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《中国医科大学》 2004年
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腔内热灌注对犬正常胆管影响的实验研究

赵世俊  
【摘要】: 目的 热疗是近些年快速发展起来的一种肿瘤治疗方法,热疗通过与放疗或化疗的联合应用,已经在一些肿瘤的治疗中取得了令人瞩目的疗效。胆管癌热疗目前尚处于探索阶段,关于胆道热疗安全剂量的研究资料也很匿乏。本研究对胆道腔内热灌注方法进行了初步研究,主要从热灌注后胆道影像学及组织形态学方面的改变来探讨其安全剂量及可行性,希望能为胆管癌热疗新方法的探索提供一些有益的参考。 材料与方法 一、实验动物及实验用品 1、实验动物 健康杂种犬10只,由中国医大二院动物中心提供,体重14~20kg,雌雄不限,随机分为3组:(1)正常对照组2只,不做热灌注,直接处死取材;(2)灌注水温43℃组4只(灌注后即刻、1W、2W、4W);(3)灌注水温45℃组4只(灌注后即刻、1W、2W、4W)。 2、实验用品(1)主要器材 恒温水浴箱,热敏电阻温度计(精度±0.2℃),自制5F导管,吸引器,手术器械,X线透视机等。(2)药品 硫喷妥钠,碘酒,酒精,生理盐水,青霉素,泛影葡胺等。 二、实验方法 1、调整灌注液温度 将1000ml生理盐水盛于消毒缸内并放在恒温水浴箱水中加热。术前模拟术中实际灌注过程,将室温控制在22℃,将灌注速度控制在30ml/s左右,调整恒温水浴箱温度,使灌注液流出导管时的温度保持在43℃或45℃,以备术中灌注时使用。 2、动物手术模型的制作 硫喷妥钠30mg/kg腹腔麻醉。开腹直视下经十二指肠乳头逆行插入5F导管至左右肝管分叉处并固定,经导管注入造影剂进行胆道造影以了解灌注前胆道情况。经导管向胆管内持续灌注43℃或45℃生理盐水30分钟,灌注过程中用热敏电阻温度计监测胆总管外壁温度,通过微调灌注速度将其控制在43±0.2℃(43℃组)或45±0.2℃(45℃组)。 3、二次造影、制作标本术后按预定时间(即刻、lw、Zw、4w)分别再次 行胆道造影。处死犬,迅速取材中下段胆总管标本,分成两份,分别经10% 中性福尔马林及2.5%戊二醛固定,常规制作光、电镜切片,分别在光镜及 透射电镜下观察。 结果 1、胆道造影结果胆道造影清晰地显示出胆系的解剖形态。对同一只 犬两次胆道造影进行自身前后对比:无论是43℃组还是45℃组,腔内热灌 注后的肝内外胆管均未见狭窄改变,反而较灌注前轻度扩张。 2、胆道标本HE染色光镜下组织学改变(200倍)正常胆管管壁由粘 膜、肌层及外膜三层构成,各层界限清晰。43℃组各标本粘膜基本完整,上 皮细胞形态正常。43℃组即刻标本呈轻度急性炎症改变,粘膜上皮下可见 大量中性粒细胞浸润,同时可见毛细血管轻度扩张充血,1周后标本炎症明 显减轻,2周时标本已与正常无异。45℃组即刻标本急性炎性反应较重,粘 膜上皮细胞大部分变性坏死并脱落,粘膜下可见大量炎性细胞浸润,毛细血 管扩张充血明显。45℃组IW一4W标本逐渐过渡为慢性炎症改变,粘膜上 皮逐渐修复,粘膜下纤维组织增生,胆管壁轻度增厚。 3、胆道标本透射电镜下超微结构改变(巧砚旧倍)正常胆道上皮细 胞呈柱状,表面微绒毛极其丰富,形态规则,排列整齐。胞质分布均匀,线粒 体丰富,峰结构清晰可见,粗面内质网无扩张,核糖体排列整齐。43℃即刻 标本上皮细胞轻度水肿,表面微绒毛排列稍乱并少量脱落,胞质较正常略疏 松,线粒体轻度肿胀,晴尚清晰,1周后标本上述改变逐渐恢复,2周时已经 恢复至正常。45℃即刻标本上皮细胞多数脱落,残余上皮细胞明显水肿,表 面微绒毛大部分或完全脱落,线粒体明显肿胀并大部分空泡变,内质网扩 张,核糖体解聚;1W后粘膜层逐渐修复,上皮细胞数量增加,细胞器形态开 始恢复,基膜下胶原纤维开始增生;4W后标本粘膜上皮细胞基本修复,但 其表面微绒毛仍较正常稀疏,基膜下可见胶原纤维大量增生。 结论 1、43℃生理盐水对犬胆道持续灌注30分钟,胆管出现轻微的一过性损 伤,短期内完全修复;45℃灌注30分钟,胆管壁粘膜即刻损伤明显,近期内 不完全修复,管壁纤维组织增生,管腔未见狭窄。 2、正常胆道组织对腔内热灌注加热有一定程度的耐受能力,其上限沮 度在45℃左右,43℃,30min是安全剂量。 3、腔内热灌注应用于胆道是可行的并且具有很大潜力。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R735.8

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