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《中国医科大学》 2003年
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Tiam-1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义的研究

杜江  
【摘要】: 目的 探讨非小细胞肺癌Tiam-1(T Lymphoma invasion and metastasis 1 T淋巴瘤侵袭和转移诱导因子1)的表达及临床意义。 实验材料 1.病例及组织标本 随机选取86例从1999年4月~2000年6月间中国医大一院胸外科手术切除的原发非小细胞肺癌组织标本。其中,男61例,女25例,年龄36~76岁,平均58.2岁。鳞癌42例,腺癌44例。分化程度:高、中分化55例,低分化31例。病人术前均未行放化疗及免疫治疗,术后所有诊断经病理证实。所有标本均经10%甲醛固定,常规石蜡包埋。另获取上述病例中转移淋巴结15例,正常肺组织手术切除标本15例。共47例获得随访资料,随访时间6~45个月。 2.主要试剂 一抗是由美国Santa Cruz公司提供的兔抗人Tiam-1(H-300)蛋白单克隆抗体,工作浓度1:100。S-P试剂盒为北京中山生物制剂有限公司的通用型产品。 实验方法 1.免疫组化染色 将石蜡包埋的标本制成5μm厚石蜡切片,丙酮固定10分钟后风干。脱腊后,3%的过氧化氢-甲醇液室温浸泡10分钟,以消 除内源性过氧化物酶活性。滴加1:50封闭用正常血清室温孵育 20分钟,PBS稀释一抗Tiam-1(1:100)室温孵育2小时或4℃过 夜;1:100生物素标记二抗(IgG)室温孵育30分钟;1:100S-P溶 液室温孵育20分钟;DAB显色3一分钟,苏木素复染,脱水,透 明,中性树胶固定,封片。PBS代替一抗做阴性对照。制片:将石 蜡包埋的标本制成sop厚石蜡切片,贴于涂有APES防脱片浓的 载玻片上,丙酮固定10 d后风干。 2.染色结果判定: 阳性判定以着色强度及阳性细胞数综合判断:着色强度分为, 无色为0分、浅黄色为1分、棕黄色为2分。阳性细胞数分为,S 10见为二分、10阮一50院为二分、50防一75伍为3分、>75邮为大 分。两项得分相乘结果>3为阳性病例(十八2 3阴性(刁。最 终结果是由两位病理医师用双盲法分别鹏每例切片所获得的一 致意见。 3.统计分析方法: 应用SPS10.0统计软件处理。Tiam—且表达与临床病理因 素的关系的分析采用卡方检验和确切概率法。Cox模型进行预后 多因素分析。P<o.田为有统计学意义。 实验结果 二.Tiam一二蛋白阳性染色的分布及特点: Tiam一二蛋白在正常肺泡上皮、间质及正常支气管粘膜上皮 中均无表达。在肺鳞癌细胞中,Ti一二蛋白存在于癌细胞胞浆 中,被染成黄褐色颗粒状,尤以癌巢中央部明显(图乙2人在肺腺 癌细胞中,Tiam一二蛋白同样存在于胞浆中,分布较均匀,胞膜表 达不明显(图3,4人Tiam—l蛋白在钢支气管肺泡细胞癌中无表 达(图5人在淋巴结检测中,Tiazn一二蛋白在淋巴结边缘窦转移 ·2· 癌细胞内呈阳性表达(图6人而在正常淋巴组织中则呈阴性表达。 2.Tiam一蛋白表达与临床及病理学因素间的关系 **小细胞肺癌Tiam一二蛋白表达与病理学分化程度的关 系 在86例肺癌中,高、中分化55例,阳性率40%(22/5太低分 化31例,阳性率67.74%p 人统计分析显示两组间表达有 显著性差异口<o.05人 K*小细胞肺癌TiamJ蛋白表达与肿瘤转移间的关系 86例肺癌中有转移者(包括淋巴结转移及远隔转移万6例, 其中 Tiam一二蛋白表达阳性 25例,阴性*例;无转移者 50例,其 中阳性格例,阴性32例,两组间比较有显著性差异(P<o.05人 ③*小细胞肺癌Tiarn对蛋白表达与年龄、性别、病理类型、 临床州间均无明显相关性u>0刀5人 3.Tiam一二蛋白的表达与生存期的关系 本组86个病例中,47例获得术后随访。随访时间最长为45 个月,最短为6个月,平均随访23个月。生存期<3年者0am一五 阳性表达率84.2%,明显高于生存期Z3年者的阳性表达率32. 14%,两者有显著差异。多因素的COX回归分析表明:术后生存期 仅与 NSCLC的临床分期u=0.006)和分化程度显著相关,而 Ti- am一二蛋白的表达不是影响非小细胞肺癌的独立预后因素。 结 论 二.Tiam一二蛋白在NSCLC中表达明显增高。 2.NSCLC分化越低Tiaxn一蛋白表达越强。 3.NSCLC转移病例Tiam一蛋白表达明显高于非转移病例。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R734.2

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