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长期慢性碘过量对缺磺甲状腺影响的研究

崇巍  
【摘要】: 目的 碘是甲状腺合成甲状腺激素的必需元素,适当的碘摄入量使甲状腺维持正常的形态和功能。碘缺乏时甲状腺不能合成充足的甲状腺激素,将导致脑发育受损等一系列有害后果,即碘缺乏病(IDD),包括克汀病和单纯性甲状腺肿。国际权威组织推荐普遍食盐加碘(USI)来消除IDD,但是随着全球纠正碘缺乏的快速进展,碘过量出现。为了既有效地防治碘缺乏病,又避免碘过量带来的(?)可能不良后果,WHO等权威组织明确规定人群尿碘中位数(MUI)100μg/L-199μg/L为碘充足,MUI大于300μg/L为碘过量。 为观察碘过量对甲状腺疾病谱的影响,我们对MUI分别为103μg/L,374μg/L,614μg/L的3个不同碘摄入量农村社区进行了对比流行病学调查,结果发现,MUI 374μg/L和614μg/L地区临床甲减的患病率分别是MUI103μg/L地区的3.2倍和7.3倍;亚临床甲减患病率是103μg/L地区的3.2倍和6.6倍。该结果提示了MUI300μg/L-600μg/L水平碘过量有导致甲状腺功能减退的危险。为明确二者的上述关联,本研究就前期的流行病学调查资料进行了多因素分析。 为模拟实际调查中所见MUI300μg/L-600μg/L水平的过量补碘对缺碘地区普通人群的影响,本研究选用Wistar大鼠作为研究对象。该动物对低碘敏感,易于复制出低碘动物模型;该动物无自身免疫倾向,适于模拟普通人群的状态;该动物不同于昆明小鼠,其对高碘有很强的耐受性,故阳性的实验结果更具说服力。本研究所采用的补碘剂量符合流行病调查现场的实况,实践意义明显;本研究采用尿碘监测来反馈实际补碘剂量,从而保证后者始终符合实验设计要求,实验结果可信;本研究历时11个月(制备缺碘动物模型3个月,不同剂量补碘处理8个月),可充分观察施加因素的影响;本研究从血甲状腺功能、吸碘率、过氧化物酶(TPO)活性、蛋白水解酶(TG)活性、甲状腺组织碘、甲状腺组织激素含量、NIS的免疫组化以及甲状腺组织学和超微结构等多个方面,试图比较全面地了解3倍-6倍生理需要量补碘对缺碘甲状腺的影响。 方法 一、流行病学研究 1.调查与对象 根据流行病学历史资料及本次调查前小学生尿碘抽样结果,选择小 学生MUI为83.45林g几、242.85林g几、650.87林g工的三个农村社区分别作 为轻度碘缺乏地区、碘超足量地区、碘过量地区。采取整群抽样的方法, 对所选地区居住超过5年、年龄14岁以上的全部居民进行入户调查。其 中经动员,同意抽取空腹静脉血及留取空腹尿样者确定为研究对象,三 地区分别为:轻度碘缺乏地区1103人(男284,女819)、碘超足量地区1584 人(男375,女1209)、碘过量地区1075人(男275,女799)。 2.数据收集 对以上研究对象进行现场问卷调查。采集清晨空腹血、尿标本。集 中测定血清促甲状腺激素(T SH)、游离三碘甲腺原氨酸(F T3)、游离甲状 腺素(F T4)、甲状腺过氧化物酶抗体(仰oAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb) 和尿碘含量。 3.诊断标准 临床甲减为TSH4.smU几且FT4lo.3pmol几 亚临床甲减为TSH4.smU几且FT4七lo.3pmol/L 4.统计学处理 采用EXCEL软件对调查结果进行录入,应用SAS软件进行统计分 析。单因素分析采用尹检验、t检验、单因素方差分析(ANovA)。 采用Logisti。回归方法进行多因素分析。对于其中呈非正态分布的计量 资料,将其转换为对数形式后再进行统计分析。 二、动物实验 1.缺碘动物模型制备、处理因素和动物处死时间 由中国医科大学实验动物中心提供4周龄Wistar大鼠528只,雌雄 各半,均食本内分泌研究所自行配制的低碘饲料。408只用于制备缺碘 大鼠模型,经双蒸水喂养3个月时处死24只;同期120只大鼠喂养含碘 200。叭的碘酸钾溶液作为正常对照组,亦于喂养3个月时处死24只。 缺碘大鼠模型剩余的384只随机分为4组,每组%只,分别为低碘对照 组、1倍补碘组、3倍补碘组和6倍补碘组,接受不同剂量补碘,分别喂 养双蒸水、含碘200 og/L、600 09几、1 200 pg/L的碘酸钾溶液。正常 对照组剩余的%只大鼠继续原方案喂养。5组大鼠组于补碘开始后的l、 2、4、8个月时各处死24只。 2.标本采集和处理 (l)处死前一天,将大鼠放入代谢笼中,留取24小时尿,一20℃冰箱中保存, 待测尿碘。 (2)动物体重后’以10%水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,取血清于一20℃冰箱 中保存,待测TT3、TT4、FT3、FT4、TSH。。 (3)分离甲状腺组织,称重后做如下处理: 置于液氮中,转一70℃冰箱冻存。用于制作冰冻切片及测定甲状腺组织 过氧化物酶(TPO)、蛋白水解酶(TC)活性以及甲状腺组织碘、T3、 T;含量。2.5%的戊二醛固定者,用于电镜标本制作。 3.实验方法 (l)应用砷饰催化分光光度法测定大鼠尿液和甲状腺组织内碘含量。 (2)应用放射免疫方法测定大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT;(班A,DPC,USA)、 TSH(RJA,Amersham,USA)水平及甲状腺组织T3、T4(RIA,DPC,USA) 含量。 (3)HE染色光镜下进行甲状腺组织形态学观察。 (4)免疫组化方法光镜下进行NIS蛋白表达


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