S比值)(图4)以量化FANCD2泛素化水平,L/S比率范围为0.13至1.36(中位数:0.645)。随后将56例患者根据中位数分为高泛素化组(Ub High,≥0.645)和低泛素化低(Ub Low,0.645),部分Western印迹结果如图5(16,17)所示。通过随访我们发现Ub High患者的5年DFS率显著优于Ub Low患者(P=0.036,图6),单因素和多因素分析的结果见表5.在FBC病例中,Ub High患者有更好的5年无病生存率(85.7%对71.4%)和更长的中位生存时间(101.2个月对73.4个月)。多变量分析显示,除TNM分期(P=0.003)和FANCD2表达(P=0.006)外,FANCD2泛素化水平也是散发性乳腺癌患者的独立预后因素(Ub High vs.Ub Low,HR:0.335,95%CI:0.128-0.875),P=0.026)。结论:1、BRCA1和FANCD2在乳腺癌中存在正相关。乳腺癌的发生和发展与FANCD2的表达和FA/BRCA途径的失活有关。BRCA1的突变可通过激活FANCD2表达来影响乳腺癌的发生发展,FANCD2也可能通过FA/BRCA途径影响乳腺癌的形成。2、家族性乳腺癌中BRCA1阳性者预后更差,而FANCD2的表达与预后的关系不确切。3、散发性乳腺癌中高FANCD2表达和低FANCD2泛素化预示着相对较差的预后。FANCD2泛素化的过程受到了抑制。有报道这可能达与泛素化连接酶的活性异常有关,也有可能与FA/BRCA通路的上游功能异常,导致下游FANCD2的泛素化受影响,最终影响整个通路发挥作用,导致恶性肿瘤的出现。4、在乳腺癌中,肿瘤大小,淋巴结浸润情况,TNM分期,ER,BRCA1表达情况是显著的预后因素。而在散发性乳腺癌中FANCD2表达及泛素化程度也可作为评价预后的独立因素。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R737.9

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4 Zi-Zhen Zhang;Yuan Jie Charles Liu;Xiao-Lu Yin;Ping Zhan;Yi Gu;Xing-Zhi Ni;;Loss of BRCA1 expression leads to worse survival in patients with gastric carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2013年12期
5 ;Will Chinese ovarian cancer patients benefit from knowing the BRCA2 mutation status?[J];癌症;2012年01期
6 ;Individualized Chemotherapy in Advanced NSCLC Patients Based on mRNA Levels of BRCA1 and RRM1[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年03期
7 TANAKA Kaoru;;BRCA1 involved in regulation of Bcl-2 expression and apoptosis susceptibility to ionizing radiation[J];Science China(Physics,Mechanics & Astronomy);2011年05期
8 刘连新,朱安龙,乔海泉;乳腺癌与BRCA[J];国外医学(肿瘤学分册);1999年04期
9 丁晓曼,郎景和;STUDY OF BRCAIGENE IN HEREDITARY BREAST AND OVARIAN CANCER[J];Chinese Medical Sciences Journal;1999年04期
10 王江芬;秦嘉岳;高润芳;张蒙;张萌萌;张亚芬;;100例遗传性乳腺癌胚系基因BRCA1/2突变研究[J];中华乳腺病杂志(电子版);2018年03期
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2 史庭燕;Pan WANG;Caixia XIE;Sheng YIN;Di SHI;Congchong WEI;Wenbin TANG;Rong JIANG;Xi CHENG;Qingyi WEI;Qing WANG;Rongyu ZANG;;BRCA1 and BRCA2 mutations in ovarian cancer patients from China:ethnic-related mutations in BRCA1 associated with an increased risk of ovarian cancer[A];2017中国长三角遗传学大会会议手册[C];2017年
3 李文凤;胡震;张斌;曹明智;王永胜;沈镇宙;邵志敏;;BRCA1 1100delAT突变:中国家族性乳腺癌人群中重复出现的突变[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年
4 Tatyana Grushko;Olufunmilayo I Olopade;;BRCA1 Promoter Hypermethylation is Associated with Expression and Copy Number of BRCA1 in Sporadic Breast Cancer[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年
5 Wang Ziyi;Yading Xie;Guoshuang Shen;Fangchao Zheng;Dengfeng Ren;Jiuda Zhao;;The Relationship between BRCA1/2 Mutations and the Efficacy of DNA-Damaging Drugs in Triple-Negative Breast Cancer:A Meta-analysis[A];第十二届全国免疫学学术大会摘要汇编[C];2017年
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7 Carlota Costa;Jose Javier Sanchez;Ana Gimenez-Capitan;Teresa Moran;Susana Benlloch;Miquel Taron;Rafael Rosell;;BRCA1,RAP80 and SUMO ligases (PIAS1 and PIAS4) mRNA expression levels and survival in advanced gastric cancer patients receiving second-line docetaxel chemotherapy[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年
8 史庭燕;Pan WANG;Wenbin TANG;Rong JIANG;Sheng YIN;Di SHI;Xi CHENG;Qing WANG;Qingyi WEI;Rongyu ZANG;;Correlation of residual disease and survival in germline BRCA mutationassociated ovarian cancer[A];2017中国长三角遗传学大会会议手册[C];2017年
9 ;The mechanism of BRCA1 participate sporadic breast carcinomas genesis[A];两岸三地药理学与临床药理学术会议论文集[C];2008年
10 Chen Liang;Hui Wu;Lingfei Ma;Junyan Lei;Cuihong Jin;;Progress in the role of BRCA1 regulating oxidative damage in neurodegenerative diseases[A];2018环境与健康学术会议--精准环境健康:跨学科合作的挑战论文汇编[C];2018年
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