收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

维拉帕米诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的实验研究

王朋  
【摘要】: 目的 增殖性玻璃体视网膜病变(简称PVR)是孔源性视网膜脱离(简称RRD)的常见并发症和手术失败的主要原因,尽管玻璃体视网膜手术技术不断提高,但复发率并未改善,同时玻切手术本身就是诱导PVR形成的一个危险因素,因此,如何在PVR形成的早期就应用药物抑制其发生和发展是眼科医生急需解决的问题。视网膜色素上皮细胞(简称RPE)是PVR形成时最重要的细胞。抑制PVR的关键就是抑制RPE细胞的增殖。近期PVR研究的热点是借助凋亡途径控制细胞的增殖,主要是施加凋亡诱导剂,使迁移增殖的RPE细胞发生凋亡,从根本上阻止PVR膜的形成和进一步发展。现今用于诱导RPE细胞凋亡的药物主要是抗代谢药,这些药副作用大,患者不易接受。维拉帕米是一种可靠的钙通道阻滞剂,副作用小、方便、价廉、易于得到。研究证明,维拉帕米对其他组织细胞的凋亡具有双重调节作用,同时钙离子在凋亡中的作用也不十分清楚,且有关维拉帕米对RPE凋亡的诱导作用及机制国内外均未见报道。因此本实验进行了人视网膜色素上皮细胞原代和传代培养,施加维拉帕米诱导其凋亡,来确定诱导RPE凋亡的有效作用浓度和时间,从而为今后探讨维拉帕米在增殖性疾病中的临床应用奠定理论基础。 方法 一、组织来源及准备 在无菌条件下,取我校一院眼科角膜移植后的供体眼球。 二、人RPE细胞的培养 无菌状态下,采用酶消化法,分离和种植人RPE细胞于24孔 板内,待细胞融合后,胰酶传代。 三机’I’f比色法测定药物对RPE增生的影响 将第 3代 RPE细胞以 2 X 10’个/00gi的细胞密度接种于 96 IL塑料培养板中,加人40m牙L,80m珍L,160m才L,320m牙L的维 拉帕米,培养24小时后,应用M’I’f比色法,在全自动酶标仪上测 其在490urn处的吸光值A。计算细胞增生抑制率,并对数据进行 统计学分析。 四、凋亡的检测 将第3代的RPE细胞分三组进行凋亡检测。第一和第二组 分别加人维拉帕米80mg/L和 160 mg/L,第三组作为对照组未加 药。采用HE染色、AO荧光染色以及透射电镜进行观察。以 80mg/L,160 mg/L浓度的维拉帕米,作用 12-72小日后,力人 PI 染液后,经流式细胞仪检测。通过计算凋亡区(亚二倍体峰)细胞 所占百分比得出凋亡率。 结 果 在测定药物对RPE增生影响的实验中,细胞抑制率分别为 13.55%、16.71%、42.34%和51.of%,随着浓度增大,细胞抑 制率不断上升,结合方差分析和t检验证明维拉帕米对人RPE细 胞增殖有明显的抑制作用,且呈明显的剂量依赖关系。结合光镜。 电镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测凋亡所得结果为80 mgll和 160mg/l维拉帕米均可诱导RPE凋亡。在同一浓度时,随着时间 延长,凋亡率不断增加,在同一时间内,药物浓度增加,凋亡率也不 断增大,经统计学分析证明其差异具有显著性。结果显示 160mg/ L维拉帕米作用 72小时,凋亡率可达 49.3%。 结 论 1.维拉帕米能有效抑制体外培养的人RPE细胞增生,且呈明 ·2· 显的剂量依赖关系。 2.维拉帕米能够诱导体外培养的人RPE细胞凋亡,本实验条 件下,160mg/L是诱导凋亡的最适浓度,72 /J’时是凋亡的最佳作 用时间。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 俞济舟;;肾上腺素抵消维拉帕米对阵发性室上性心动过速病人的电生理效应和治疗作用[J];国际心血管病杂志;1990年02期
2 王悦喜,陈萍,张剑,曹中朝,孟庆余;口服缓释与静脉注射维拉帕米对室上性心动过速患者的食管电生理效应[J];中国心脏起搏与心电生理杂志;1996年02期
3 戚文航,潘佩文,林陆仙;维拉帕米终止药物性尖端扭转型室性心动过速一例[J];中华心血管病杂志;1999年02期
4 李长运,刘慧,杨庆福,张彦周;维拉帕米防治缺血和缺血/再灌注性室颤的探讨[J];河南医药信息;2001年18期
5 姚春芳;硝苯啶、维拉帕米和地尔硫对肾功能的影响[J];国外医学.药学分册;1989年01期
6 刘迺丰,楼定安;维拉帕米和糖基化对细胞内胆固醇含量的影响[J];中国药理学通报;1991年01期
7 王一尘,孙伟成,沈明珍,蒋锦琪,荣烨之;美托洛尔与维拉帕米治疗阵发性室上性心动过速的比较[J];中国新药与临床杂志;1993年05期
8 吴振强,薛扬华;维拉帕米治疗低血压状态阵发性室上性心动过速[J];温州医学院学报;1994年03期
9 陈树元,黄建邦,刘雪芬,石兴华;维拉帕米对人血PMN细胞呼吸暴发和氧自由基的抑制作用[J];中国药理学通报;1995年02期
10 孙秀斌,樊淑菊,隋显哲,张连生;维拉帕米治疗扭转型室性心动过速成功一例[J];临床心电学杂志;1996年01期
11 徐长生,高习文,刘涌,陈根本,姜枫,袁锦华,张亮;维拉帕米治疗肺源性心脏病20例疗效观察[J];人民军医;1996年07期
12 冯毅,刘乃丰,陈日新,刘克年;维拉帕米对人单核巨噬细胞蛋白质、DNA、RNA合成的影响[J];南京铁道医学院学报;1997年01期
13 赵延恕,祁述善,沈向前,周胜华;维拉帕米对先天性心脏病右室心钠素的影响[J];山西临床医药;1997年03期
14 曹琼,张薇,刘旭,李贵双,高华安,尹红;维拉帕米抑制犬在体心脏早期后除极及室性心动过速的研究[J];中国介入心脏病学杂志;1997年02期
15 徐正林,贾连旺;舌下含服维拉帕米治疗肥厚梗阻型心肌病6例超声心动图观察[J];医学理论与实践;1997年08期
16 刘元生,孙慧宽,邱能庸,张艳萍;吲哒帕胺、维拉帕米对兔心肌再灌注损伤保护机制的探讨[J];药学实践杂志;1998年06期
17 潘爱华,刘求理,刘忠浩;维拉帕米对缺血后大鼠视网膜电生理功能和节细胞代谢的影响[J];中国体视学与图像分析;1998年04期
18 钟一声!200025,李浒源,金婉容,赵仲礼,陈盛举,施耀卿,曲莉;维拉帕米在控制半乳糖性白内障中的作用[J];眼科研究;2000年02期
19 王达理,南柏松;维拉帕米对心肌细胞的毒性作用[J];中国临床药理学与治疗学;2000年02期
20 汪晗,陈金明,李泽;维拉帕米治疗右室流出道室性早搏一例报告[J];第二军医大学学报;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 范平生;修林;汪世存;李继德;冯克海;朱德发;孙昕;陈飞虎;王晓琰;陈蓉;林新民;庄建生;;靶动脉灌注维拉帕米提高抗肿瘤药物疗效的基础及临床研究[A];安徽省第五届“兴皖之光”青年学术年会论文集(医科卷)[C];2005年
2 魏文斌;;视网膜色素上皮肿瘤[A];中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会论文汇编[C];2008年
3 郭树忠;王臻;鲁开化;张琳西;刘剑波;;钙通道阻滞剂维拉帕米对增生性瘢痕成纤维细胞的作用[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
4 赵永波;陈英辉;王乃东;;维拉帕米对耐苯妥英纳和卡马西平癫痫模型大鼠电生理和行为的影响[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
5 鲍卫汉;陈东明;黄辉;赵霞;;维拉帕米对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
6 秦军;章文毅;周新泽;毛勤生;;实验性急性胰腺炎促炎细胞因子的变化及维拉帕米保护作用的研究[A];中华医学会第10届全国胰腺外科学术研讨会论文汇编[C];2004年
7 孙璐;孙玉明;钟大放;;维拉帕米在比格犬体内代谢研究[A];第八次全国药物与化学异物代谢学术会议论文摘要[C];2006年
8 梅竹;刘连科;郭志睿;吴恒芳;杨笛;束永前;张寄南;;维拉帕米对A549及A549/DDP细胞TCTP表达的影响[A];中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议论文汇编[C];2010年
9 冯春光;付强;王彦炯;王临光;吴强;黄宜杰;;经抽吸导管早期应用维拉帕米对急性心肌梗死再灌注无复流的疗效[A];《中华急诊医学杂志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine创刊一周年庆典《中华急诊医学杂志》第十届组稿会、第三届急诊医学青年论坛论文汇编[C];2011年
10 武慧敏;万光明;;辛伐他汀抑制牛视网膜色素上皮细胞增生的实验研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙璐;维拉帕米代谢的微生物模型研究[D];沈阳药科大学;2003年
2 黄蔚;肾上腺髓质素调节视网膜色素上皮细胞及细胞内信号传导通路的研究[D];第四军医大学;2002年
3 宋宗明;IL-1Ra对培养RPE炎前因子表达和实验性PVR的影响[D];第四军医大学;2001年
4 陈冬红;视网膜色素上皮细胞在有色光信号传导中的作用[D];复旦大学;2003年
5 刘秀红;2450MHz微波辐射的损伤机理及生物学防护作用研究[D];第一军医大学;2002年
6 邝国平;糖基化终产物在糖尿病视网膜病变中的作用机制[D];中南大学;2003年
7 郭瑶;缺血性视神经病变视网膜细胞凋亡信号转导初步探讨[D];中国医科大学;2007年
8 赵芳;表没食子儿茶素没食子酸酯单用及联合环孢菌素A或维拉帕米逆转白血病细胞多药耐药的实验研究[D];山东大学;2005年
9 楚冰;P-糖蛋白在慢性癫痫大鼠脑组织的表达及药物干预的研究[D];苏州大学;2006年
10 曹利群;CD81在正常、脱离及再复位大鼠视网膜中的表达[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭洪胜;维生素E、C与维拉帕米联合预防大鼠睾丸纤维化实验观察[D];新疆医科大学;2004年
2 王朋;维拉帕米诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的实验研究[D];中国医科大学;2003年
3 赵峰;VP-16对Tca8113的作用及维拉帕米增效作用的研究[D];青岛大学;2005年
4 刘伟军;Ca~(2+)在电磁场刺激骨髓间充质干细胞的增殖与分化过程中作用的研究[D];华中科技大学;2006年
5 田勇;维拉帕米对耐恩诺沙星大肠杆菌耐药性的影响[D];中国农业大学;2003年
6 范军军;养心复脉汤对不同药物诱发大鼠心动过缓的影响[D];山西医科大学;2008年
7 刘彤;急性心房扩大对兔心房有效不应期的影响及维拉帕米的干预作用[D];天津医科大学;2003年
8 山峰;肝脏缺血再灌注损伤及干预因素的研究[D];青岛大学;2005年
9 吴敏;洛贝林逆转结肠癌细胞株HCT-8/VCR多药耐药的实验研究[D];中南大学;2009年
10 郭喻;肝纤维化精密切片技术的建立及其在药物代谢研究中的应用[D];武汉大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陈列欢;维拉帕米治疗心血管疾病并非最优[N];医药经济报;2003年
2 龙安民;维拉帕米治房颤 年长者更需谨慎[N];健康报;2007年
3 白衣侠男;维拉帕米可致房颤加重[N];医药经济报;2007年
4 黄文婧;国内首创人视网膜色素上皮干细胞注射液[N];科技日报;2005年
5 孙玉龙;快速型心律失常的药物选用[N];农村医药报(汉);2008年
6 记者  郭林;英科学家通过细胞移植恢复盲鼠视力[N];光明日报;2006年
7 胡运韬;超薄植片带来光明希望[N];健康报;2006年
8 陈金伟;抗心律失常药有时会“伤心”(下)[N];中国医药报;2006年
9 陈金伟;心律失常分类及辨别[N];中国医药报;2006年
10 杨洋;心梗并发症的治疗[N];农村医药报(汉);2007年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978