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《中国医科大学》 2002年
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1,2,4—三氯苯对小鼠抗氧化系统的影响

刘军  
【摘要】: 前言 1,2,4—三氯苯(1,2,4—TCB)在自然环境和工业生产中广泛存在,它在自然环境中长期存留和富集会产生一系列环境问题。美国国家环保局(EPA)已将其列入环境污染物清单。 国内外许多学者对1,2,4—TCB的毒性已经作了大量研究,随着活性氧自由基与疾病研究的进展,揭示出自由基与多种毒物损伤存在着密切关系。自由基在体内产生,可发生脂质过氧化,破坏细胞膜的生物功能,造成机体损伤。本研究通过测定急性不同剂量染毒对小鼠全血、心、脑、肝脏和肾脏的氧化损伤,并观察亚急性不同剂量染毒引起的各脏器病理改变,为制订我国1,2,4—TCB的卫生标准提供参考。 材料与方法 1.实验动物分组及染毒 1.1 实验用小鼠40只,雌雄各半,体重25±3克,随机分成4组,每组10只,1个对照组,3个实验组,染毒方式为皮下注射,对照组注射生理盐水,实验组给药剂量分别为1382.2mg/kg、2764.4mg/kg和4146.6mg/kg,染毒一次,24小时后,乙醚麻醉,摘眼球取血,断髓处死小鼠后解剖取出心、脑、肝脏和肾脏,生理盐水冲洗、滤纸滤干后冰冻保存。 1.2 实验用小鼠16只,随机分成4组,每组4只,1个对照组,3个实验组,给实验组皮下注射1,2,4—TCB,剂量分别为1382.2mg/kg、2764.4mg/kg和4146.6mg/kg,对照组注射生理盐 水,染毒4次,间隔4天,第4次染毒后24小时断髓处死动物,解 剖取肝脏和肾脏皮质,制成光镜和电镜病理切片。 2.观察指标与检测方法 2.l 各组织测定前准确称重并制作组织匀浆,血清和组织中 LPO的测定用硫代巴比妥酸门BA)法,全血和组织中超氧化物歧 化酶uOD)活力的测定用亚硝酸盐(Nitrite-hi)法、谷脱甘肽过 氧化物酶(GSH-Px)活力的测定用二硫双硝基苯甲酸(DTNB) 法、总流基门一SH)和非蛋白流基(NP-SH)含量的测定用洲一 man\法。血红蛋白含量的测定用氰化高铁血红蛋白法,组织蛋 白的测定用双缩豚法。 2.2 光镜:常规的10%福尔马林固定、石蜡包埋0E染色; 电镜:2.5%戊二醛初固定*%的饿酸后固定,双重染色。用光镜 和透射电镜观察组织和细胞内部结构的变化,比较实验组和对照 组的组织病理变化。 实验结果 1.血液和组织中LPO、SOD、GSH-Px、T—SH、NP-SH的 测定 小鼠皮下注射入2,4—TCB 24小时后,脑低、中、高三个剂量 组和肝脏中、高剂量组的LPO含量显著高于对照组。同时,脑低。 中、高三个剂量组的SOD活力、NP-SH含量以及低剂量组T-SH 和m-SH含量、高剂量组“H-Px活力与对照组相比均有显著 性差异;肝脏中、高剂量组NP-SH含量和GSH-Px活力与对照 组相比明显降低,而高剂量组SOD活力与对照组相比却显著增 高;肾脏低、中、高三个剂量组的GSH-Px活力以及低剂量组的 NP-SH含量与对照组相比明显降低。全血低、中、高三个剂量组 的GSH-Px活力与对照组相比显著降低,但中剂量组的T-SH ·2· 和m-SH含量却显著升高。表明 1,2,4—TCB进人体内后血液 和组织中脂质过氧化作用增强,相应地引起血液和组织中抗氧化 酶类的变化。 2.组织病理形态学观察 问)光镜结果 肝脏:对照组肝细胞胞浆均匀,无空泡,偶见轻度水样变;低剂 量组肝细胞轻度水样变,汇管区有淋巴细胞、白细胞浸润和血管扩 张充血;中剂量组肝细胞水样变,有点状坏死、再生及间质炎细胞 浸润、肝窦及小血管扩张充血;高剂量组肝细胞水样变性明显,肝 窦及小血管扩张充血,可见点、灶状及桥接坏死,肝细胞再生及汇 管区炎细胞浸润。 肾脏:对照组肾小球、小管结构正常,小管上次轻度水样变;低 剂量组小管上皮轻度水样变,肾间质血管充血;中剂量组小管上皮 细胞水样变性,小球毛细血管丛及间质血管充血;高剂量组小管上 皮中度水样变性,小球毛细血管丛、间质血管扩张充血,肾小管管 腔内有蛋白渗出,间质炎细胞浸润。 光镜下实验组与对照组比较损伤程度有明显差异,并随1,2, 4—TCB浓度增高损伤程度加重,但无性别差异。 p)电镜结果 肝脏:对照组胞浆可见丰富的线粒体、内质网,未见异常改变。 损伤组:线粒体肿胀,畸变短进而消失,内质网扩张,呈空泡状。核 膜、细胞膜弯曲、变形,核染色质分布不均,向核膜聚集,基质疏松 水肿。 肾脏:对照组胞浆可见丰富的线粒体、内质网,未见异常改变。 损伤组:胞浆内线粒体肿胀,崎突起进而消失,内质网广泛解体、离 得,有处呈空泡化,核膜弯曲变形,基质疏松水肿。 ·3· 讨 论 脂质过氧化物中毒性最大的是丙二醛(MDA厂它的含量增多 提示机体内的膜质和蛋白质等生物大分子结构遭到活性氧自由基 的损伤。国内的流行病学调查结果表明:车间内接触1,2,4—TCB 的工人大部分出现神经衰弱症状,表现为失眠、头晕、记忆力减退。 本实验结果显示,小鼠染毒 1,2,4/CB 24
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R114

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