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《中国医科大学》 2003年
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氟吗啉诱导V79和CHL细胞基因突变和染色体畸变研究

李增刚  
【摘要】: 目的 氟吗啉是应用于防治黄瓜霜霉病、葡萄霜霉病、番茄晚疫病、辣椒疫病和大豆根腐病的杀菌剂,使用浓度为100-200mg/L时,其防治效果较好,应用范围广泛,与人们生活关系十分密切。在关于氟吗啉的毒理学研究中,氟吗啉Ames试验和小鼠微核试验均为阴性结果;95%氟吗啉原药亚慢性经口毒性研究表明氟吗啉引起大鼠肝功能异常并有贫血倾向。我们应用中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL和V79)对氟吗啉进行致突变性研究,对人类健康和环境的安全具有重要的科学价值和社会意义。 实验材料和方法 1.细胞 V79细胞购于中国科学院生物化学与细胞生物学研究所,用1%次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶(HAT)培养基处理7d,分成若干小瓶,液氮冻存备用。CHL细胞引自国家沈阳新药安全评价研究中心。 2.药物 氟吗啉(flumorph,分子式:C_(21)H_(22)FNO_4,分子量:271.4),纯度98%,由沈阳化工研究院提供。 3.方法 3.1 在非代谢活化试验条件下测试氟吗啉对V79细胞的毒性和CHL细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。 3.2 在代谢活化与非代谢活化试验条件下进行V79细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因突变分析试验,剂量设计为500、100、20和4μg/ml,平行设阴性、阳性对照,代谢活 化与非代谢活化试验平行进行,应用10pg/IYil6-琉基鸟瞟吟N -TG)选择突变集落,每剂量组同时进行细胞集落形成率测定和 突变集落形成率测定,统计HGPRT基因突变率。 3.3 在代谢活化与非代谢活化试验条件下进行CHL细胞染 色体畸变分析试验,剂量设计为55上50、125和62.sndlnl,分别 染毒24h和48h,乎行设阴性、阳性对照,代谢活化与非代谢活化 试验平行进行,常规制片,采用常规Giemsa染色和G-显带技术, 每剂量组各观察100个核型,统计染色体畸变率。 实验结果 1.细胞毒性试验结果 在非代谢活化试验条件下,应用氟吗琳500上00、20尸和0.8 p牙Ims个剂量处理 V79细胞Zh,相应细胞集落形成率为7.3%。 40.4%在8.0%J2.互%和98.9%;氟吗琳对 CHL细胞半数抑制浓 度(IC。)为 250pg/ml。 2.氟吗琳诱导V79细胞HGPR基因突变试验结果 在非代谢活化和代谢活化试验条件下,应用氟吗琳500*00。 20和4pgld 个剂量处理 V79细胞Zh,突变集落形成率均与阴 性对照突变集落形成率无差异(P>o.05入说明氟吗琳不会引起 V79细胞突变集落形成率增加。 3.氟吗琳诱导CHL细胞染色体畸变试验结果 应用氟吗琳55上50上 和62.sndlnl4个剂量处理 CHL细 胞时,在非代谢活化试验条件下染毒24h和48h,各剂量组染色体 畸变率均小于 5%;在代谢活化试验条件下,染毒 24h和48b,各剂 量组染色体畸变率均大于5%,而且染色体畸变率随着染毒浓度 升高而增加,呈现明确的剂量反应关系石显带技术进一步证实该 实验结果,并发现4q(浅染区)断裂频发,是断裂热点。 ·2· 结 论 1.氟吗琳不会引起V79细胞HGPR基因突变。 L氟吗琳在非体外代谢活化试验条件下,不会诱发CHL细胞 染色体畸变;但在代谢活化试验条件下,可诱发CHL细胞染色体 畸变。 3.使用氟吗琳100-200m叭防治植物病害不会对人类和环 境造成危害。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R114

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