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《中国医科大学》 2005年
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新生儿脑膜炎大肠杆菌K1株的HBMEC侵袭相关基因功能分析

陈冬松  
【摘要】:目的 大肠杆菌K1株是新生儿细菌性脑膜炎的主要病原菌。现已证实,它经血行散播引起脑部炎症,前提是:它必需穿越血脑屏障。研究穿越血脑屏障的分子机制不仅有助于对细菌致病机制的认识,为疾病的预防和治疗提供新的策略,同时,通过对人脑微血管内皮细胞(HBMEC)的研究为血脑屏障体外模型积累相关资料进而为其他与血脑屏障相关的脑部疾病治疗打下基础。目前,此研究领域中处于领先地位的是由K. S. Kim领导的研究小组,他们发现了多个与大肠杆菌K1株入侵血脑屏障的相关基因,包括:yijP,ibeA,ibeB,aslA,compA,ypdP等,并且,当大肠杆菌K1株与HBMEC接触时,可引起其细胞骨架蛋白的变化及细胞膜聚集性粘附激酶(FAK)的磷酸化,活化PI3K信号通路。最近该小组又发现,在大肠杆菌K1株入侵血脑屏障时,有多条相互独立的信号途径。引起真核寄主细胞骨架的改变是细菌与真核细胞相互作用的重要特征,细菌通过改变寄主肌动蛋白细胞骨架以促进细菌的吸附、入侵等过程。肠道中A/E型病菌所引起的细胞骨架变化在近几年已经有了重要进展,该细菌的Esp蛋白不但是构成Ⅲ型分泌系统的组份,同时,也参与细胞骨架的调节。目前,发现引起脑膜炎的大肠杆菌K1株也可以使HBMEC发生细胞骨架变化但到底是哪个基因产物引起的这些变化还不清楚。本工作的目的是:研究各ibe族基因(ibeA,ibeB,ibeC)在E.coli K1侵袭HBMEC中的作用,如对细胞骨架的影响、细菌与HBMEC结合率和细菌对HBMEC侵袭率等。并由此对各基因的功能进行分析。在此基础上,再通过基因转染的手段,将侵袭相关基因ibeB导入HBMEC,以获得稳定的转基因克隆。进一步研究ibeB阳性克隆细胞的性状变化,对细菌侵袭的影响及可能一些相关信号通路中信号分子的变化,以确定该基因在侵袭过程中的主要作用及相关信号通路。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R722.1

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