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《中国医科大学》 2002年
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准分子激光角膜切削术后兔角膜和晶体中自由基的变化

盖春柳  
【摘要】: 前言 准分子激光角膜切削术(PRK)已广泛应用于临床,预测性和稳定性较好,是目前治疗近视的最佳手术方法之一。但目前大量的研究证实,氟气体有毒,又由于角膜组织几乎以100%吸收波长低于290nm的紫外线,能产生角膜的毒性反应,体外研究也表明,193nm准分子激光工作时可能产生295—320nm波长的继发激光,可到达晶体、视网膜等组织。而且角膜、晶体等组织易受到氧、光的作用,产生大量自由基,造成细胞损害。故本研究从动物实验入手,通过检测角膜、晶体中自由基的变化,来探讨准分子激光是否对眼组织产生影响。 这为我们探讨准分子激光角膜切削,尤其是高度近视角膜深切削,屈光回退患者行二次补充切削是否产生角膜、晶体损伤,而引起一系列并发症奠定一定的理论基础,同时也为指导临床更加安全、合理、有效地治疗近视提供客观依据。 实验材料与方法 1.实验材料与分组 采用本院动物室提供的成年健康大耳白兔48只(96只眼),雌雄兼用,其中3只白兔(6只眼)为正常对照组,另45只白兔(90只眼)随机分为三组,每组30只眼,Ⅰ组单纯刮除上皮,不做激光切削;Ⅱ组系统设置为-4.0D,切削深度为48um;Ⅲ组系统设置为-8.0D,切削深度为86um。术后分别观察12h、24h、72h、7d、14d。 2.手术方法 用 SUMMIT公司生产的 SUMMIT APex Plus laser system,应用 Software VeGion 3.2 senes中 single zone LASIK with pre眈atment程 序。按每公斤体重 10%异戊巴比妥钠 lrnl肌肉注射麻醉后,将兔 平放于手术台上。测量并记录角膜中央厚度。l组用圆刃刀机械 刮除中央区直径 7rum的角膜上皮,11、且组在此基础上,按预期矫 正度数用准分子激光切削角膜基质,术毕滴氯霉素眼药水。 3.观察指标及方法 分别于术后12h、24h\72h、7d、14d每组各取6只眼,切取中央 角膜组织、摘除晶体。用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒, 测定角膜和晶体中的SOD下SH-PX的活力。 4.统计分析 两组间可行t检验,各组内行方差分析。 实验结果 1.术后不同时间角膜中SOD和GSH-PX活力的动态变化。 经业检验分析,每组SOD的活力在12和24小时、GSH-PX 的活力在24小时与对照组相比下降最明显(P<O.01入叨D活力 在术后7和14天、GSH-PX活力在术后14天皿组与1、11两组 的差异有非常显著性门<0.0门,其余各观察值之间无显著性差 异河>O.05太经方差分析,H、且组叨D的活力在术后14天与 前几个观察时间相比有显著差异瞩<队0门,其它各观察时间之 间无显著性差异泽>0.05人 2.术后不同时间晶体中SOD和GSH-PX活力的动态变化。 经t检验和方差分析,SOD下SH-PX的活力在各组和不同观 察时间的差异均无显著性河>O.05八 ·2· 讨 论 PRK术后角膜基质的主要组织病理学改变是术后24小时见 切削面下有中性粒细胞浸润,术后4天,基质中仍可见中性粒细胞 浸润,但已明显减少,还可见少量巨噬细胞,7天时基质内未见中 性粒细胞浸润,可见散在的角细胞。粒细胞在吞噬过程中和被可 溶性物质激活时会产生呼吸爆破(resPiration burst厂导致自由基 的大量产生。 自由基虽然对生物体产生一定的损害,但生物体又具有一定 的防御作用,即不断产生防御自由基损害的物质,包括抗氧化酶类 和抗氧化剂类。抗氧化酶类主要有超氧化物歧化酶卜uPeroxide dismutase,SOD入过氧化氢酶*atalase,CAT)和谷航甘肽过氧化物 酶(gutathione Peroxidase,GSH-PX)等,它们能有效地清除自由 基。 在我们的实验中,PRK术后各组和不同观察时间角膜、晶体 中SOD和GSH-PX的活力均不同,有先下降后升高,逐渐接近对 照值的趋势,提示PRK术后角膜和晶体中可能存在着自由基反应 的紊乱,自由基清除酶活性下降。/ 我们推测,PRK术后急性期,角膜基质中粒细胞浸润并产生 大量自由基,自由基清除酶一方面因清除*、H。O。等自由基大量 消耗,使活性降低;另一方面,激光切削时大量角膜上皮细胞被刮 除,使广泛分布于上皮中的自由基清除酶活性降低。术后3天角 膜上皮基本愈合,酶活性逐渐回升。经t检验分析,SOD活力在术 后 7天和 14天、GSH-PX活力在术后 14天皿组与 I、11两组的 差异有非常显著性河<o.0门,我们认为切削量大的组可能对角 膜细胞的损伤相对较重,细胞的功能和酶活性恢复较慢,所以要进 行更加深人细致的研究。 ·3· 此外,准分子激光切割角膜时可产生大约130个大气压的压 力,也能产生295----320urn波长的继发激光,可到达晶体,这样就 可以造成晶体的损害,可能是造成晶体中抗氧化酶活力降低的原 因。但经止检验和方差分析,晶体中SOD、GSH-PX的活力在各 组和不同观察时间的差异均无显著性(P>O.05人说明准分子激 光对晶体的损伤可能较轻,且是暂时的,不会随着切削深度的加深
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R779.63

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