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《中国医科大学》 2002年
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Caspase-3和BcL-2在胆囊癌中的表达及意义

何忠野  
【摘要】: 前言 胆囊癌是胆道系统中常见的恶性肿瘤,约占肝外胆道癌的25%,其确诊率低、预后差、术后生存率低。有研究表明,术后5年生存率仅为6.6%,如不能行根治性切除,术后的中位生存时间仅为3.2个月,根治性手术切除率仅为35.5%。目前认为胆囊癌的发生、发展与细胞凋亡有关,其发生可能由细胞增殖与死亡速率平衡失调引起。但对胆囊癌发生、发展的具体分子生物学机制尚不十分清楚。 Caspase-3是ICE家族重要成员是凋亡的执行者,BcL-2是虚泡性B细胞淋巴瘤的癌基因。其蛋白产物[BcL-2]可通过阻断细胞色素C的释放抑制Caspase-3活性从而抑制凋亡。有研究表明在胃癌、膀胱癌、卵巢癌、乳癌等多种肿瘤中,Caspase-3、BcL-2均存在异常表达,且二者关系密切,但在胆囊癌中尚无对二者进行研究。 本研究应用免疫组化方法,检测胆囊癌、胆囊腺瘤、慢性胆囊炎中Caspase-3、BcL-2的表达,结合临床资料探讨Caspase-3、BcL-2的表达异常与胆囊癌发生、发展的关系。 实验材料和方法 收集中国医科大学1992—2001年胆囊癌存档蜡块标本41例,胆囊腺瘤标本13例,慢性胆囊炎标本9例。胆囊癌组中,男性18例,女性23例,男女之比=1:1.14。病人年龄34—73岁,平均年龄58岁。其中,高分化腺癌15例,中分化腺癌14例,低分化腺癌12例(包括未分化癌),鳞癌1例(高分化),腺鳞癌1例(高分 化人胆囊肉瘤1例(低分化人小细胞癌1例(低分化人 采用链霉亲生物素一过氧化物酶免疫组织化学技术KP 法人标本均为10%福尔马林固定,石蜡包埋。切片厚度4Pm。 以已知阳性淋巴结(BcL-2人扁桃腺(Caspase-3)组织切片为阳 性对照。以PBS液代替一抗作为阴性对照。阳性着色为棕黄、棕 褐及浅黄色,主要位于细胞浆,对照阳性切片,计数浆染色阳性的 细胞,随机计数m个高倍视野,计数互见O个细胞,计算阳性细胞 百分率,> 10%为阳性表达(+X<10%为阴性表达(一人应用 SPSS软件进行统计学处理,两组间阳性率比较用X‘检验。 结 果 9例慢性胆囊炎中,Caspase-3表达均阳性,BcL-2表达均阴 性。13例胆囊腺瘤中,Caspase-3在cL-2表达均阳性。在41例 胆囊癌中CasPase-3阳性19例,阳性率低于胆囊良性病变差异 有显著性;在41例胆囊癌中BCL-2阳性14例,显著高于慢性胆 囊炎而与胆囊腺瘤相比显著降低。 41例胆囊癌中,Caspase-3表达阳性19例,阴性ZI例,阳性 率为 46.3%。其中高分化组 Caspase-3的表达明显高于中、低分 化组 P<0.05。胆囊癌 Nevin分期 1+11十皿 Caspase-3的阳性 率为78.6呢,明显高N+V期 Caspase-3的阳性率29.7阮。P< 0.of。无淋巴结转移组Caspase-3阳性率为75%,明显高于有淋 巴结转移组阳性率28阮。P<o.01。Casppsp-3的表达与病人的 年龄、性别无显著关系。 41例胆囊癌中,BCL-2蛋白表达阳性14例,阴性27例,阳性 率为 34.1%。其中高分化组 BCL-2蛋白的表达明显高于中、低 分化组P<o.皿1。胆囊癌Nevin分期1+H十皿BcL一二蛋白的 阳性率为 64.3%,显著高于 W+V期 BcL-2蛋白的阳性率 18% ·2· P<0.001。无淋巴结转移组 BCL-2蛋白的阳性率为 68.8%,显 著高于有淋巴结转移组阳性率 12%P<0 01。BCL-2蛋白的表达 与病人的年龄、性别无显著关系。 胆囊癌中14例BcL-2阳性的病例中Caspase-3阳性13例 92.9呢;27例 BcL-2阴性的病例中 Caspase-3阴性 22例 幻.5啪。二者有很好相关性P<0.00,且二者表达有共位性即 Caspase-3表达强的区域,BcL-2表达也强。 讨 论 BCL-2是一种抑制细胞凋亡的基因,其编码的[BCL-2 j蛋 白过度表达可抑制细胞调亡,促进肿瘤发生。本研究发现在高分 化胆囊癌中 BCL-2蛋白表达明显高于中、低分化胆囊癌(P< 0.01人在胆囊癌早期(I+11十皿)中的表达明显高于在晚期 * V)中的表达(P<0.co门,在无淋巴结转移组中BCL-2蛋白表达 明显高于有淋巴结转移组口<0 of人在胆囊腺瘤及胆囊癌中 BCL -2蛋白表达显著高于慢性胆囊炎(P<0.05人 目前认为胆囊腺 瘤是一种癌前病变,可以看出,BCL-2抑制凋亡的作用对于胆囊 癌的发生有极大作用,是胆囊癌的早期分子事件,同文献报导相 符。BCL-2蛋白在早期(Ill Ill)和高分化胆囊癌中的表达明显 高于晚期(wV)和中低分化胆囊癌,K8.8啪J2%*<o.001人 说明BcL-2蛋白异常表达与胆囊癌的生物学行为密切相关。遗 憾的是本实验未涉及胆囊癌预后问题,其异常表达与胆囊癌预后 的关系有待进一步研究。 Caspase-3是ICE家族重要成员,目前公认:在多种刺激引起 的凋亡中Caspase-3是关键的效应分子,目前对于Caspase-3在 肿瘤组织中表达的意义及其与其他凋亡基因在肿瘤发生、发展中 的相互关系研究很少。 ·3· 本研究结果显示,在胆囊良性病变中(慢性胆囊炎、胆?
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R735.8

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