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《中国医科大学》 2003年
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β-catenin和E-cadherin在胃癌的表达及其与胃癌病理生物学特征关系的研究

孙乔  
【摘要】: 目的 检测β-catenin(β-cat)和E-cadherin(E-cd)在胃癌组织和癌旁正常粘膜中的表达,探讨二者与胃癌病理生物学特征的关系,为指导胃癌的临床治疗提供一定的依据。 方法 一、实验材料 1.病例标本 收集中国医科大学附属第一临床学院肿瘤科2001年4月至2002年4月间手术切除的早期胃癌石蜡标本34例和进展期胃癌新鲜标本57例并附详细病理资料。 2.实验用品 2.1 实验试剂 β-catenin鼠抗人单抗,E-cadherin兔抗人单抗,碱性磷酸酶标记的羊抗鼠二抗,S-P免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒、BCIP/NBT显色试剂盒,PVDF膜。 2.2 实验设备及软件 超声粉碎机、组织匀浆机、垂直板电泳仪、转印仪、紫外分光光度记、高速低温离心机、液氮罐、摇床、冰箱、切片机、烤片机、高压锅、温育箱、显微镜、显微照相装置、微机、扫描仪、图像分析系统及SPSS for Windows 10.0统计分析软件等。 二、实验方法 1.免疫组织化学:采用S-P法检测β-cat和E-cd蛋白的表达。结果判定:将癌组织染色结果同正常胃粘膜染色结果相比较,分为正常表达和异常表达。正常β-cat和E-cd阳性表达皆定位于细胞膜,呈棕黄色细颗粒状着色。癌组织每张切片选5个 高倍视野,每高倍视野记数100个瘤细胞。290%的肿瘤细胞表 达为正常细胞膜阳性染色即为该标本呈正常表达;<卯物的肿瘤 细胞呈细胞膜阳性表达或缺失、细胞浆和/或细胞核异位表达皆认 为该标本呈异常表达。 2.Western Blot标本组织,加裂解缓冲液,剪碎组织,冰水浴 中组织匀浆、细胞超声破碎,低温高速离心,提取上清液,即为所需 蛋白样品。电泳、转印,经封闭后加相应的一抗、二抗及显色试剂 检测。图像扫描人计算机,进行灰度值的测定。 三、统计学分析 利用 SPSS for Windows 10.0统计分析软件对结果进行处理分 析,免疫组化结果采用 x‘检验和 Fisher精确概率法;Western Blot 图像的灰度值结果分析采用配对t检验。P<0.05有统计学意 义。 结 果 一、免疫组化结果 1.胃正常粘膜及癌组织中p-catenin与E-cadheds的表 达:在10例正常胃粘膜组织中,p-cat和E-cd阳性表达均定位 于粘膜上皮细胞侧一侧连接的细胞膜上,未见异常表达。34例早 期胃癌中,p-Cat和 E-aid异常表达率分别为 35.3%及38·2%; 57例进展期胃癌组织中,p-Cat与E-Cd的异常表达率分别为 40.35%及 56.14%。表现为细胞膜阳性表达减弱、缺失及胞浆弥 漫状阳性染色。二者在早期胃癌和进展期胃癌中的异常表达率没 有明显的差异(P二 0.63和 P二 0.098)。 2.胃癌p—catenin和E-cadherin异常表达与病理生物学特 征的关系:在侵袭性表型的进展期胃癌中,p-C8t和E-Cd的异 常表达明显增加(P<o.05*淋巴结多数转移(数量歹5个)的进 ·2· 展期胃癌中,p-cat和 E-cd的异常表达显著增加(P<0.05厂但 p-Cat的异常表达在不同组织分型和不同癌灶大小的胃癌中无 显著统计学意义k>0.05X E-Cd的异常表达亦与癌灶大小无 相关性河>0.05人在粘膜下癌和淋巴结转移(+)的早期胃癌 中二者的异常表达具有显著的统计学意义河<o.05人 3.胃癌p-catenin和E-cadherin表达之间的关系:根据p- eat和E-cd的免疫组化结果将早期胃癌和进展期胃癌标本分组, 进行组间比较,具有显著性差异P<O.05人 H、Western Blot结果 癌旁正常胃粘膜和癌组织中大部分可见到特异性条带的出 现,但对染色条带进行灰度值测定发现癌组织中p-cat含量明显 增高,利用配对t检验分析发现在两种组织中p-C8t表达量有显 著性差异u=0.022人并且该差异也与免疫组化结果具有一致 性。 结 论 l.胃癌组织中有p-catenin和E-ca仙erin的异常表达。癌 组织p-catenin表达含量明显增高。p-catenin与E-ca1erin 异常表达间然正相关性。 2.p-catenin和E-cadherin异常表达与胃癌生物学行为 (大体分型、生长方式、浸润深度、淋巴结转移及转移程度)呈正相 关。 3.联合检测p-catenin/E-cadhrin的表达对评估胃癌恶性 表型、判断淋巴结转移及指导临床工作有一定参考价值。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R735.2

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