收藏本站
《中国医科大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

胚胎干细胞的分离培养和诱导分化为神经细胞的实验研究

王彤  
【摘要】:目的 胚胎干细胞(ESCs)是从囊胚内细胞团(ICM)或胚胎原始生殖细胞(PGCs)中分离、经体外抑制分化培养后筛选出来的具有多能性的细胞,在适当条件下,ES细胞可定向分化为几乎所有种类的细胞,甚至形成复杂的组织和器官。自1998年人胚胎干细胞成功建系以来,引发了新一轮研究胚胎干细胞的热潮。人胚胎干细胞(Human embryonic stem cell,hESC)及其体外定向诱导分化体系的建立,能够模仿乃至重现体内复杂的发育及组织器官的生成过程,而且具备能人工控制、干预和潜在的规模化、规范化与工艺化等特点;对在体外研究人胚胎发生、发育,通过基因修饰和染色体工程生产特定的细胞系,药物开发、毒理学研究时构建人类疾病之离体模型、作为研究多肽生长因子和分化因子的新型工具及细胞治疗、组织工程等诸多方面具有重要的作用。 目前,全球人胚胎干细胞成功建系的以hESs居多,国外建立hEGCs细胞系的仅一例;国内有分离PGC的报道,尚未成功建立hEGCs细胞系。建立胚胎干细胞的体外培养的常规模式,研究和改进保持其全能性和不断增殖能力的培养条件,是研究胚胎干细胞在各个领域应用的重要前提和基础。 本研究尝试通过胚胎干细胞的体外培养,熟悉研究胚胎干细胞的技术路线,对分离出的胚胎干细胞进行体外分化抑制培养并对其加以鉴定;初步掌握人胚胎干细胞分离、建系的技术和方法,探索有效诱导人胚胎生殖细胞为神经细胞的途径,为相关基础研究和临床应用奠定基础。 方法 1.分别以昆明小鼠和人流产胚胎生殖嵴为材料分离内细胞团和原始生殖细胞,种植在小鼠和人胎儿成纤维细胞制成的饲养层上进行扩增培养及
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q813.1

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘民,李柏青;两种来源小鼠胚胎干细胞的分离与培养[J];蚌埠医学院学报;2002年02期
2 胡新立,尚克刚;6个小鼠ES细胞系的建立和鉴定[J];北京大学学报(自然科学版);1996年02期
3 尚克刚,胡新立,李子玉,王学庆,刘爱民,孟国良,童英;饲养层对维持新建ES细胞系的影响[J];北京大学学报(自然科学版);1994年04期
4 刘善荣,刘厚奇,汤淑萍,惠宁,冀凯宏,熊俊,蒋正,戚中田;人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究[J];第二军医大学学报;2003年09期
5 秦茂林,蔡文琴,姚忠祥;昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定[J];第三军医大学学报;2001年09期
6 吴旋,黎海蒂,李树浓,徐海伟,徐令;小鼠胚胎干细胞体外分化为神经前体细胞的研究[J];第三军医大学学报;2001年11期
7 谢常青,林戈,卢光琇;人类成纤维细胞作为人胚胎干细胞饲养层细胞的初步研究[J];科学通报;2002年24期
8 常万存,仲跻峰,宋杰,窦忠英,马鸿飞;人胚胎成纤维细胞的分离培养与检测(简报)[J];农业生物技术学报;1999年02期
9 唐奕,卢光琇;原始生殖细胞体外培养及应用研究[J];生命科学研究;2002年S2期
10 徐洁,丛笑倩,姚鑫;维生素A酸和双丁酰基环腺苷单磷酸对小鼠胚胎干细胞的诱导分化[J];实验生物学报;1991年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 常万存,窦忠英,仲跻峰,宋杰,刘文浩,张蓉;胚胎干细胞研究进展与应用价值[J];山东农业科学;1999年05期
2 李松,窦忠英,华进联,屈雷,苗增民;哺乳动物胚胎干细胞相关细胞因子研究进展[J];山东农业科学;2000年06期
3 杨丽芬;王清华;韩芬霞;项智锋;张晓建;;哺乳动物胚胎干细胞分离与培养的研究进展[J];安徽农业科学;2006年12期
4 王轶敏;王新庄;李金辉;李义书;冯勋伟;;不同培养系统和传代方法对昆明白小鼠原始生殖细胞分离培养的影响[J];安徽农业科学;2008年12期
5 刘茜;王望九;;胚胎干细胞的研究及其应用前景[J];安徽卫生职业技术学院学报;2007年05期
6 安静,杜立新;鸡胚胎干细胞的分离、培养和鉴定[J];动物学报;2003年05期
7 秦洁,李碧春,陈国宏,蔡琳琳,韩威,周冠月,吴洪,孙思宇;鸡胚胎原始生殖细胞的培养和传代[J];动物学报;2005年04期
8 余树民;徐小明;华进联;窦忠英;;小鼠胚胎干细胞建系技术研究进展[J];动物学杂志;2006年01期
9 王英;何津;李玉林;;人胚胎成纤维细胞的分离、培养和鉴定及人胚胎生殖细胞体外生长所需细胞因子的表达[J];吉林大学学报(医学版);2007年02期
10 何津;王英;张晓霞;李玉林;;人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜来源的成纤维样细胞作为饲养层体外培养人胚胎生殖细胞方法的建立[J];吉林大学学报(医学版);2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 张丽瑞;李旭;陈葳;;人胚胎干细胞建系的方法学研究进展[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
2 李冬旭;郑鹏;于磊;黄贺;田亚光;张贵学;;新生牛睾丸生殖细胞体外培养、增殖与分化[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(下册)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 段恒;补肾中药对卵细胞体外成熟的影响[D];成都中医药大学;2010年
2 孟步亮;BDNF转基因成纤维细胞移植促进脊髓可塑性的分子信号通路研究[D];昆明医学院;2011年
3 李晓霞;基因重组蛋白诱导多能干细胞基础研究[D];暨南大学;2011年
4 梁洋;蜘蛛拖丝蛋白基因Spidroin1嵌合体小鼠的研究[D];东北林业大学;2011年
5 赵高平;马体细胞核移植的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
6 曾春贤;miR-122调控网络及其生物学功能[D];中山大学;2011年
7 吴旋;基因工程化胚胎干细胞用于AD治疗的基础实验研究[D];第三军医大学;2001年
8 李相运;小鼠胚胎干细胞多能性研究[D];西北农林科技大学;2001年
9 吕红兵;颅神经嵴细胞的培养特性及向神经细胞、成骨细胞的定向诱导分化[D];第四军医大学;2002年
10 陆群;牙髓干细胞分离培养鉴定和体外诱导分化的研究[D];第四军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈世彬;昆明小鼠胚胎干细胞培养体系的优化[D];新疆农业大学;2010年
2 张泰鹏;甘露醇对骨髓充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠行为学与海马胆碱能系统的影响[D];广西医科大学;2011年
3 廖高鹏;黄鳝Fucal基因克隆及SSEA与Fucal在黄鳝性腺组织中的分化表达[D];湖南师范大学;2011年
4 薛宏艳;转Fat-1基因蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系的建立[D];内蒙古农业大学;2011年
5 张帆;淫羊藿苷诱导人脐带间充质干细胞分化为成骨细胞的实验研究[D];郑州大学;2011年
6 周小波;人脐血间充质干细胞体外分离培养与扩增的实验研究[D];广州医学院;2010年
7 张志逖;两种不同分离、纯化方法对SD大鼠BMSCs生物学特性影响的研究[D];泰山医学院;2011年
8 俞晓丽;山羊早期胚胎发育过程中胚胎干细胞标记分子的表达检测[D];西北农林科技大学;2011年
9 王士珍;人胚胎生殖细胞向心肌细胞诱导分化及质谱分析研究[D];苏州大学;2011年
10 程静波;早衰小鼠P1型(SAMP1)胚胎干细胞的建系研究[D];浙江理工大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡新立,尚克刚;6个小鼠ES细胞系的建立和鉴定[J];北京大学学报(自然科学版);1996年02期
2 杨晓,孙彦洵,周江,黄培堂,黄翠芬,徐晓玲,李翠玲,J.Cotay,陈林,邓初夏;Smad5双等位基因剔除ES细胞的建立及其初步研究[J];中国科学(C辑:生命科学);2000年06期
3 陈德英,王海燕,刘建军;利用内源性碱性磷酸酶显示胆小管[J];解剖科学进展;2000年04期
4 周江,杨晓,孙彦旬,吕雅歆,黄翠芬;G418抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层的制备[J];军事医学科学院院刊;2001年01期
5 郭晓霞,贺福初;胚胎干细胞的研究与利用[J];科学通报;2000年05期
6 徐令,乔春平,黄绍良,李树浓,吴旋;体外定向诱导胚胎干细胞为造血细胞[J];科学通报;2000年08期
7 曲莉芝,顾为望,李晋红,张玉勋,丘添武,罗凤娟;免疫抑制诱发大鼠结肠小袋纤毛虫病的研究[J];上海实验动物科学;1999年01期
8 丛笑倩,姚(金王玉);小鼠胚胎干细胞(ES-8501细胞)建系过程的核型及特性分析[J];实验生物学报;1987年02期
9 施渭康,丛笑倩,姚■;小鼠早期胚胎发育期间TGF-β_1免疫组织化学定位[J];实验生物学报;1990年04期
10 徐洁,丛笑倩,姚鑫;维生素A酸和双丁酰基环腺苷单磷酸对小鼠胚胎干细胞的诱导分化[J];实验生物学报;1991年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨恕玲;董雅娟;柏学进;程明;李建栋;王雪红;董方圆;;昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养[J];生物技术通报;2006年S1期
2 刘胜;华进联;于海生;窦忠英;;人类饲养层及无血清培养体系培养人类胚胎生殖细胞研究(英文)[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年03期
3 李松;苗增民;高佩安;江新泉;窦忠英;;胚胎干细胞技术[J];生物学通报;2006年07期
4 李松;高佩安;江新泉;窦忠英;苗增民;;从原始生殖细胞中分离克隆胚胎干细胞的研究[J];中国畜牧兽医;2008年06期
5 于海生;华进联;王洪锋;杨炜峰;刘胜;蒋会婷;窦忠英;;人类原始生殖细胞的体外培养[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2006年02期
6 张秋婷;苗向阳;安铁洙;;饲养层及细胞因子对鸡PGCs体外培养的影响[J];生物技术通报;2009年06期
7 许杰;马恒东;郝泽东;;胚胎干细胞的研究进展[J];中国畜牧杂志;2006年13期
8 刘登华,肖文伍,陈红,张苏明;小鼠胚胎干细胞体外分离培养影响因素的实验研究[J];华中科技大学学报(医学版);2004年06期
9 韩建永,桑润滋,常万存;哺乳动物PGCs用于多能性干细胞培养的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2001年05期
10 董书伟;冯秀亮;段艳萍;杨春荣;杨学义;窦忠英;;昆明小鼠原始生殖细胞无血清培养基的筛选[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡敏华;区颖蕾;李莉;郭欣政;张守全;;胚胎干细胞饲养层的优化及影响内细胞团贴壁率的探讨[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
2 王锦绣;;胚胎干细胞定向诱导分化为胰岛素前体细胞的实验[A];2007年中国解剖学会第十届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
3 陈胜锋;黄文静;王丙云;陈志胜;计慧琴;;不同饲养层对鸡胚胎干细胞培养效果的影响[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
4 徐小明;窦忠英;华进联;葛秀国;;免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
5 陆永良;姚行;戴利成;邵健忠;张铭;张念慈;郭箭;劳涛涛;项黎新;赵小立;杜英;;人和小鼠胚胎干细胞培养与体外定向诱导心肌细胞分化研究[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
6 熊吉信;刘小春;刘兆轩;杨春江;;TGF-β1 VEGF体外诱导胚胎干细胞为血管内皮细胞[A];2009全国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2009年
7 王丙云;陈胜锋;陈志胜;计慧琴;;禽类胚胎干细胞的研究概况[A];全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编[C];2006年
8 徐小明;华进联;葛秀国;窦忠英;;牛胚胎生殖细胞的分离与培养[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
9 陈胜锋;王丙云;计慧琴;陈志胜;刘雪芬;;鸡胚胎干细胞的分离、培养与鉴定的初步研究[A];全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编[C];2006年
10 刘艳;黄海军;高其双;蒋思文;;山羊类ES细胞的分离与培养[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王洋;胚胎干细胞是“人”吗?[N];医药经济报;2002年
2 张树庸 赵贵英;干细胞研究的突破[N];人民日报;2009年
3 记者 刘霞;英用胚胎干细胞制造出红血球[N];科技日报;2010年
4 记者 郑晓春;科学家发现胚胎干细胞分化机制[N];科技日报;2008年
5 孙国根;复旦大学成功提取首个大鼠胚胎干细胞[N];中国医药报;2009年
6 本报首席记者 任荃;第二颗“全能种子”会不会抢先“发芽”[N];文汇报;2009年
7 记者 李大庆;“小小”入选《时代周刊》2009年十大医学突破[N];科技日报;2009年
8 曹淑芬;用胚胎干细胞生成骨骼[N];中国中医药报;2001年
9 闫洁;胚胎干细胞治疗:首次临床试验[N];新华每日电讯;2010年
10 刘霞;美用胚胎干细胞制造出血小板[N];科技日报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王彤;胚胎干细胞的分离培养和诱导分化为神经细胞的实验研究[D];中国医科大学;2005年
2 曲文玉;人胚胎干细胞的分离、培养及建系[D];中国医科大学;2006年
3 葛秀国;山羊胚胎干细胞的分离与培养[D];西北农林科技大学;2007年
4 华进联;人类胚胎生殖细胞的分离克隆及生物学特性研究[D];西北农林科技大学;2005年
5 姜景岩;胚胎干细胞来源的造血干/祖细胞辅助化疗的实验研究[D];山东大学;2005年
6 刘岚;胚胎干细胞的分离培养与定向分化研究[D];中国农业科学院;2008年
7 杨炜峰;山羊胚胎干细胞和胚胎生殖细胞的分离培养与鉴定[D];西北农林科技大学;2006年
8 李芳菲;人胚胎生殖细胞自我更新及分化的机制研究[D];重庆医科大学;2007年
9 谭舟;MK和GM-CSFRα在胚胎干细胞中的表达与功能研究[D];浙江大学;2010年
10 赵惠萍;骨髓内皮细胞条件培养液诱导胚胎干细胞向造血细胞分化[D];中南大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王轶敏;昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养[D];西北农林科技大学;2008年
2 李三华;昆白小鼠胚胎干细胞的分离、培养及鉴定[D];西北农林科技大学;2006年
3 李吉霞;小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养[D];西北农林科技大学;2005年
4 孙国杰;山羊类胚胎干细胞的分离、克隆[D];河北农业大学;2002年
5 杨继建;山羊胚胎干细胞的分离与克隆[D];西北农林科技大学;2005年
6 赵晶;昆明小鼠胚胎干细胞的分离、培养及鉴定[D];西北农林科技大学;2008年
7 熊浩;山羊原始生殖细胞的分离培养[D];扬州大学;2010年
8 董书伟;小鼠和人胚胎生殖细胞的分离与无血清培养[D];西北农林科技大学;2007年
9 韩晓芳;MEF和hLEF对小鼠ES细胞支持作用的比较性研究[D];华中科技大学;2009年
10 李义书;兔类胚胎干细胞体外培养体系的优化与建立[D];西北农林科技大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026